黔产天冬饮片切制工艺研究

刘亮陈东林万路平丁丽娜冯华

【摘要】目的：优选天冬饮片的最佳切制工艺，并为其他饮片的切制工艺提供参考。方法：采用单因素及正交试验法，以饮片中总皂苷的得率为主要考察指标，选择软化方法、切片厚度及干燥方法为考察因素，优化饮片的炮制工艺。结果：优选出的炮制工艺为： 天冬药材水蒸气蒸3min后，横切1mm薄片，60℃烘12h。结论：本法操作简便，优选出的炮制工艺稳定可行，重现性好。

【关键词】天冬；切制；工艺研究

【中图分类号】R282.4【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2016）21-0014-03

天冬为百合科多年生攀援草本植物天门冬Asparagus cochinchinensis（Lour.）Merr.的块根，具有养阴清热，润肺滋肾的功效，是一种临床常用中药。天冬是贵州省内的大宗药材，种植面积较大，仅在遵义市凤冈县就有近3000亩的种植基地。天冬主要含有糖类、氨基酸、皂苷类等成分[1]，具有抗氧化、抗衰老、抗菌等生理作用[2]。万路平等[3]采用正交试验优化了天冬的渗漉工艺；杜芳权和刘亮等[4-5]对天冬多糖和总皂苷超声提取工艺进行了研究，但尚未见天冬饮片炮制工艺研究的报道。《中国药典》（2015年版）对天冬的描述也仅是“除去杂质，迅速洗净，切薄片，干燥”，没有具体的炮制工艺参数。本研究对天冬饮片的炮制工艺进行了优化，旨在为建立天冬质量控制标准和进一步开发利用提供参考。

1仪器与材料

1.1仪器UV2501紫外分光光度计（日本岛津）；Aquelix 5型试验室高纯水系统（重庆市金富科技发展有限公司）；DHG 90AOA型电热恒温鼓风干燥箱（宁波江南仪器厂）；Senco R系列旋转蒸发仪（上海申生科技有限公司）；DKS-26型电热恒温水浴锅（宁波江南仪器厂）；FA2004B型电子天平（上海越平科学仪器有限公司）。

1.2材料菝葜皂苷元对照品（批号：126-19-2，上海圻明生物科技有限公司）；天冬药材于2016年6月收集于贵州遵义，经张学愈副教授鉴定为百合科植物天门冬Asparagus cochinchinensis（Lour.）Merr.的块根；所用水为纯化水，试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1单因素试验

2.1.1软化方法考察①烘软：取质地坚硬的天冬药材，置于烘箱中，分别考察60℃、80℃、100℃烘5min后，每隔5min用弯曲法和切制法进行检查，结果60℃、80℃均在20min时全部软化，100℃因温度过高未出现全部软化现象，故烘软确定为60℃烘20min。②润软：取质地坚硬的天冬药材，分别采用抢水洗及适量水浸泡5min后，均用湿纱布盖润，每隔30min观察一次软化情况，结果抢水洗后润及浸泡后润均在4h时全部软化，考虑泡法易损失有效成分，故润软选择为抢水洗后湿纱布盖润4h。③蒸软：取质地坚硬的天冬药材，用水蒸气蒸1min后，每隔1min观察一次，结果3min时可全部软化。

2.1.2干燥方法考察取质地坚硬的天冬药材，抢水洗后，用湿纱布盖润4h，切制成2mm的片，进行以下三种干燥方法试验：①烘干：将天冬片放入烘箱中，60℃加热干燥，每隔2h观察一次，结果12h后，全部硬化，干燥完成。②晒干：将天冬片置于阳光下照射，每隔2h观察一次，结果28h后，全部干燥。③阴干：将天冬片置于阴凉处，每隔12h观察一次，结果96h后，全部干燥。

2.1.3切片厚度考察《中国药典》（2015年版）对饮片厚度要求主要有三种，极薄片（0.5mm以下），薄片（1～2mm），厚片（2～4mm）。综合考虑切制的难易程度，确定1mm、2mm、4mm作为正交试验中天冬切片厚度的三个水平。

