河源地区不明原因复发性流产患者免疫治疗的研究分析

吴燕 李汉煌 朱彩容

[摘要] 目的 研究河源地區不明原因复发性流产（RSA）患者采用淋巴细胞主动免疫治疗后的临床效果。方法 方便选取2015 年4 月—2017 年11 月在该院妇科门诊或妇保科收治的79例封闭抗体（BA）阴性的不明原因复发性流产患者进行淋巴细胞主动免疫治疗，以复查BA判断临床疗效。结果 患者经主动免疫治疗1个疗程后，BA阳性率为83.54%（66/79），2个疗程后BA阳性率为91.14%（72/79），与治疗前比较差异有统计学意义（χ2=12.07、5.38，P<0.01）；免疫治疗后，BA转阳性患者中，妊娠率为59.72%（43/72），经治疗后BA仍为阴性的患者中，妊娠率57.14%（4/7），两组比较差异无统计学意义（χ2=0.07，P>0.05）；免疫治疗后，BA转阳并已妊娠的患者中，接受孕后加强免疫治疗为研究组，共30例，其中妊娠成功90.00%（27/30），不成功妊娠10.00%（3/30），未接受孕后加强免疫治疗为对照组，共13例，其中妊娠成功46.15%（6/13），不成功妊娠53.85%（7/13），两组比较差异有统计学意义（χ2=13.36，P<0.01）。结论 淋巴细胞主动免疫治疗河源地区不明原因复发性流产患者能提高BA阳性率，及对其再次妊娠具有临床应用价值。

[关键词] 复发性流产；不明原因；封闭抗体；免疫治疗

[中图分类号] R714 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2018）05（a）-0013-03

Research and Analysis of Immune Treatment of Patients with Unexplained Recurrent Abortion in Heyuan Region

WU Yan， LI Han-huang， ZHU Cai-rong

Heyuan Maternal and Infant Healthcare Hospital， Heyuan， Guangdong Province， 517000 China

[Abstract] Objective To research the clinical effect of immune treatment of patients with unexplained recurrent abortion in Heyuan region. Methods Convenient selected 79 cases of BA negative unexplained recurrent abortion in Heyuan region for the active lymphocyte immunotherapy admitted and treated in the outpatient in the department of gynecology and department of gynecology and obstetrics from April 2015 to November 2017， and the clinical curative effect was determined by checking BA. Results After 1 treatment course of active immune therapy， the BA positive rate was 83.54%（66/79）， after 2-treatment course， the BA positive rate was 91.14%（72/79）， and the differences were highly statistically significant compared with those before treatment（χ2=12.07， 5.38， P<0.01）， after the immune therapy， the BA negative conversion patients， the pregnancy rate was 59.72%（43/72）， after the treatment， the pregnancy rate was 57.14%（4/7）， and the difference between the two groups was not statistically significant （χ2=0.07，P>0. 05）； after the immune therapy， 0f 30 cases enhancing the immune therapy after pregnancy， the gestational success rate was 90.00%（27/30） and the unsuccessful rate was 10.00%（3/30）， and of 13 cases not enhancing the immune therapy in the control group， the successful rate was 46.15%（6/13） and the unsuccessful rate was 53.85%（7/13）， and the differences were statistically significant（χ2=13.36， P<0.01）. Conclusion The active lymphocyte immunization therapy of patients with unexplained recurrent abortion in Heyuan region can improve the BA positive rate， and it is of clinical application value to the second pregnancy.

[Key words] Recurrent abortion； Unexplained； Blocking antibody； Immune therapy

复发性流产（repetitive spontaneous abortion，RSA）是指自然流产次数≥2次的患者，妊娠早期为疾病高发期，是妇产科常见病，在已婚妇女占得比例大约12%[1-2]，病因复杂尚无定论。部分学者指出可与染色体异常或生殖解剖结构异常等有关。还有学者认为，疾病可能与其他免疫系疾病、生活条件和环境及心理因素等有关[3]。还有42%～82%的其他因素尚未确认[4-6]，现将原因不明的RSA称之为不明原因复发性流产（URSA）。近年来，随着生殖医学尤其是免疫学的不断发展，生殖免疫学治疗技术的提高， 发现许多不明原因导致的反复流产与免疫因素密切相关。文献指出[7]，RSA患者的BA阳性率极低，而研究发现给予患者主动免疫治疗可取得理想的临床疗效，可以有效提高患者的受孕率。临床认为主动免疫治疗可以以配偶或健康第三方淋巴细胞作为治疗的免疫因素，达到理想的疗效。目前，解决患者不明原因复发性流产问题，已经成为临床高度重视的课题。该研究以2015 年4 月—2017 年11 月该院收治的79例河源地区BA阴性的URSA患者为例，对患者进行淋巴细胞主动免疫治疗，探讨其临床疗效，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究对象为方便选取在该院妇科门诊或妇保科就诊符合复发流产诊断的患者79例， 选取的患者均为封闭抗体阴性，平均年龄（29.04±4.10）岁，最小22岁，最大40岁，流产次数2～5次，平均2.25 次，治疗前所有患者及家属签订与治疗相关的知情书，研究对象需符合以下条件： ①患者历史流产次数≥2次；② 排除支、衣原体生殖道感染症状；③通过测定激素六项等排除内分泌疾病；④患者双方染色体核型无异常；⑤无生殖器畸形及其他先天性免疫系统病变等；⑥女方自身免疫性抗体检查无异常[8]。

1.2 方法

1.2.1 封闭抗体（BA）检测 检测方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA），采用美国OneLambda公司生产[4]的试剂盒。抽取患者外周血2～3 mL，3 000 r/min离心分离出血清备用，按说明书操作步骤进行实验。

