LKB1 VEGFR2 ARK5在非小细胞肺癌中的表达及意义

王姝

LKB1 VEGFR2 ARK5在非小细胞肺癌中的表达及意义

王姝

目的探讨LKB1、VEGFR2、ARK5在人非小细胞肺癌（NSCLC）发生、发展中的作用。方法应用免疫组化S-P法检测LKB1、VEGFR2、ARK5在50例非小细胞肺癌标本和10例癌旁正常肺组织标本中的表达。结果LKB1在癌旁正常肺组织中的阳性表达率明显高于NSCLC组织（P＜0.05）；VEGFR2、ARK5在NSCLC组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常肺组织（P＜0.05）。LKB1、VEGFR2、ARK5在NSCLC组织中的表达与患者的年龄、性别、组织学类型无关（P＞0.05）；与临床分期存在相关性（P＜0.05），与淋巴结转移有相关性（P＜0.05）；在组织学分级中，NSCLC高分化组与低分化组比较，三者阳性表达率均有显著性差异（P＜0.05）。结论LKB1、VEGFR2、ARK5均在NSCLC中表达，与NSCLC临床病理特征密切相关，共同参与NSCLC的发生发展。

非小细胞肺癌 LKB1 VEGFR2 ARK5

肺癌是呼吸系统最常见的恶性肿瘤，非小细胞肺癌（NSCLC）是肺癌的主要类型，发病率和病死率均较高。目前的研究热点之一是从蛋白表达层面来判断肿瘤的进展和预后。LKB1具有促进细胞凋亡作用，其失活可能会导致细胞无节制的生长及促进肿瘤新生血管的形成；VEGF是目前公认的肿瘤血管生成的重要刺激因子，与VEGFR2结合后可促进肿瘤血管生成、浸润和转移。另外，当肿瘤细胞处于代谢应激状态时，ARK5被激活，可以暂缓细胞生长以降低能量消耗、抑制细胞凋亡及炎症反应。本文探讨LKB1、VEGFR2、ARK5在NSCLC发生、发展中的作用。

1 临床资料

1.1 一般资料 选择2010年1月至2012年12月本院手术切除非小细胞肺癌标本50例，所有病例术前均未作放疗、化疗、生物治疗等抗肿瘤治疗。男33例，女17例；年龄35～74岁，平均年龄（57.2±8.6）岁。其中鳞癌26例、腺癌24例。高分化癌14例、中分化癌23例、低分化癌13例。有淋巴结转移23例、无淋巴结转移27例。TNM分期依据2009年国际抗癌联盟（UICC）TNM分期标准，Ⅰ～Ⅱ期39例、Ⅲ～Ⅳ期11例。另选取癌旁正常肺组织10例为对照组。常规固定石蜡包埋切片。

1.2 方法 采用免疫组织化学技术S-P法。用试剂公司提供的已知LKB1、VEGFR2、ARK5阳性的切片为阳性对照，磷酸盐缓冲液PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0软件。数据用阳性率表示（%），采用χ2检验及Spearman等级相关方法检验显著性及相关性。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 LKB1、VEGFR2和ARK5蛋白表达染色结果 LKB1在癌组织及癌旁正常肺组织中均有表达，其阳性颗粒主要位于细胞质，细胞核也有少量表达，呈棕黄色颗粒；在癌组织中检测到VEGFR2的阳性表达，阳性表达呈棕黄色颗粒，定位于细胞膜上和细胞质内；在癌组织中同样检测到ARK5的阳性表达，在细胞质内呈现棕黄色颗粒。而在癌旁正常肺组织中均未检测到VEGFR2、ARK5的阳性表达。

2.2 LKB1、VEGFR2和ARK5蛋白表达与临床特征的关系 LKB1、VEGFR2、ARK5在癌组织中的表达与患者的年龄、性别、组织学类型无相关性（P＞0.05），与临床分期、淋巴结有无转移、不同分化程度差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 LKB1、VEGFR2和ARK5阳性表达表达与临床特征的关系［n（%）］