2.2正交试验

2.2.1因素水平设计试验以天冬中总皂苷的得率为主要考察指标，选择软化方法、切片厚度、干燥方法三因素为考察因素[6-11]，采用L9（34）正交设计表进行试验。正交因素水平表见表1。

2.2.2样品溶液的制备称取各试验号中干燥后的天冬片2g，置于100mL具塞锥形瓶中，分别加入12倍量的水，在恒温水浴锅中70℃提取两次，每次1h，过滤，滤液转移至100mL容量瓶中加水稀释至刻度，摇匀。用移液管精密移取10mL于分液漏斗中，用正丁醇（水饱合）15mL萃取，共3次，合并3次正丁醇萃取液，再用水（正丁醇饱和）20mL反萃，用旋转蒸发仪回收正丁醇，最后成分用甲醇溶解，转移至25mL无色容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀后作为样品溶液。

2.2.3标准品溶液的制备准确称量菝葜皂苷元标准品7.8mg，用甲醇溶解，转移至25mL棕色容量瓶中，稀释至刻度，摇匀后作为标准品溶液。

2.2.4标准曲线的绘制分别用移液管精密移取标准品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于具塞试管中，水浴80℃挥干溶剂，再精密移取5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2mL和高氯酸0.8mL，加入具塞试管中，密塞，摇匀，置于60℃恒温水浴锅中反应15min后，快速放入冰水中降温5min，从而停止反应，再吸取5mL乙酸混合，摇匀后，等待10min，在UV2501紫外分光光度计上调整吸收波长为455nm，依次测量A值。根据标准溶液的取样量及最终测量时的体积，计算出六份标准测量液的浓度（C值，单位：μg/mL），再由A值与C值两组数据进行回归方程计算，得到回归方程是A=0.01169C+0.03056，r=0.9994。

2.2.5样品溶液的测定分别用移液管准确吸取0.4mL样品液，按2.2.4中的步骤进行吸光度测定，由回归方程计算出总皂苷的浓度Cx，得率计算公式如下：

总皂苷得率（%）=CX×V×Km （Cx为总皂苷的浓度，V为样品溶液初始体积，K为样品溶液的稀释倍数，m为天冬取样量）。直观分析结果见表2，显著性分析结果见表3。

2.2.6试验结果分析由表2可知，最好的切制工艺应是A1B1C1。分析表3可知，三个因素对炮制工艺的影响顺序为切片厚度﹥干燥方法﹥润软方法，即切片厚度影响最大，具有统计学意义（P<0.05），而干燥方法和润软方法没有差异性。考虑切制工艺操作的时间以及切片难易程度等其它指标，切制工艺修改为A3B1C1。

2.2.7工艺验证为验证该工艺的稳定性，按优选出的最佳工艺进行3批验证性试验，结果3批天冬饮片中总皂苷得率分别为2.22%、2.16%、2.17%，平均得率为2.18%，RSD值为1.53%，表明优选出的炮制工艺稳定、可行。

3讨论

试验之初进行了水提取工艺的优选，选择提取温度（70℃、80℃、90℃）、提取时间（1h、1.5h、2h）、液料比（8倍、10倍、12倍）、提取次数（1次、2次、3次）四因素为考察因素，经过正交试验确定最佳水提取工艺为70℃温度，12倍量水，提取2次，每次1h，从而确定了炮制工艺中提取的操作。

炮制工艺研究经方差分析可以得出，只有切片厚度有统计学意义（P<0.05），故切片厚度确定为1mm。软化方法中，考虑烘软法有时会出现软化度不够，切片困难，洗后润软法天冬外层松泡，切片易碎，且时间较长，故软化方法确定为蒸软法。干燥方法中，考虑操作时间及干燥后成色等情况，确定为烘干法。故试验的最佳切制工艺为天冬药材经水蒸气蒸3min后，横切1mm薄片，60℃烘12h。

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（编辑：陶希睿）