田阿林,温圣贤*,黄国联,许清孝,李宏光
(1 湖南农业大学教育学院,长沙 410128; 2 湖南省烟草公司郴州市公司,郴州 423000)
烤烟硫来源及控制措施研究进展
田阿林1,温圣贤1*,黄国联2,许清孝2,李宏光2
(1 湖南农业大学教育学院,长沙 410128; 2 湖南省烟草公司郴州市公司,郴州 423000)
硫元素是烤烟必需的营养元素,与烟草产量和品质有密切关系;硫含量过高会影响烤烟香吃味、燃烧性等品质指标。我国烤烟硫含量普遍偏高。从烤烟品种、土壤、肥料等方面,综述了近年来有关烤烟硫的来源及降低烤烟硫含量农艺措施的研究进展,提出了合理施用硫肥及有机肥、科学灌溉等技术措施和建议。
烤烟;硫;来源;控制措施
硫素作为继氮、磷、钾之后的第四大必需营养元素,是烟草不可或缺的重要元素,参与并影响烟草的生理代谢。烟叶硫含量普遍偏高已引起烟草各界重视,并且已把硫酸根含量作为评价烟叶品质指标之一。烟叶硫含量与其燃烧性和香吃味呈显著的负相关关系,过量的硫素营养将会降低烟叶的可用性[1~3]。近年来,由于硫酸钾的大量施用、复种连作和环境恶化引起的硫沉降,使植烟土壤中全硫和有效硫含量显著增加[4~6]。为了解决这一问题,我国烟草科技工作者开展了大量的探索研究工作,并取得了一定的成绩。笔者以此为基础,就影响硫素积累的主要因素,及控制烤烟硫含量的主要途径进行综述。
1.1 烟草品种
由于硫素利用的基因型差异,在选择品种和确定硫肥的施用时,应充分考虑品种的特性[7]。Pardee[8]认为,硫素的吸收和运转受一个或多个硫运输蛋白的共同影响。而蛋白质的合成是受基因控制的,不同基因型必然导致硫素吸收和运输过程之间的差异。朱英华等[9]认为,不同基因型烟草烟叶硫含量存在很大差异,并通过聚类分析将参试基因型划分为3类,3个烟叶硫含量在0.20%~0.70%的基因型为低效型,12个烟叶硫含量在0.70%~1.00%的基因型为中间型,13个烟叶硫含量超过1.00%的基因型为高效型。富锦大叶、永顺烟、腾冲大理叶、净叶黄、翠碧1号、品4、中烟99、大叶烟、G70、G80,这些品种属于硫高效基因型,对硫敏感;在高效型中又将烟叶硫含量高于 1.30%的基因型划分为超高效型,包括寸三皮、腾冲歪尾巴、红花大金元 3个烟草基因型;而另一些硫低效基因型,例如贵烟4号、中烟90、吉永1号,则对硫不敏感[9]。
1.2 植烟土壤性质
1.2.1 土壤的供硫水平
1.2.2 土壤质地
由于成土母质、风化程度、气候条件不同,导致土壤含硫量及有效性差别很大。由花岗岩、砂岩、河流冲积物等母质发育的质地较轻的土壤,其全硫和有效硫含量均低;山区冷浸田、返浆田、次生潜育化严重的青泥田因低温和长期淹水的环境影响硫的释放,导致土壤有效硫含量偏低;成土母质为沉积岩的土壤硫含量较高。因成土母质的差异,土壤质地也有所不同。烟草养分含量的多少与土壤养分供给能力有着重要联系,土壤养分供给能力又与土壤质地密切相关[18,19]。有研究认为[19],土壤质地与土壤养分指标关系密切程度为:有效锰>有效硫>有效铜>交换性镁>全氮>交换性钙>有效锌>有效铁>有机质>碱解氮>有效硼>全磷>速效钾>有效磷>缓效钾>水溶性氯>pH>全钾,其中土壤有效锰、有效硫、有效铜含量与土壤质地的关系最为密切。另外,许自成等[11]分析了湖南不同烟区烤烟硫含量的特点,结果表明,湖南各种土壤类型中,有效硫含量的变化规律为鸭屎泥>黄泥田>红黄泥>青泥田>沙泥田>黄灰土>黄壤土;变异程度最大的是黄灰土,变异系数高达84.04%,红黄泥次之,为81.26%,鸭屎泥最小,变异系数为38.51%。导致这种差异的主要原因,应该是成土母质、气候条件和施肥水平的差异。土壤腐殖质是土壤肥力的调节器,对土壤的水、肥、气、热状况有着直接的影响,它们在保肥供肥过程中起着重要作用。有效硫与松结态腐殖质和紧结态腐殖质呈显著或极显著正相关,与稳结态腐殖质呈显著负相关[20]。这是因为有效硫在土壤中大部分以SO42-与土壤矿物胶体吸附的形态存在,所以有效硫也与结合态腐殖质有着密切联系。