1.2.2 淋巴细胞主动免疫治疗方法 抽取丈夫或第三者（需排除血清HIV、梅毒、甲肝、丙肝、乙肝等传染病）外周血15～20 mL（肝素抗凝），淋巴细胞提取过程必须在无菌条件下操作，为保证提取质量，对提取后的细胞使用生理盐水反复冲洗3次，调至细胞悬液量1.8 mL，采用皮内多点注射方法，在患者上臂内侧注射六个点，左右各3个点，每周进行免疫治疗一次，每个疗程4次，孕前每次间隔3周，1个疗程完成后2周复查BA，如果BA转阳，需在半年内尽早怀孕，否则需进行加强治疗，间隔4～6周，直到成功受孕，怀孕后继续每2周1次，直至14周左右；仍为阴性患者则进行第2个疗程，随后复查[9]。

1.2.3 观察指标 患者经淋巴细胞主动免疫治疗后，分析BA转阳率、再次妊娠流产情况等，经治疗后超声检查提示妊娠维持至14 周以上即判为妊娠成功。

1.3 统计方法

采用SPSS 19.0统计学软件分析数据，该次实验研究数据组间比较采用χ2检验，P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 免疫治疗后BA变化

接受免疫治疗且BA均为阴性的79例URSA患者，经治疗1个疗程后，BA转阳率为83.54%（66/79），经2个疗程治疗后BA阳性率为91.14%（72/79），与治疗前比较差异有统计学意义（χ2=12.07、5.38，P<0.01）。见表1。

2.2 免疫治疗对URSA患者怀孕机会的影响

免疫治疗后，BA转阳性患者中，妊娠率为59.72%（43/72），经治疗后BA仍为阴性的患者中，妊娠率57.14%（4/7），两组比较差异无统计学意义（χ2=0.07，P>0.05）。

2.3 免疫治疗后的临床研究分析

经治疗后BA转为阳性并已怀孕的患者中，接受孕后加强免疫治疗为研究组，共30例，其中妊娠成功90.00%（27/30），不成功妊娠10.00%（3/30），未接受孕后加强免疫治疗为对照组，共13例，其中妊娠成功46.15%（6/13），不成功妊娠53.85%（7/13），两组比较差异有有统计学意义（χ2=13.36，P<0.01）。见表2。

3 讨论

随着科技的发展， 生活水平的提高， 妊娠生育越来越受到大家的关注， 妊娠期流产是不可忽视的问题， 其中复发性流产的发病率约为4%， 这类疾病超过一半的发病机制与免疫因素有关[10-11]。现代生殖免疫学认为，妊娠的过程类似于半同种移植[12]，宫内胚胎移植物的正常维持，既需要母体自身正常免疫功能，又需要其他免疫调节的协同作用，如封閉抗体（BA）特异性的封闭效应。适龄生育妇女体内都存在一定水平的BA， 妊娠时来自父母双方的白细胞抗原（HLA） 相互排斥， 父源性HLA 抗原属于外来物，促进母体免疫系统发生应答，促进封闭因子释放；因子与人体的滋养细胞结合，或与淋巴细胞表面的抗原结合，进而截断了母与子之间的免疫识别及免疫反应[13-14]，减少免疫排斥反应， 这样能增加胚胎的成活率， 降低流产概率。关于RSA的很多研究提出，RSA的发生率与母体BA水平存在直接关联，且BA水平与流产次数相关，流产次数越多，人体内的BA水平就越低[15]。

河源地区免疫治疗的79 例URSA患者中，治疗前均为阴性，经一两个疗程治疗后，BA阳性率分别为83.54%、91.14%，与治疗前比较均差异有统计学意义（P<0.01）。结果提示淋巴细胞主动免疫治疗对提高患者体内BA水平有积极作用。这一研究结果与国内相关学者研究相一致[16]，其2个疗程治疗后BA阳性率89.63%，与该次研究结果相近；经治疗后BA成功转为阳性的72例患者中，怀孕率为59.72%；经治疗后BA仍为阴性的7例患者中，怀孕率57.14%，两组比较差异无统计学意义（P>0.05），反应出BA阳性与否对河源地区URSA患者怀孕的机会并无太大影响。经治疗后BA转为阳性并已怀孕的患者中，接受孕后加强免疫治疗设为研究组，共30例，其中27例妊娠成功，3例再次结局不良，成功妊娠率为90.00%；未接受孕后加强免疫治疗设为对照组，共13例，其中妊娠成功6例，7例再次结局不良，成功妊娠率为46.15%，两组比较差异有统计学意义（P<0.05），表明河源地区URSA患者经淋巴细胞主动免疫治疗BA转阳后，再次妊娠后须做加强治疗，增加母体内BA，形成免疫耐受，从而保护胎儿，因此显著提高了再次妊娠成功率。

综上所述， 在河源地区，对于BA阴性不明原因复发性流产患者，应及时利用丈夫或第三者血清中淋巴细胞主动免疫疗法治疗， 提高BA阳性率，并在其再次妊娠后需积极进行加强治疗，有效提高再次妊娠成功率。因此，淋巴细胞主动免疫治疗法简单易行，可有效提高河源地区不明原因复发性流产患者的成功受孕率，具有积极的推广价值，且治疗周期短、免疫反应强、减少经济负担且患者容易接受，可以在临床上长期发展。对于经淋巴细胞主动免疫治疗后BA仍为阴性或转阳后受孕率未见显著提高，但孕后继续进行免疫治疗的成功分娩的概率明显提高。如存在其他未知原因，需要继续进行更深入的研究分析。

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（收稿日期：2018-02-06）