新疆红枣黑斑病病原菌鉴定及拮抗细菌筛选

包慧芳，王 宁，侯 敏

（新疆农业科学院微生物应用研究所，乌鲁木齐 830091）

新疆红枣黑斑病病原菌鉴定及拮抗细菌筛选

包慧芳，王 宁，侯 敏

（新疆农业科学院微生物应用研究所，乌鲁木齐 830091）

【目的】对新疆红枣黑斑病病原菌进行分离、鉴定，确定新疆红枣黑斑病病原菌种类种属，并进行拮抗细菌筛选，为新疆红枣黑斑病的防治奠定基础。【方法】从新疆阿克苏和喀什分别采集染有黑斑病的灰枣和骏枣样品，采用可培养方法，进行病原菌分离鉴定，测定其生长最适培养基、温度、pH值；并从未发病枣园及发病枣园但未染病红枣树下采集土壤样品，采用平皿对峙法进行拮抗菌筛选。【结果】从灰枣和骏枣上分别分离获得1株病原菌，根据菌株形态及分子测序结果表明，2株菌均为链格孢属菌种（Alternaria alternata），并筛选获得2株优良的拮抗菌 JK1（多粘类芽孢杆菌 Paenibacillus polymyxa）和 JK5（枯草芽胞杆菌Bacillus sutilis）。【结论】新疆红枣黑斑病病原菌为链格孢属链格孢（Alternaria alternata），其生长最适培养基为 PDA，最适生长温度为30℃，最适生长pH值为6～7，菌株 JK1和JK5对病原菌生长具备明显的抑制作用。

红枣黑斑病；病原菌；鉴定；拮抗菌

0 引 言

【研究意义】红枣是新疆近年来发展最快、效益最突出、惠民成效最显著的一项特色林果产业。截至目前，新疆红枣种植面积已居全国第 2位。随着红枣种植规模迅速扩大，矮化密植栽培模式广泛采用，但综合管理水平相对滞后，导致红枣病害时有发生，黑斑病是近年发生的最严重的病害之一，2011年部分果园红枣黑斑病发病率达到70%，近两年发病率在30%左右。目前有关红枣黑斑病病原菌种类报道不一，对新疆红枣黑斑病病原菌进行分离，鉴定，确定其种属及生物学特性，并对其拮抗菌进行筛选，对新疆红枣黑斑病的生物防治将具有重要意义。【前人研究进展】有关红枣黑斑病病原菌种类的报道存在很大的差异：吴玉柱［1］、王军等［2］报道冬枣黑斑病病原物是细极链格孢（Alternaria tenuissima）；李夏鸣等［3］报道引起枣果实黑斑病的致病菌是 Alternaria tenuissima（Fr）Wiltsh和 Alternaria sp.，袁高庆等［4］报道冬枣果实病黑斑病主要是由链格孢属链格孢（Alternaria alternata）侵染引起；而林忠敏等［5］报道山西省红枣黑斑病病原菌为交链孢属（Alternaria tenuis）和茎点属（Phoma sp.）；李晓军［6］、王树礼等［7］认为冬枣黑斑病由黄单胞杆菌属（Xanthomonas）和假单胞杆菌属细菌（Pseudomonas）感染引起；宗淑萍等［8］认为桑壳小圆孢菌（Coniothyrium fucsidulum）、仁果茎点霉（Phoma pomirum）是主要的病原菌，而链格孢（Alternaria alternata）只是参与了侵染；靳增军等［9］报道河北冬枣黑斑病病 原物 为 毁 灭 茎点 霉 （Phoma destructiva Plowr．）和链格孢（Alternaria alternata）两种；赵文华等［10］报道云南省红河州梨枣、鸡蛋枣等枣黑斑由交链孢属（Alternaria sp.）、茎点霉属（Phoma sp.）和毛盘孢属（Colletortrichum sp.）真菌混合侵染。另外，目前关于红枣黑斑病拮抗菌的筛选鲜有报导。【本研究切入点】目前关于红枣黑斑病病原菌种类报道存在较大差异，此差异是否与种植地气候、种植品种有关。【拟解决的关键问题】研究从新疆喀什、阿克苏采集样品，进行黑斑病病原菌分离，鉴定，确定新疆红枣黑斑病病原菌种类，对其进行生物学特性研究和拮抗菌筛选，为新疆红枣黑斑病的生物防治奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 样 品