1.2.3 土壤pH
土壤酸碱度对烤烟栽培的影响较大,它不仅直接影响烤烟的生长,而且与土壤中的微生物活动,有机质的合成与分解,氮、磷元素的转化和释放,微量元素的有效性等均有密切关系[21],最适宜烤烟生长的土壤pH为5.5~6.5。夏东旭等[22]研究表明,永德烟区土壤pH值与土壤有效硫的含量呈显著正相关;而贺丹锋等[23]认为罗平烟区土壤pH值与有效硫的含量呈极显著负相关。造成这种差异的原因可能是不同烟区土壤质地、气候条件的差异。另外,欧阳磊等[24]研究表明,罗平烟区植烟土壤pH5.5~6.5的土壤的有效硫含量能够满足优质烤烟生长需要,这与宋文峰等[25]的研究一致。由此可见,植烟土壤pH值对有效硫含量及烟草对硫的吸收利用有着极其重要的影响。
1.2.4 海拔高度
随海拔高度的变化,土壤pH、光、温、水、热资源会产生很大差异,其土壤类型和成土母质也发生改变,从而影响到植烟土壤养分的含量、有效性和烟草对矿质营养的吸收利用。海拔高度与土壤有效硫含量呈极显著正相关,即随着海拔高度的增加,土壤有效硫的含量呈递增趋势[26]。这可能是因为高海拔烟区气温低,土壤微生物活性低,有机质分解不彻底而产生有机酸导致pH偏低,土壤硫有效性含量增加。
1.3 肥料种类与用量
1.3.1 不同硫肥品种的肥效
生产上常用的硫肥主要包括硫酸钾(含S17.6%)、硫酸铵(含S24.2%)、生石膏(含S18.6%)、硫酸镁(含S13.0%)、普通过磷酸钙(含S13.9%)等[3],有机肥中也含有一定量的硫,但有机肥中的硫多为有机硫,植物较难吸收利用。钾是烟草吸收的矿质元素中最多的一种元素,而钾肥的施用除硝酸钾肥提供部分钾外,大部分钾是由硫酸钾肥提供。随着烟田中大量含硫化肥的施入,植烟土壤硫酸盐增加,而硫酸盐的吸附量是随土壤溶液中硫酸盐的浓度增加而增加,导致烟草硫含量累积进而影响烟草质量。因此,烟草生产上,一般情况下不需再单独补充硫肥。常用的硫肥中,硫磺含硫量高,但其中的硫以元素形态存在,需要经过氧化转化为SO42-才能被作物吸收利用,施用后的残效也长;石膏与过磷酸钙中的硫以SO42-存在,能被作物直接吸收利用,除了能提供硫外,还可供给作物钙,但其含硫较硫磺低,施用的后效较差[27]。张传光等[28]报道,施用磷石膏显著增加了土壤中有效硫含量,也增加了烤烟地上部硫的含量,但不同磷石膏对烤烟植株硫的含量影响各异。张继光等[29]设置并开展了3年的硫酸钾肥定位试验,结果表明,根际土的有效硫含量受烤烟生育期及施肥量的影响较小,但根外土有效硫随施肥量的增加而增加,且以旺长期最高。土壤全硫含量受烟草根系及施肥量的影响,根际土中含量显著低于根外土,且两者均随施肥量的增加而显著增加(对照的根际土除外)。硫酸钾肥显著增加了叶部全硫含量及其积累量,并且随施用量的增加而增加;其对茎部的影响次之,对根部影响最小,但施肥量对成熟期各部位全硫分配率的影响较小[29]。
1.3.2 硫肥用量
由于烟株种植过程中施用的氮、磷、钾肥中含有大量的硫素;并且一些烟区为了满足烤烟对氮、磷、钾、镁等元素的需求,增施硫酸镁、硫酸钾等含硫肥料。朱英华等[30]认为,由于植物对养分的吸收受土壤条件、农田气候及作物特性等综合因素的影响,即使植烟土壤有效硫含量在适宜范围的上限,也应该对植烟土壤增施硫肥,但硫肥的用量不宜过高,以50~100 kg/hm2较为适宜。王国平等[31]研究表明,施硫量与烟叶硫含量呈正相关,尤其是中部叶呈极显著正相关(r=0.9643);少施硫处理和不施硫处理的烟叶产量和产值都较高,但不施硫处理的烟叶品质差,施硫大于54.6 kg/hm2的处理产、质量都较差。