3 讨论

LKB1基因是具有普遍作用的抑癌基因，目前研究认为LKBl 基因在抑制细胞增殖、诱导细胞极性及调控细胞能量代谢等方面发挥重要作用，其功能异常还与肺癌的发生密切相关［1］。本资料结果表明，LKB1在癌组织中低表达，分化程度低、TNM分期晚、淋巴结转移阳性组中LKB1的表达亦呈降低趋势，提示LKB1蛋白可能是NSCLC发生的关键性屏障，在控制肿瘤的发生、发展及分化过程中起着十分重要的负调控作用，其高表达可以抑制肿瘤的生长、浸润和转移。这与文献报道［2-3］一致。LKB1与患者的年龄、性别无明显相关性，与组织学类型亦无相关或关联较少（这与Koivunen等的研究报道不一致，分析原因考虑可能与研究人群的种族差异［4］及本组研究标本量少有关）。目前认为，新生血管的生成有利于肿瘤的生长，且提供肿瘤转移的通道。故抑制肿瘤血管的生成可被认为是治疗肿瘤的有效途径之一。而VEGFR2的主要功能是在各种生理病理情况下介导新生血管的生成。据本资料结果可以推测 VEGFR2的高表达可能导致肿瘤血管生成增加、肿瘤生长及转移加速。近年来研究认为恶性肿瘤如肺癌、前列腺癌、肝癌、乳腺癌、子宫内膜癌及卵巢癌等，其发展、转移、预后与血管内皮细胞生长因子及其受体家族相关［5］。本资料结果与文献报道一致。但到目前为止，恩度、舒尼替尼等一部分相关药物已投入临床使用，但效果欠理想，分析原因可能恶性肿瘤新生血管的形成机制多重复杂，故未来研发多靶点药物可能会有更广泛的临床应用。

肿瘤细胞的过度增殖，必然导致其周围能量缺乏。此时ARK5被激活，使肿瘤细胞渡过代谢应激状态、抑制肿瘤细胞的凋亡、促进肿瘤的侵袭与转移及促进毛细血管的生成。转移能力强的肺癌组织在肿瘤的发生、浸润、转移过程中可能更易处于能量缺乏状态，从而导致ARK5的高表达。ARK5可作为判断肿瘤细胞恶性程度及有无发生浸润转移的一个参考指标。但同时提示ARK5在肺癌中的表达与组织性类型差异无统计学意义，考虑可能与两组研究标本量均偏少（50例左右）以及本组研究所选鳞癌标本中低分化者居多而文献中的相关标本低、中、高分化者平均分布有关。

综上所述，LKB1、VEGFR2、ARK5可作为反映NSCLC生物学行为的可靠指标，对指导治疗有参考价值。

［1］Vaahtomeri K,Makela TP.Molecular mechanisms of tumor suppression by LKB1.FEBS Lett,2011,585(7)：944.

［2］Roy BC,Kohno T,Iwakawa R,et al. Involvement of LKB1 in epithelial-mesenchymal transition(EMT)of human lung cancer cells. Lung Cancer, 2010,7(2)：136-145.

［3］Slack-Davis J, Dasilav J O, Parsons S J. LKB1 and Src：antagonistic regulators of tumor growth and metastasis. Cancer Cell, 2010, 17(6)： 527-529.

［4］Suzuki Y, Oonishi T, Kudo T, et al. Lkb1,TP16,Egfr, and KRAS somatic mutations in lung adenocarcinomas from a Chiba Prefecture Japan cohort. Drug Discoveries ＆ Therapeu- tics, 2012,6(1)：24-30.

［5］Koukourakis MI, Limberis V, Tentes I, et al. Serum VEGF levels and tissue activation of VEGFR2/KDR receptors in patients with breast and gynecologic cancer. Cytokine, 2011, 53(3)：370-375.

ObjectiveTo study the expression of LKB1、VEGFR2、ARK5 on genesis and development of non-small cell lung cancer. Method The expression of LKB1、VEGFR2、ARK5 was detected by the S-P immunohistochemistry method in 50 cases of non-small cell lung cancer and 10 cases of normal lung tissue adjacent to the tumors. Result（1）Expression of LKB1 in normal lung tissue was a signifi cantly higher level than that in NSCLC（P＜0.05）. The expression level of VEGFR2 and ARK5 proteins in NSCLC was signifi cantly higher than that in normal lung tissue（P＜0.05）.（2）In NSCLC，the expression of LKB1、VEGFR2、ARK5 proteins has nothing to do with age，sex and histological type.The positive expression of LKB1 protein was significantly higher in well-differentiated，without lymph node metastasis tissues and StageⅠ-ⅡNSCLC than that in poorly differentiated，with Lymph node metastasis tissues and Stage Ⅲ-Ⅳ（P＜0.05）.ConclusionExpression of LKB1、VEGFR2、ARK5 in NSCLC suggests that they may play an important role in the development of NSCLC.

NSCLC LKB1 VEGFR2 ARK5

215600 江苏省张家港市第一人民医院呼吸内科