2013年 10月，分别从喀什伽师县、疏勒县、阿克苏第一师、第二师等地多个枣园采集黑斑病病枣样品10份，每份样品数量大于20个，采集品种为主栽品种骏枣和灰枣。

1.1.2 试 剂

葡萄糖、酵母浸粉、蛋白胨、琼脂、蔗糖等均为国产分析纯试剂，引物、dNTPs、Taq酶等试剂均购自上海生工生物技术服务有限公司。

1.1.3 培养基

（1）NA培养基：蛋白胨 10 g，牛肉膏 3 g，NaCl 5 g，琼脂粉 15 g，蒸馏水定容至 1 000mL，pH 7.2，121℃灭菌20 min，用于细菌分离培养。

（2）PDA培养基：土豆200 g，葡萄糖20 g，琼脂粉15 g，蒸馏水定容至1 000mL，121℃灭菌20 min，用于真菌分离培养。

（3）PCA培养基：土豆 20 g，胡萝卜 20 g，琼脂粉15 g，蒸馏水定容至1 000mL，121℃灭菌20 min，用于真菌培养。

1.2 方 法

1.2.1 病原菌分离

将所采集的10份红枣样品每份挑选10个，共计100个，进行表面消毒，具体方法如下：选好样品，无菌操作台中用 75%乙醇漂洗20～30 s，无菌水漂洗4次；5%次氯酸钠溶液漂洗5 min，无菌水漂洗4次；75%乙醇漂洗20～30 s，无菌水漂洗 4次，无菌滤纸吸干。

消毒完毕，将枣果剥开，用无菌镊子夹取病健交接处果肉组织，分别接种至 NA、PDA培养基平板上，一个平板接种来自一颗枣果的果肉组织约3～4块。接种后的平板放入30℃恒温培养箱中，培养2～7 d至病原菌明显生长。

对于细菌，从平板上挑取形态颜色不同的单菌落，继续在新的平板上划线纯化 2～3次，获得菌种纯培养物，并给菌株编号。对于真菌，从显微镜下挑取单孢子，进行培养，并编号。

1.2.2 细胞的形态观察

对于细菌，将菌种划线接种至NA平板，待菌落长出后，挑取菌落，固定至载玻片，染色，OLYMPUS CX21FS1显微镜下观察其细胞形态并拍照；对于真菌，将菌种划线接种至 PDA平板，同时将无菌盖玻片斜插于PDA培养基中，置30℃恒温培养箱中培养2～3 d，将盖玻片取出置于载玻片上，OLYMPUS CX21FS1显微镜下观察其细胞形态并拍照。

1.2.3 病原菌序列测定

将培养好的菌种，采用Zymo Research公司的Fungal／Bacterial DNA Miniprep TMD6005试剂盒进行基因组DNA提取，细菌以16S rRNA通用引物（27F：5＇－AGAGTTTGATCCTGGCTCAG－3＇，1492R：5＇－GGTTACCTTGTTACGACTT－3＇）为引物，真菌以18s rRNA通用引物（ITS1：5＇－TCCGTAGGTGAACCTGCGG－3＇，ITS4：5′－TCCTCCGCTTAT－TGATATGC－3′）及β－微管蛋白（β－tubulin）基因引物（Beta－F：CAGCTCGAGCGTATGAACG－TCT，Beta－R：CGGAAGTCGGAAGCAGCCATC）进行PCR扩增，PCR反应体系为：10×PCR buffer 5 μL，2.5 mmol／L dNTP Mixture 4 μL，Taq DNA聚合酶 0.25 μL（TaKaRa，5 U／μL），引物（20 μmol／L）各1 μL，基因组DNA 1 μL，使用去离子水将反应总体积补充至50 μL。细菌PCR反应条件为：95°C，5 min；95°C，45s，57° C，30s，72°C，1.5 min，30 cycles；72°C，7 min。真菌PCR反应条件为：95°C，5 min；95°C，30s，55° C，30s，72°C，1 min，30 cycles；72°C，7 min。产物使用1%琼脂糖凝胶电泳分离，并使用DNA凝胶回收试剂盒纯化。将纯化产物送至北京鼎国生物技术有限公司进行序列测定，所得序列提交 Gen-Bank数据库（http：／／www.ncbi.nlm.nih.gov），申请基因登陆号，同时进行Blast比对。