另外,杨波等[32]研究表明,与不施硫肥相比较,施肥(硫酸钾)显著增加了烤烟干物质积累以及氮、钾、硫元素的积累;在烤烟生长发育进程中,提高硫酸钾施用量并没有明显增加烟叶干质量;氮在烟株中的分配比例为叶>茎>根,在团棵期和旺长期,钾和硫在烟株中分配比例为叶>茎>根,在成熟期则为茎>叶>根;在烤烟生长进程中,硫酸钾施用量对烟根氮、钾、硫的积累量影响不明显,硫酸钾施用量对烟叶氮、钾、硫积累量的影响大于对根和茎的影响;提高硫酸钾用量显著增加了烟叶钾和硫的含量。显然,硫肥施用对烤烟干物质积累、产质量都有一定影响,但高硫或低硫水平均不利于烤烟生长发育及品质的形成,并影响到其它营养元素的吸收利用。
1.4 硫素与其它营养元素的交互作用
S与N或Ca、K、Zn之间的交互作用对养分吸收和利用是协同的,而S与Mg、Mo、Cu、Se、Fe、Sb、Cd、B、Br之间的交互作用对养分吸收和利用是拮抗的;然而,S与P或Se之间的交互作用对养分吸收和利用是协同还是拮抗取决于作物种类、生长阶段和养分的浓度;N、S配施可以促进蛋白质的合成,提高作物产量和品质[33]。氮素的不同形态也对硫素的吸收利用有影响。有研究表明,铵态氮较硝态氮更有利于促进对硫酸盐的吸收[34]。而硫对烟草磷吸收的影响表现为,低量(硫用量0~0.18 g/kg)促进,高量(硫用量>0.18 g/kg)抑制[35]。因此,生产上不光要控制硫肥施用量,还要注意与其他肥料的搭配施用。
1.5 耕作制度
烟草为忌连作作物,在烟叶生产上,烟—稻轮作是水田种烟比较科学合理的轮作模式。当前,我国烟草农业不断向规模化和集约化方向发展,由于受经济利益的驱动、耕地的有限性及生产栽培条件的制约,烟草连作已成为一种不可避免的现象[36]。刘方等[37]研究表明,黄壤烟地长期连作使土壤有效养分出现不同程度的积累,其积累程度顺序为P>S>K>Mg>Ca,主要土壤有效养分均高于临界值,致使土壤有效养分累积失调。梁文旭等[5]研究表明,0~23年烟稻复种连作研究范围内,土壤和烟叶中的硫含量呈逐步积累趋势,土壤有效硼、钼、硫、钙、镁含量与烟叶中对应元素含量达到了极显著或显著的正相关关系,其它元素相关性不显著。而朱英华等[4]研究表明,在植烟年限1~15年之间,随植烟年限的增加,植烟土壤全硫和有效硫含量显著增加;植烟年限超过15年,植烟土壤全硫和有效硫含量趋于平稳。造成这种差异的原因,可能是不同烟区气候条件、施肥水平的差异。总之,连作或轮作多年后均造成土壤养分失调,最终造成烟叶产量和品质的显著降低。
1.6 其他因素
大气中的硫素气体一部分被雨水带回土地,硫素气体浓度高时会形成酸雨[38]。陈启红等指出,酸雨对农作物产生直接作用,影响农作物的产量和质量[39]。这是因为酸雨导致土壤酸化,降低土壤肥力和生产能力,改变了农作物生长的环境,间接地影响农作物正常的生长发育。大气中含硫化合物主要是气态SO2,近年来,许多含硫废气释放到大气中,参与硫素的大气循环,并以沉降或通过植物气孔的直接吸收利用补充给土壤与植物。并且大气中的二氧化硫可被植物直接吸收,作物在土壤供硫不足时需硫量的一半来自于大气。另外,在冲积平原上,地下水对作物补给的水量相当大,地下水中的硫可作为一个重要的硫源来满足不同作物的需要[40]。因此合理施用硫肥,还必须考虑溶解并贮存在土壤浅层地下水中的硫酸盐。当前,由于环境污染、含硫化肥过度施用,作物带走的硫数量有限,农业生态循环系统中硫含量增加,对农作物产量和质量带来一定的负面影响。
2.1 合理灌溉
