血液温度和贮存时间对去白细胞血液质量效果分析*

鲁国勇，朱荣华，李维锦,陈兆庆，谢函凌，段志燕

(云南省保山市中心血站 678000)



·临床研究·

血液温度和贮存时间对去白细胞血液质量效果分析*

鲁国勇，朱荣华△，李维锦,陈兆庆，谢函凌，段志燕

(云南省保山市中心血站 678000)

目的 了解血液的温度、采血后贮存时间对去白细胞血液制备的影响，寻找白细胞滤除的最佳温度和贮存时间，为临床提供更加优质的血液制品，让更多患者受益。方法 按照血液温度、采血后贮存时间，对滤后白细胞残存量、红细胞回收率效果进行统计分析。结果 (1)血液温度的影响，通过397份标本的观察，血液温度在10 ℃及以下172份，合格率86.62%(149/172)；10 ℃以上225份，合格率61.77%(139/225)。2组白细胞滤过合格率经χ2检验，差异有统计学意义(χ2=30.22，P<0.05)。(2)采血后贮存时间的影响，通过545份标本的观察，采血后贮存时间4 h内滤除208份，合格率59.13%(123/208)；4～12 h内滤出189份，合格率 87.30%(165/189)；12～48 h内滤除 148份，合格率 86.48%(128/148)；3组白细胞滤过率经过χ2检验，差异有统计学意义(χ2=18.16，P<0.05)。结论 结合当地实际，云南保山无偿献血血液白细胞去除工作最佳滤出温度，血液温度控制在2～10 ℃。兼顾到冷沉淀的制备时效(8 h内)，血液贮存4～8 h内进行白细胞滤出工作为最佳过滤时间。

白细胞； 时间； 温度； 分析

临床上由输血引发的各种疾病越来越引起人们的重视，输注过滤去除白细胞血液避免因输入献血者的白细胞而引起的非溶血性发热性输血反应(FNHTR)和同种免疫反应，防止输血相关性移植物抗宿主病(TA-GVHD)的发生预防巨细胞病毒(CMV)感染，减少输血引发的病毒性传染疾病和血小板输注无效等，是提高输血疗效和安全的有效手段，在临床治疗中，对输血安全、临床治疗效果、成分血的保存起着十分重要的作用。去除白细胞血液质量又有明确规定GB18469-2012[1]，保山市对去除白细胞工作无数据可查，为保证质量，保山市中心血站开展滤除白细胞最佳温度和最佳贮存时间观察，以弥补保山少白细胞血液工作数据的空缺。现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 全血；一次性使用去白细胞多联采血袋；大容量Nageotte血细胞计数板；普通显微镜；迈瑞BC-5300全自动血液细胞分析仪，温差电偶温度仪。

1.2 方法 随机抽取采血时间在48 h内(采血时在血袋外用记号笔标明采血时间T0)用去白细胞多联袋采集的全血，在滤除白细胞前测量全血温度(三明治夹心法)，记录测量温度，在过滤开始时记录时间(T1)，结束时记录时间(T2)，过滤时间T=T2-T1，血液的贮存时间T=T1-T0。根据血液不同的测量温度值、血液的贮存时间，白细胞、红细胞计数，统计分析温度对白细胞滤除效果(白细胞残留量)以及对红细胞的影响(红细胞回收率)。

1.3 红细胞、白细胞计数及过滤后白细胞验证 过滤前、后用全自动血细胞计数仪计数白细胞、红细胞。验证白细胞：50 μL大容量Nageotte血细胞计数盘计数。

1.4 判定合格标准 白细胞残留量小于2.5×106/U；红细胞回收率为≥85%。

2 结 果

2.1 温度对滤除白细胞的影响 通过397份标本的观察，血液温度在2～10 ℃ 172份，通过滤除白细胞后，合格率86.7%(149/172)，红细胞回收率为92.9%；10～15 ℃150份，合格率74.0%(111/150)，红细胞回收率为89.9%；15 ℃以上75份，合格率37.3%(28/75)，红细胞回收率为91.2%；3组白细胞滤过率经χ2检验，差异有统计学意义(χ2=63.97，P<0.05);滤前温度10～15 ℃、15 ℃以上两组白细胞滤过合格率经χ2检验，差异有统计学意义(χ2=28.47，P<0.05)。

将滤前血液温度2～10 ℃的172份分解为2组(2～8 ℃和8～10 ℃)进行白细胞滤过效果分析，其中2～8 ℃组35份，合格31份，不合格4份，合格率为88.57%，红细胞回收率97.40%；8～10 ℃组137份，合格118份，不合格19份，合格率为86.13%，红细胞回收率92%；两组白细胞滤过合格率经χ2检验，差异无统计学意义(χ2=0.143，P>0.05)。

2.2 过滤温度与过滤时间分析 血液温度高，过滤时间短；温度低，过滤时间长，见表1。

表1 过滤温度与过滤时间的关系±s，min)

2.3 贮存时间对滤除白细胞效果的影响 通过545份标本的观察，采血贮存时间4 h(A组)内滤除208份，合格率59.13%；4～12 h(B组)内滤出189份，合格率87.30%；13～48 h(C组)148份，合格率 86.48%，见表2。3组白细胞滤过率经χ2检验，差异有统计学意义(χ2=18.16，P<0.05)。两两比较，A组与B组白细胞合格率经χ2检验，差异有统计学意义(χ2=39.44，P<0.05)；A组与C组白细胞合格率经χ2检验，差异有统计学意义(χ2=31.11，P<0.05)；B组和C组白细胞合格率经χ2检验，差异无统计学意义(χ2=0.05，P>0.05)。