1.2.4 病原菌致病力测定（回接试验）

采集白熟期健康枣果（采果前半个月停止使用杀菌剂），用70%酒精对枣果表面进行消毒，无菌水冲洗3次。对于病原细菌，采用LB液体培养基培养12～24 h，制成菌悬液，使用时采用无菌水将浓度调整为约1×107个细胞／mL。对于病原真菌，接种至 PDA培养基上培养5～7 d后，取菌落搅碎，加无菌水制成孢子悬浮液，浓度为每视野20～40个孢子（400X）。如分离获得多个病原菌，试验设置病原菌单独接种和混合接种，每个处理又分为有伤和无伤2种方式，以无菌水作对照，每处理60个果实。有伤处理即用灭菌的医用针头刺伤果皮造成伤口接种。回接后每天观察发病情况，统计发病率。待接种枣果充分发病后，每处理选择50%的样品进行病原菌的再分离，并对再分离获得的病原菌进行形态及分子鉴定。

1.2.5 测定项目

1.2.5.1 生长温度

配制 PDA培养基，每皿中接入直径 8 mm的菌饼一个，每处理3个重复，分别置于10、20、30、40和50℃培养，5 d后测其直径，获得每处理平均直径。

1.2.5.2pH值

用1 mol／L HCl和1 mol／L NaOH配制pH值分别为4、5、6、7、8、9的 PDA培养基，每处理 3个重复，每皿中接入直径8 mm的菌饼一个，置于25℃培养120 h后测其直径，获得每处理平均直径。

1.2.5.3 培养基

配制 PDA和 PCA两种培养基，每处理3个重复，每皿中接入直径8 mm的菌饼一个，置于25℃培养5 d后测其直径，获得每处理平均直径。同时在PDA和 PCA上分别划线培养，观察生长状态。

备注：测量菌落直径时，通过菌落中心划直线，用直尺测量并记录。

1.2.6 拮抗细菌筛选及鉴定

从未发病枣园及黑斑病高发枣园采集未染病红枣树下土壤样品，称取 10 g土壤，溶解于 100mL无菌水，制成悬液。同时将病原菌接入查氏培养基，30℃培养48 h。将土壤悬液及菌悬液按梯度稀释（100、1 000、10 000倍），各取100 μL共同涂布于1／2NA＋1／2PDA平板上置30℃培养5～7 d。对周围出现了病原菌抑制圈的细菌，进行纯化培养，再次进行平皿对峙实验，对其中有明显拮抗效果的菌株采用1.2.3的方法进行DNA提取，并送至鼎国进行分子鉴定。对所测得序列提交GenBank数据库 （http：／／www.ncbi.nlm.nih. gov），申请基因登陆号，同时进行 Blast比对及系统进化树制作。

2 结果与分析

2.1 病原菌分离

参照1.2.1的方法将100个黑斑病红枣样品进行表面消毒及病原菌分离。研究表明，所有样品均没有细菌性病原菌生长，只获得真菌性病原菌，分离频率为 99%。所得病原菌菌落中心深褐色，由内向外逐渐变浅，略显绿色，最边缘显白色。挑取病原菌单孢子进行培养，获得纯培养病原菌。图1

图1 带病组织块病原菌分离结果Fig．1 Isolation of pathogen of jujube black spot disease

2.2 病原菌形态观察

挑取菌株单孢子接种于 PDA培养基并进行传代培养，研究表明，菌株在 PDA培养基上菌丝为白色，呈放射状扩展，气生菌丝很发达，菌丝体茂密，3 d后菌丝颜色逐渐变深，最后变为灰褐色至黑色。分生孢子梗暗色，单枝或多枝，长短不一，顶生分生孢子。分生孢子暗色，有1～9个横隔膜，2～4个纵隔膜，倒棍棒形、椭圆形或卵形，基本符合链格孢属链格孢（Alternaria alternata）孢子形态。图2

图2 病原菌菌落及菌体形态Fig．2 Colony and cell morphology of the pathogen

2.3 病原菌分子测序

对病原菌进行基因组DNA提取，以所得基因组为模板，以18S rRNA和β－微管蛋白（β－tubulin）基因引物为引物进行PCR扩增，对扩增产物进行序列测定。将所获得序列提交至 GenBank数据库（http：／／www.ncbi.nlm.nih.gov），进行Blast比对，结果表明，所分离菌株为同一株菌，其18S rRNA序列与链格孢属菌种（Alternaria sp.）18S rRNA序列同源性为99%，申请基因登陆号为KT287103。结合β－微管蛋白（β－tubulin）基因比对结果，将该菌种命名为链格孢属链格孢（Alternaria alternata），作出病原菌系统进化树。图3