烟草整个生育期需水量较大,而烟田灌溉水中的硫也是土壤硫的来源之一。SO42-是阴离子,溶解度大,更容易通过淋溶流失,并积聚在下层土壤中,影响烟株根系的吸收。我国南方的红壤富含矿质元素,这些矿质元素在酸性条件下,对硫的吸附能力较强。因为雨水的淋洗作用,土层的下部会有较多的吸附态硫[41]。因此,在研究土壤供硫能力时,除考虑施肥外,也应注意灌溉水对硫在整个剖面中分布的影响。张万儒等[42]研究表明,在褐色土中施入同位素(S35)后,灌水促使S35在试验土壤中移动,不同土层S35的含量占施入S35总量的百分率为,0~3 cm的土层中测出的S35为4.02%多,3~6 cm土层中为5.37%,6~10 cm土层中为18.28%,10~15 cm土层中为31.6%,15~20 cm土层中为34.59%,20~30 cm土层中为6.13%,再往下就测不出S35了,造成S35在试验土壤剖面中这样的分布主要与灌水量有关(S35的移动起始于土壤水分大于毛管持水量时),其次与该土壤的性质(如钙、铁和铝的含量、持水量、透水性等)有关,且在相同灌水量条件下,S35移动速度较Ca45和P32更快。张雅杰等[43]在大田条件下,采用3种灌水次数和3种硫素水平的双因素试验,分析了水硫互作对烤烟生理生化指标和内在化学成分的影响,结果表明,单因素的灌水次数和施硫量对烤烟叶片硫含量影响不显著,但水硫互作对烤烟叶片的硫含量影响极显著;单株施硫2.0 g配合旺长期灌水2次最有利于烟叶内在品质的提高。因此利用水硫互作,对降低烤烟硫含量有显著效果,也提高了烟叶品质。同时不同灌溉方式对烟草品质、产量等方面也有影响。滴灌和穴灌较雨养均可显著提高烤烟品质,滴灌、穴灌方式全生育期灌溉定额67.2、44.8 mm时分别达到最优[44]。降水、灌溉水和含硫化肥是烟叶中的硫离子主要来源,若灌溉水中硫酸根离子含量较高,土壤中硫含量就会随着灌水次数的增多而增加,进而提高烟叶中硫酸根离子含量。同时,硫酸根离子随灌溉水在土壤中的淋溶作用也加强。因此,引水灌溉时,必须选择含硫量较低的水,一般灌溉水中硫含量不能大于10 mg/L,从而达到降低烟叶含硫量的目的。
2.2 合理轮作
烟草种植忌连作,同时烤烟单作方式又会造成片面消耗养分和生物的单一性;而与之相对应的轮作方式已有了大量的研究。蒋奇晋等[45]研究表明,前茬作物为水稻的烟株田间长势明显优于其他处理,烟叶化学成分也比其他处理更为协调;前茬作物为菊苣和红薯的烟株田间长势差别不明显;前作为红薯的烟株烟叶钾含量比其他处理低;前茬作物为黑麦草的烟株田间长势最差,且烟叶化学成分协调性不如其他处理。烟稻复种连作10年后应安排必要的轮作倒茬,克服长期复种连作对烤烟产质量带来的不利影响[46]。因此选择合理的种植制度不仅能使农作物获得优质高产,而且有利于均衡利用土壤养分和有效地改善土壤的理化性状,调节土壤肥力。土壤类型与不同前茬作物对烟叶品质有明显的交互作用,在水稻土条件下,相较休耕处理,前作为小麦和蚕豆时,烤烟总糖、还原糖含量适中,总氮、烟碱含量显著降低,以小麦为前作时,总氮含量仅为1.5%,烟碱含量低于2%,烤烟的感官质量评析以前作小麦和油菜最优,香气质较好,杂气少,香气风格得分均达到5,清香风格明显;在红壤条件下,以绿肥为前作时,烤烟化学成分最优,烟叶钾含量达2%以上,高于其他前作处理,烟碱含量仅为1.81%,低于以小麦、蚕豆、油菜为前作的处理,烟叶的评吸质量也以绿肥为前作时最优,烤后烟叶香气量足、燃烧性好、清香风格最明显;水稻土条件下前作为小麦,红壤条件下前作为绿肥较为适宜[47]。理想的前作作物是确保烟叶优质、高产的基础。施肥时不仅仅只考虑烟草本季,为了保证烟叶硫离子含量在适宜范围内,应对前作的施肥量和施肥种类有明确的要求。
2.3 科学施用硫肥和有机肥