表2 贮存时间对滤除白细胞的影响

2.4 贮存温度与时间之间的关系 温度与贮存时间(8 h内)之间存在着负相关，Pearson相关系数(r=-0.691,P<0.05),其中200 mL相关系数(r=-0.753,P<0.05),300 mL相关系数(r=-0.742,P<0.05),400 mL相关系数(r=-0.396,P<0.05)。

3 讨 论

本课题主要研究同一白细胞滤器对血液温度和采血后贮存时间的影响。血液温度在10 ℃及以下通过滤除白细胞后，合格率86.6%(149/172)，红细胞回收率为92.9%；10 ℃以上合格率61.7%(139/225)，红细胞回收率为90.2%。2组白细胞滤过合格率经χ2检验，差异有统计学意义(χ2=30.22，P<0.05)。说明血液温度低过滤后白细胞去除率显著提高，这与谢如锋等[2]的研究结果相一致。效果较温度高好。因为血液放置在2～6 ℃冰箱一段时间后白细胞、血小板和纤维蛋白凝聚形成微聚体从而容易被去除[3]。另外白细胞在4～6 ℃中变形能力差，容易被白细胞滤器拦截。在制备去白细胞血液过程中，去白细胞血液质量与滤器的材质也有很大关系。

从过滤时间看，200、300、400 mL 3种规格型号的血袋，血液温度2～10 ℃组过滤时间均较10 ℃以上组均有延长1～2 min。当血液温度降低时，血液黏度增加，流速减小，白细胞因重力惯性过滤机理穿过滤材的减少，使血液过滤材料中滞留的时间增长，有利于白细胞被滤材截留[4]。另外，当温度降低时，细胞膜脂质双分子层的流动性减弱，细胞的变形能力变差，使白细胞更容易被过滤材料截留[2]。

温度与贮存时间(8 h内)之间存在着负相关，Pearson相关系数(r=-0.691,P<0.05),其中200 mL相关系数(r=-0.753,P<0.05),300 mL相关系数(r=-0.742,P<0.05),400 mL相关系数(r=-0.396,P<0.05)。血液在4 ℃贮存5 h后，血液温度已均匀降至8 ℃左右[5]。本次观察127份血液贮存在(4±2)℃冰箱5 h后温度，血液温度降至10 ℃以下97份，占76.38%，与相关研究基本一致。

4～8 h组与13～48 h(隔夜)组比较，红细胞回收率13～48 h组稍有降低外，白细胞滤除效果并无显著提高。过滤时间有一定延长。因此，对本文所使用的滤器而言，其过滤机制可能是以筛滤为主，血液温度对白细胞滤除有显著影响。增加贮存时间未能产生进一步的影响，仅使红细胞回收率略有下降，其机制有待进一步研究。

白细胞在(4±2)℃只能保存5～8 d，全血在4 ℃储存7 d，25%的粒细胞已不完整。随着细胞的死亡和裂解，细胞碎片增加，它们中有些仍然含有HLA-Ⅱ类抗原，不能被去白细胞滤器滤除，同样可引起同种免疫反应。现在许多研究者普遍认为，贮存前去除白细胞比贮存后去除白细胞更为优越，Yaprak等[6]研究了贮存前去除白细胞和贮存后去除白细胞的血液中生物活性物质的变化，细胞外髓过氧化物酶(MPO)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(BCP)，组胺(HIS)和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)在未滤除白细胞的血液中均呈现时间依赖性累计增加，贮存前滤除白细胞可预防这些物质的产生。

血液的贮存时间、贮存温度、血浆的量、过滤前白细胞的量、过滤时间的长短、滤过时血液的流速等都会影响白细胞的去除效果[7]。本次研究的一次性滤除白细胞血袋，在保山市的最佳滤过滤时间为采血后4～8 h为最佳时间，最佳滤除温度为2～10 ℃。在今后的工作中找出各种型号滤器血液滤除白细胞效果好、操作简单的制备方法，掌握血液的最佳滤除白细胞时机是今后努力的方向。

[1]中华人民共和国卫生部.全血及成分血质量要求[M].北京:中国标准出版社,2012.

[2]谢如锋,李云,戴勇超，等.血液温度、贮存时间制备去白细胞全血的影响[J].临床输血与检验,2005,7(3):196-197.

[3]杨成民,李家增,季阳.基础输血学[M].北京:中国科学技术出版社,2001:444-446.

[4]柯勤飞.非组造滤材白细胞过滤膜型研究[J].中国纺织大学学报,2000,26(3):23-28.

[5]孟莉，黄庆香.影响去白细胞滤器效果的因素分析[J].中国输血杂志,2015,28(9):1133.

[6]Yaprak I,Yercen N.Acomparison of different filters for white cell reduction[J].Turk，35(3):113-115.

[7] 刘加军,伍新尧,潘祥林,等.去白细胞输血治疗对恶性血液病化疗患者细胞免疫功能的影响[J].实用诊断与治疗杂志,2004,18(1):6-7.

云南省保山市科技立项项目(保科字[2016]19号)。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.23.037

A

1673-4130(2016)23-3334-03

2016-06-11

2016-09-01)

△通讯作者，E-mail:77531164@qq.com。