2.4 病原菌致病力测定（回接试验结果）

按照1.2.4方法进行，此次病原菌致病力测定结果表明，采用有伤处理回接病原菌的发病率为93%，无伤处理回接病原菌发病率为48%，有伤对照发病率为3%，无伤对照发病率为0%。对发病红枣进行病原菌再分离，分离频率为99%，对再分离病原菌进行形态观察及分子鉴定，所得病原菌与所接病原菌一致。部分红枣回接病原菌后发病症状。图4，表1

图3 病原菌系统进化树Fig．3 Phylogenetic tree of the pathogen

表1 病原菌回接发病率Table 1 Incidence rate of re－inoculation

图4 部分红枣回接病原菌后发病症状Fig．4 Symptoms of part jujub after inoculation

2.5 生长特性检测

采用1.2.5的方法进行了生长温度、pH值、培养基对病原菌生长的影响。不同培养基生长结果表明，病原菌在 PDA上生长平均直径为 5.88cm，在 PCA上生长平均直径为 5.83cm；划线培养结果表明，病原菌在 PDA上生长致密，在 PCA上生长稀疏。不同生长温度、pH值菌落生长直径测定结果表明，该病原菌最适生长温度为30℃，最适生长pH为 6～7，最适生长培养基为 PDA。表2

表2 不同温度和pH值下菌落生长变化Table 2 Effects of different temperature and pH on colony growth

2.6 拮抗菌筛选

通过初筛获得14株有抑制圈的菌株，命名为JK1－JK14，对此14株菌纯化后进行平皿对峙实验，研究表明，其中JK1和JK5对红枣黑斑病病原菌有明显的拮抗作用。对JK1和JK5进行分子鉴定，所得序列提交 GenBank数据库（http：／／www. ncbi.nlm.nih.gov），申请基因登陆号分别为KU563771和KU563772，同时进行 Blast比对及系统进化树制作。JK1为多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa），JK5为枯草芽胞杆菌（Bacillus sutilis）。图5

图5 JK1、JK5系统进化树Fig．5 Phylogenetic tree of JK1 and JK5

3 讨 论

对于链格孢属菌种，分生孢子的大小、形状、颜色、孢子表面的纹饰、分隔情况、产孢表型、喙的有无和形态等是其种的主要分类标准，菌丝特征、菌落特点、分生孢子梗的形态、寄主范围等是种级分类的辅助依据。但分生孢子的形态和大小在人工培养的条件下，变化幅度较大，并且不同种的分生孢子形态和大小在营养丰富的人工培养基上具有趋同现象，给准确鉴定到种带来了很大的困难。丝孢真菌的β－微管蛋白基因具相当高的保守性［11］，因此研究结合了孢子形态、18S rRNA、β－微管蛋白基因来对所获得病原菌进行鉴定，提高了病原菌种属定名的准确性。

研究分离得到的红枣黑斑病病原菌为 Alternaria alternata，与向征［12］、刘晓琳［13］、董宁［14］、刘振亚等［11］报道的一致，而与吴玉柱［1］、林忠敏［5］、宗淑萍［8］、赵文 华等［10］报道 的不一 致。研 究表明，此差异可能与红枣品种、种植地域及气候差异相关，因此后期有必要进行更系统深入的研究，探索红枣品种、种植地域、气候与红枣病害之间的关系。

目前有关红枣黑斑病拮抗菌有少量报道，主要为枯草芽胞杆菌（Bacillus sutilis）［15］，研究除筛选获得1株枯草芽胞杆菌 JK5，还获得 1株多粘类芽孢杆菌 JK1（Paenibacillus polymyxa）。研究表明，多粘类芽孢杆菌产生的多肽类抗菌物质对植物病原真菌具有很好的拮抗活性，且性质比较稳定，是极具开发前景的生防细菌［16］，因此后续研究中，可以对多粘类芽孢杆菌及枯草芽胞杆菌发酵工艺、拮抗效果进行研究，为红枣黑斑病生物防治奠定基础。

4 结 论

从灰枣和骏枣上分离筛选，获得同一种病原菌，根据菌株孢子形态及分子测序结果，该病原菌为链格孢属链格孢（Alternaria alternata）。其最适生长温度为30℃，最适生长pH值为6～7，最适培养基为 PDA。