一般认为土壤有效硫12.0 mg/kg时土壤供硫能力低,需要施硫肥;有效硫在12.1~16.0 mg/kg,施硫肥有一定效果;有效硫大于16.1 mg/kg时,不再需要另外补施硫肥。朱英华等[30]研究表明,在施硫量为50~100 kg/hm2时,烤烟最大叶面积显著增加,叶绿素含量、Pn、Tr、Gs、VPD明显提高,促进了烤烟正常的生长发育和光合作用。有研究表明,硫素不足(土壤硫用量<0.18 g/kg)可使烤烟叶片可溶性蛋白质含量降低;不施硫或高硫(土壤硫用量>0.18 g/kg)都会使叶片氨基酸含量降低;施用硫37.5~112.5 kg/hm2的,明显促进烤烟生长,其中以硫用量75.0 kg/hm2处理最佳,其烟叶产量和产值分别比对照增加11.73%、10.67%;硫用量达到225.0 kg/hm2处理的烟叶产量、产值分别比硫用量75.0 kg/hm2的下降18.77%、17.14%,上等烟比例下降9.9个百分点[35]。因此,应根据烟田土壤及烟叶硫含量的实际情况,合理规范含硫肥料在烟草生产中的施用量。
硫主要以硫酸盐的形态施入土壤,有效性高,利于作物吸收利用。含硫化肥是农田硫素的主要来源,对农田硫素平衡起到非常重要的作用。有机肥与硫肥都是烟叶生长过程中必不可少的肥料,且都与烟叶品质有着密切的关系。沈少君等[48]研究认为,有机肥(菜籽饼)中低水平300~375 kg/hm2,硫肥中水平56.25 kg/hm2,烟叶内在化学成分整体较协调,上、中、下部叶烟碱表现较好。对于不缺硫土壤(有效硫>16 mg/kg),硫肥不宜施用过多,一般烟草专用肥配方即能够满足烟株生长需要,不提倡另外追施硫肥[49]。有机肥与硫肥的合理平衡施用,对于提高烟叶品质、增加经济效益、丰富硫素营养理论和有机肥营养理论具有重要的意义。张焕菊等[50]研究表明,应用生物有机肥降低化肥用量30%不仅不会阻碍烤烟生长,还能在一定程度上改善烤烟经济性状,使烟叶化学成分更加协调,从而使各部位烟叶的感官评吸质量整体得到改善;其他减肥比例则会对烤烟生产带来不同程度的影响。另外有研究发现[34],不同的氮源对烟草吸收硫也有影响,在相同的供氮水平下,以铵态氮作氮源时,烟草吸收的硫高于以硝态氮作氮源时的吸硫量,硝态氮处理红壤和潮土生长烟叶硫含量降低。可见,增加硝态氮比例可以减少烟叶累积过量的硫,从而保障烟叶质量。生产上调控烟叶中的硫含量在适宜范围时,应对氮肥用量及供试氮源的搭配比例把握好,并提倡有机肥与硫肥配合施用。
2.4 土壤改良
有研究认为,土壤中有效硫含量在pH<5.0 时最高[23]。因此,合理施肥,缓解土壤酸化;施用腐熟有机肥,增强土壤对酸碱的缓冲能力;施用石灰和其他碱性物质等农艺措施都可提高土壤的pH 值,从而降低土壤硫的有效性。但目前,尚未有研究证明改良酸化土壤能降低烟叶中硫的含量。这可能是因为在调节土壤pH时,会影响到其它矿质营养的有效性,而硫与其它营养元素是具有相互作用的。
2.5 选择适宜品种
烤烟化学成分等内在指标主要受品种、生态环境、大田措施等影响。朱英华等[9]对28个不同基因型烟草品种硫肥吸收状况研究表明,低效型是烟叶硫含量在0.60%~0.67%的基因型,包括贵烟4号、中烟90、吉永1号3个烟草基因型。许自成等[51]分析了2003~2005年我国3122份烤烟样品,各品种硫含量的平均值从高到低顺序为G80>9717>NC82>K326>中烟101>云烟87>中烟100>翠碧1号>龙江911>云烟85>NC89>红花大金元。因此在不同烟区选择适宜品种是降低烤烟硫含量的有效措施。
烟草生长发育过程中硫元素的供应和硫肥的合理使用已成为当前烟草生产中亟待解决的问题。硫对烟草生长具有十分重要的意义,硫是烟草必需的营养元素之一,是蛋白质合成原料甲硫氨酸和半胱氨酸的组成成分。硫缺乏时,烟草上部叶片失绿黄化,下部叶片早衰,生长停滞,烤后烟叶的可溶性蛋白质含量降低;硫含量过高时,烤烟的产量降低,烟叶品质下降,烟叶化学成分的协调性差,烟叶的燃烧性、香气质、香气量和吃味均受到不同程度的影响。当前,我国大部分烟区烟叶硫含量普遍偏高,同时少部分烟区又存在缺硫问题。一方面,为满足烟叶钾含量的需求,一些烟区常年施用硫酸钾,造成硫素在烟叶中富集,从而降低了烟叶的产质量;另一方面,某些烟区为追求较高的经济效益,在同一土地上复种年限过长,使土壤供给植株的有效硫逐年减少,影响了烟株的正常生长发育。