Vasohibin-1在胃癌组织中的表达及其临床意义

张 娜



·临床研究·

Vasohibin-1在胃癌组织中的表达及其临床意义

张 娜

胃癌在恶性肿瘤中发病率居前列[1]。中国是胃癌高发的国家，近年来有年轻化倾向[2]。胃癌的发生发展通常经历多阶段、多步骤，是由正常组织到癌前病变再到癌变的逐步演变的过程。胃癌的发生与多种因素有关[3]，治疗以手术为主，辅以化学治疗、放射治疗，早发现、早治疗对胃癌的预后具有重要价值[4]。近年来肿瘤标志物在恶性肿瘤发病中的作用越来越受到重视。血管内皮生长因子-A(VEGF-A)是血管生成刺激因子，可促进内皮细胞分裂增殖[5]。Vasohibin-1是近年来发现的一种血管生成抑制因子，其表达受VEGF的影响。有研究发现，Vasohibin-1、VEGF-A在恶性肿瘤细胞的侵袭、远处转移和淋巴结转移中发挥了重要的作用，在这些恶性肿瘤中，Vasohibin-1、VEGF-A可出现异常表达[6]。有关Vasohibin-1、VEGF-A表达与胃癌发病关系的研究较少。本研究采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-A的表达，旨在探讨Vasohibin-1、VEGF-A的表达与胃癌发病及临床病理学特征的关系。

1 对象与方法

1.1 病例来源

选取自2014年11月至2015年10月期间被河北省石家庄市中医院脾胃科收治的55例胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织。胃癌组织和癌旁组织均为手术切除，经该院病理科确诊[7]。55例患者的年龄为41～80岁，平均年龄(64.40±7.79)岁；男32例，女23例；病程3～5年，平均病程为(2.29±0.61)年；均无吸烟史、饮酒史，其中2例有胃癌家族史。入组患者均签署知情同意书，本研究经医院伦理委员会审批通过。

1.2 标本的采集和处理

胃癌组织和癌旁组织标本切除离体后立即投入液氮中，冷冻后储存于-80 ℃冰箱保存备用。

1.3 实验方法

采用美国ABI公司生产的7500型实时定量PCR仪行RT-PCR，检测胃癌组织和癌旁组织中Vasohibin-1、VEGF-A mRNA的表达水平，以GAPDH为内参。Vasohibin-1上游引物为：5′-CCACGCCCTGATTTCTTAAA-3′，下游引物为：5′-CCCTGTCAGAGGTCTGCTCT-3′。VEGF-A上游引物为：5′-TTGCTGCTCTACCTCCAC-3′，下游引物为：5′-TTGCTGCTCTACCTCCAC-3′。PCR反应步骤：94 ℃预变性3 min；94 ℃变性20 s，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸40 s；35个循环，72 ℃延伸10 min。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 胃癌组织、癌旁组织中Vasohibin-1、VEGF-A mRNA水平比较

经RT-PCR检测，胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-A mRNA水平高于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

表1 胃癌组织、癌旁组织中Vasohibin-1、VEGF-A mRNA水平比较()

2.2 胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-A mRNA的水平与临床病理学特征的关系

经RT-PCR检测，胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-A mRNA水平与患者年龄、肿瘤部位无明显关系(P>0.05)，且胃癌组织中Vasohibin-1 mRNA的表达水平与分化程度无关(P>0.05)。随着TNM分期的增加，胃癌组织中Vasohibin-1 mRNA水平呈升高趋势(P<0.05)，随着TNM分期的增加和分化程度的降低，胃癌组织中VEGF-A mRNA水平呈升高趋势(P<0.05)。此外，胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-A mRNA水平与肿瘤的远处转移、淋巴结转移有关。有远处转移和淋巴结转移的患者的胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-A mRNA水平高于无远处转移和淋巴结转移的患者(P<0.05)。见表2。

表2 胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-A mRNA的水平与临床病理学特征的关系()

2.3 相关性分析

将胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-AmRNA水平进行相关性分析，结果显示胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-AmRNA水平呈正相关(r=0.397，P=0.014)。

3 讨论

Vasohibin-1属于Vasohibin家族的一员，主要由血管内皮细胞产生[8-9]。Watanabe等[5]于2004年发现，Vasohibin-1可以抑制内皮细胞迁移、增殖、血管生成，还可以抑制组织血管生成。VEGF-A是一种血管生成因子，在肿瘤的血管生成中起核心作用。肿瘤组织中Vasohibin-1蛋白的表达与肿瘤血管密切相关。Vasohibin-1的表达水平与恶性肿瘤患者总生存率及无病生存率呈正相关[10]。有研究发现，糖尿病视网膜病变患者中，Vasohibin-1和VEGF-A均呈高表达，且Vasohibin-1表达水平与VEGF-A的表达水平呈正相关[11]。

本研究结果显示，胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-AmRNA均出现高表达，明显高于癌旁组织，这表明Vasohibin-1、VEGF-A的表达水平与胃癌的发病有关。Takahashi等[12]的研究也发现，Vasohibin-1、VEGF-A在消化系统恶性肿瘤中高表达，本研究结果与其一致。

此外，本研究检测并比较了不同临床病理学特征的胃癌患者胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-AmRNA的表达水平，发现两者的水平与患者年龄、肿瘤部位无明显关系(P>0.05)，且胃癌组织中Vasohibin-1mRNA的表达与分化程度无关(P>0.05)。随着TNM分期的增加，胃癌组织中Vasohibin-1mRNA水平呈升高趋势(P<0.05)，随着TNM分期的增加和分化程度的降低，胃癌组织中VEGF-AmRNA水平呈升高趋势(P<0.05)。这表明VEGF-A与胃癌组织分化程度有关，其很可能在胃癌细胞侵袭、远处转移、淋巴结转移过程中都持续表达[12]。而Vasohibin-1与胃癌分化程度无关，即Vasohibin-1可能在胃癌早期不表达[13]，仅在胃癌细胞侵袭其他组织及出现转移后，组织处于缺氧状态时方开始表达，进而在一定程度上抑制VEGF-A在胃癌组织中的表达[14]。

胃癌患者出现淋巴结转移和远处转移预示着预后较差，而本研究发现，胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-AmRNA的水平与远处转移、淋巴结转移有关，有远处转移和淋巴结转移的患者的胃癌组织中Vasohibin-1、VEGF-AmRNA的水平高于无远处转移和淋巴结转移的胃癌患者(P<0.05)。这表明Vasohibin-1、VEGF-AmRNA的水平与胃癌患者的预后亦密切相关。而相关性分析显示，胃癌组织中Vasohibin-1mRNA与VEGF-AmRNA水平呈正相关。史刚刚等[15]的实验发现，结直肠癌组织中Vasohibin-1与VEGF-A表达水平呈正相关，推测可能的原因为Vasohibin-1表达升高可通过VEGF-A与血管内皮细胞胞膜的VEGFR-2/Flk-1受体结合将信号转导给蛋白激酶Cδ，进而对VEGF-A产生诱导作用，导致VEGF-A表达升高[15]。

本研究样本量较小，因此对结果可能会有一定的影响。综上所述，Vasohibin-1的高表达可能参与了胃癌等胃肠道恶性肿瘤的发生发展，且与临床病理学特征有关。Vasohibin-1有可能成为胃癌治疗的新靶点。

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(本文编辑：林磊)

050051 河北省石家庄市中医院脾胃科

10.3969/j.issn.1673-534X.2016.05.014

2016-05-18)