研究筛选获得两株效果较好的拮抗菌JK1和JK5分别为多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）和枯草芽胞杆菌（Bacillus sutilis）。

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［1］吴玉柱，季延平，刘会香，等.冬枣黑斑病病原菌的鉴定［J］.中国森林病虫，2005，24（2）：1－3. WU Yu－zhu，JI Yan－ping，LIU Hui－xiang，et al.（2005）. Identification of pathogenic fungus of back patch in＂Dongzao＂jujube［J］.Forest Pest and Disease，24（2）：1－3.（in Chinese）

［2］王军，辛玉成.冬枣黑斑病病原的分离与鉴定［J］.青岛农业大学（自然科学版），2007，24（1）：21－23. WANG Jun，XIN Yu－cheng.（2007）.Isolation and Identification of the Pathogen Causing Black Spot Disease in Dongzao Fruits［J］.Journal of Laiyang Agricultural University（Natural Science），24（1）：21－23.（in Chinese）

［3］李夏鸣，郭黄萍，胡增丽.枣黑斑病研究［J］.山西农业科学，2009，37（11）：37－40. LI Xia－min，GUI Huang－ping，HU Zeng－li.（2009）.Research on jujube Black Spot［J］.Journal of Shanxi Agricultural Sciences，37（11）：37－40.（in Chinese）

［4］袁高庆，赖传雅，黄丽华.毛叶枣黑斑病的病原鉴定及其生物学特性研究［J］.中国农学通报，2003，19（1）：44－47. YUAN Gao－qing，LAI Chuan－ya，HUANG Li－hua.（2003）.Studies on the identification and biological properties of the pathogen of Indian jujube black spot［J］.Chinese Agricultural Science Bulletin，19（1）：44－47.（in Chinese）

［5］林忠敏，赵晓军，赵子俊，等.红枣果实黑斑病的病原分离和鉴定［J］.山西农业科学，2001，29（1）：74－77. LIN Zhong－min，ZHAO Xiao－jun，ZHAO Zi－jun，et al.（2001）.Isolation and Identification of Pathogens on Jujube Alternaria and Phoma Blight［J］.Journal of Shanxi Agricultural Sciences，29（1）：74－77.（in Chinese）

［6］李晓军，张勇，曲健禄，等.杀菌剂对冬枣黑斑病原细菌的室内抑菌效果［J］.落叶果树，2004，（2）：50－52. LI Xiao－jun，ZHANG Yong，QU Jian－lu，et al.（2004）. The inhibitory effect of bactericides on jujube black spot pathogen［J］.Deciduous Fruits，（2）：50－52.（in Chinese）

［7］王树礼，王乐陶，隋婧，等.辽宁朝阳地区冬枣黑斑病发生与防治初报［J］.中国园艺文摘，2014，（10）：199－200. WANG Shu－li，WANG Le－tao，SUI Jing，et al.（2014）.Preliminary report of occurrence and control of Dongzao jujube black spot in Chaoyang of Liaoning Province［J］.Chinese Horticulture Abstracts，（10）：199－200.（in Chinese）

［8］宗淑萍，杨文香，刘大群，等.冬枣黑点病病原鉴定［J］.华北农学报，2006，21（5）：105－107. ZONG Shu－ping，YANG Wen－xiang，LIU Da－qun，et al.（2006）.Identification of the pathogen of Dongzao jujube blackspot disease［J］.Acta Agriculturae Boreali－sinica，21（5）：105－107（in Chinese）

［9］靳增军，刘春琴，甄文超，等.冬枣黑疔病病原菌鉴定［J］.华北农学报，2006，21（增刊）：162－165. JIN Zeng－jun，LIU Chun－qin，ZHEN Wen－chao，et al.（2006）.Identification of pathogens causing black spot on Dongzao jujube［J］.Acta Agriculturae Boreali－sinica，21（supp）：162－165.（in Chinese）

［10］赵文华，李一泉.枣树黑斑病在云南省红河州发生的主要症状、病原分析、发生规律及综合防治策略［J］.石河子大学学报（自然科学版），2004，（22）：152－155. ZHAO Wen－hua，LI Yi－quan.（2004）.Main synptoms，pathogens disease cycle and integrated control of jujube black spot disease in Honghe，Yunnan Province［J］.Journal of Shihezi U-niversity（Natural Science），（22）：152－155.（in Chinese）