因此,加强烟草硫素营养的研究十分必要。在烟草硫素平衡中,输入项主要是含硫肥料和大气干湿沉降;输出项有烟草植株的吸收,土壤SO42-的淋溶损失等。总的来说,烟区应加强农艺调控措施,根据土壤硫含量状况调整烤烟种植布局,在硫肥合理施用的情况下,通过合理轮作、施用有机肥、科学灌排、改善栽培条件等措施,达到调减烟叶硫含量的目的。 此外,烟草硫素研究在下列方面有待进一步加强:(1)全国主产烟区土壤有效硫含量的调查,为合理施用硫肥提供理论指导。(2) 不同种类硫肥的应用效果及在不同土壤pH、海拔下适宜的施硫量。(3) 应用生物有机肥减少烤烟化肥用量,特别是含硫化肥的施用量。(4)硫与其它营养元素,特别是与钙、镁的交互作用。(5) 烟草基因型的硫效率差异,为烟区选择适宜品种提供理论依据。
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Research Progress on the Sulfur Source and Control Measures of Flue Cured Tobacco
TIAN Alin1,WEN Shengxian1*,HUANG Guolian2,XU Qingxiao2,LI Hongguang2
(1 College of Education,Hunan Agricultural University,Changsha,Hunan 410128,China;2 Chenzhou City of Hunan Province Tobacco Company,Chenzhou,Hunan 423000,China)
Sulfur is an essential nutrient element for flue-cured tobacco,it closely related with the yield and quality of tobacco. High sulfur content affects the quality of flue-cured tobacco. The sulfur content of flue-cured tobacco in China generally is high. The research progress on flue-cured tobacco sulfur source and reduce agronomic measures of sulfur content in flue cured tobacco in recent years were reviewed,from view of flue-cured tobacco varieties,soil,fertilizer. The technical measures and suggestions of reasonable application of sulfur fertilizer and organic fertilizer,scientific irrigation were put forward.
flue cured tobacco;sulfur;source;control measures
2016-04-19
田阿林(1996-),男,Email:3403986882@qq.com。*通信作者:温圣贤,Email:375111657@qq.com。
湖南省烟草公司郴州市公司科技创新项目(YC14026);湖南农业大学大学生创新性实验计划项目(XCX16116)。
S572.062
A
1001-5280(2016)05-0600-07
10.16848/j.cnki.issn.1001-5280.2016.05.26