［11］刘振亚.南疆枣园 Alternaria属三种病原间的遗传关系研究［D］.塔里木大学硕士学位论文，2015. LIU Zhen－ya.（2015）.Study on the molecular phylogenetic relationships of Alternaria isolated from Jujube in south of Xinjiang［D］.Master Dissertation.Tarim University，Alar.（in Chinese）

［12］向征.新疆南疆两种枣树病害的研究［D］.石河子：石河子大学硕士学位论文，2013. XIANG Zheng.（2015）.The research of jujube blackspot disease and jujube root rot disease in the south Xinjiang Basin［D］.Master Dissertation.Shehezi University，Shehezi.（in Chinese）

［13］刘晓琳，刘玉，马荣，等.新疆枣果黑斑病病原菌鉴定及生物学特性［J］.西北林学院学报，2015，30（3）：132－138. LIU Xiao－lin，LIU YU，MA Rong，et al.（2015）.Identification and Biological characteristics of the pathogen causing jujube black spot in Xinjiang［J］.Journal of Northwest Forestry University，30（3）：132－138.（in Chinese）

［14］董宁.枣黑斑病症状表现、病菌分析及室内药剂筛选［D］.阿拉尔：塔里木大学硕士学位论文，2015. DONG Ning.（2015）.Pathogen analysis，symptom expression and fungicide screening against pathogen of jujube black spot disease［D］.Master Dissertation.Tarim University，Alar.（in Chinese）

［15］马荣，刘晓琳，孙园园，等.新疆枣果黑斑病拮抗细菌的筛选及鉴定［J］.新疆农业大学学报，2014，37（6）：460－464. MA Rong，LIU Xiao－lin，SUN Yuan－yuan，et al.（2014）. Screening and identification of the antagonistic bacteria of jujubeblack spot disease in Xinjiang［J］.Journal of Xinjiang Agricultural University，37（6）：460－464.（in Chinese）

［16］杨少波，刘训理.多粘类芽孢杆菌及其产生的生物活性物质研究进展［J］.微生物学通报，2008，35（10）：1 621－ 1 625. YANG Shao－bo，LIU Xun－li.（2008）.Research advances in Paenibacillus polymyxa and their bioactive substances［J］.Microbiology，35（10）：1，621－1，625.（in Chinese）

Identification of the Pathogen and Screening of the Antogonistic Bacteria of Jujube Black Spot Disease in Xinjiang

BAO Hui－fang，WANG Ning，HOU Min
（Research Institute of Applied Microbiology，Xinjiang Academy of Agricultural Sciences，Urumqi 830091，China）

【Objective】In order to lay the foundation for the prevention and control of jujube black spot disease in Xinjiang，the pathogen and its antagonisitic bacteria will be screened and identificated.【Method】Jujube samples with black spot disease were collected from Aksu and Kashi.The pathogen were cultured and identified.Biological characteristic were examined such as the optimum medium，temperature and pH.The antogonistic bacteria of jujube black spot disease were also screened from the soil samples collected from the jujube garden by the plate confrontation method.【Result】Two strains were obtained from different Jujube varieties and identified as Alternaria alternata according to the 16S rRNA sequence analysis and biochemical characteristics.Two antogonistic bacteria JK1（Paenibacillus polymyxa）and JK5（Bacillus sutilis）were obtained.【Conclusion】The pathogen of jujube black spot disease in Xinjiang is Alternaria alternata，the best medium is PDA，the optimum temperature is 30℃ and the optimum pH is 6－7.JK1（Paenibacillus polymyxa）and JK5（Bacillus sutilis）has obvious inhibitory action for Alternaria alternata.

jujube black spot disease；pathogenic bacteria；identification；antagonist

S436.65

A

1001－4330（2016）09－1667－07

10.6048／j.issn.1001－4330.2016.09.014

2016－03－11

新疆维吾尔自治区自然基金项目（2015211A031）；新疆农业科学院青年基金项目（xjnkq－2013001）；国家微生物资源平台专项（NIMR－2013－1－1）

包慧芳（1978－），女，湖南华容人，副研究员，研究方向为农业微生物及其应用，（E－mail）bhfcfs＠126.com

（Cotresponding author）：王宁（1979－），女，山东人，副研究员，研究方向为微生物资源利用，（E－mail）150700126＠qq.com

Fund project：Natural Science Foundation of Xinjiang（2015211A031）；Xinjiang Academy of Agricultural Sciences Fund for Young Scientists Fund（xjnkq－2013001）；National Platform Project of Microbial Resources（NIMR－2013－1－1）