温度和盐度对大珠母贝稚贝存活和生长的互作效应

谭 杰，陈振江，刘付少梅，唐啸尘,，刘志刚,

（1.广东海洋大学水产学院，广东 湛江 524088；2.广东省南海经济无脊椎动物健康养殖工程研究中心，广东 湛江 524088；3.湛江银浪海洋生物技术有限公司，广东 湛江 524000）

温度和盐度对大珠母贝稚贝存活和生长的互作效应

谭 杰1，陈振江1，刘付少梅3，唐啸尘1,2，刘志刚1,2

（1.广东海洋大学水产学院，广东 湛江 524088；2.广东省南海经济无脊椎动物健康养殖工程研究中心，广东 湛江 524088；3.湛江银浪海洋生物技术有限公司，广东 湛江 524000）

采用中心复合设计法和响应曲面分析法，研究温度（16～32℃）和盐度（22～38）2个因素对大珠母贝（Pinctada maxima）稚贝存活和生长的互作效应。结果表明，温度的一次效应、温度和盐度的二次效应以及温盐的互作效应对存活率、壳长日增长和壳高日增长的影响极显著（P＜0.01），盐度的一次效应对存活率的影响显著（P＜0.05），但盐度的一次效应和温盐的互作效应对壳长日增长和壳高日增长的影响不显著（P＞0.05）；存活率、壳长日增长和壳高日增长模型的决定系数分别为0.969 2、0.984 2、0.979 5，校正决定系数分别为0.938 5、0.968 4、0.959 0，3个模型均具有较好拟合度，可用于大珠母贝存活率、壳长日增长和壳高日增长预测。经模型优化，在存活最佳温盐组合25.01℃、盐度30.34条件下，存活率为95%；形态性状生长最佳温盐组合25.54℃、盐度31.70条件下，壳长和壳高日增长分别为2.01、1.79mm/d。

大珠母贝；稚贝；温度；盐度；互作效应

大珠母贝[Pinctada maxima (Jameson)]又称白碟贝，属软体动物门（Mollusca）瓣鳃纲（Lamellibranchia）异柱目（Anisomyaria）珍珠贝科（Pteriidae）珠母贝属（Pinctada），是培育优质“南洋珠”的理想贝种，在我国主要分布在南海海区、西沙群岛和雷州半岛等海域[1]。

大珠母贝是个体最大且适宜培育高档珠宝级海水珍珠的贝种，贝肉食用具清热、滋阴功效，贝壳制成珍珠粉可入药或用于美容，具有十分重要的经济价值[2]。受海区环境恶化影响，野生大珠母贝资源已相当匮乏，被列为我国二级保护动物。为了满足生产的需要，20世纪70年代，我国开始了大珠母贝的人工繁育及珍珠培育研究[3]。人工繁育的大珠母贝养殖到壳高3cm左右时便出现大规模死亡的现象，基本上不能通过5cm的关口[4-5]，生产极不稳定，难以扩大养殖规模[6]。针对以上难题，近几十年来，国内外学者对大珠母贝的人工育苗[3,7-8]、中间培育[6]、遗传育种[9-13]、养殖环境和方式[14-16]等方面展开了大量研究。

海水温度和盐度是水产养殖中两个重要的环境因子，关于其对大珠母贝稚贝生存和生长的互作效应研究暂未见报道。Robert 等[17]指出，多因子存在时对其互作效应的研究更具有实际意义。因此，本研究采用中心复合设计法和响应曲面分析法，研究温度和盐度两个因素间的互作效应对其生长和存活的影响，确定大珠母贝生存和生长的最佳温盐组合，以期为大珠母贝将来的海区养殖提供基础。

1 材料与方法

1.1 材料

实验稚贝取自湛江银浪海洋生物技术有限公司草潭育苗场以印尼产大珠母贝培育的稚贝，平均壳长（6.77±0.47）mm，平均壳高（4.96±0.60）mm，2015年4月18日运回广东海洋大学广东省南海经济无脊椎动物健康养殖工程研究中心实验室暂养7 d。暂养期间海水温度24.5～26.8℃，盐度28～30，连续充气，每天投喂亚心形扁藻（Platymonas subcordiformis）和湛江等鞭金藻（Isochrysis zhanjiangensis）的混合藻液4次，每天100%换水1次。

1.2 方法

1.2.1 实验设计 根据预实验结果，实验采用中心复合设计（CCD）和响应曲面分析（RSM），以稚贝存活率（SR）、壳长日增长（GL）和壳高日增长（GH）为响应值，以温度（16～32℃）和盐度（22～38）为实验因子，每个因子在上述范围内各取3个水平，各水平的编码值分别为 –1、0、1，中心点重复 3 次，共设计 11 个组合，整个实验重复2次（表1）。实验中温度、盐度分别用 t、S表示。

表1 实验设计及结果Table 1 Experimental design and results

1.2.2 实验方法与管理 将暂养7 d的大珠母贝健康稚贝随机分组，每组 30只，测其壳长、壳高后分别放入容积为1 L（实际水量750mL）的大烧杯中，烧杯置于泡沫箱（30 L）中水浴控温，泡沫箱盖黑色薄膜以保证温度稳定和光照强度一致。为防止温度、盐度剧变对实验贝的生理造成影响，按± 3/ h的速率向各个实验组添加过滤曝气的淡水或海水晶溶液调节盐度；通过发热管、冰块和电子继电器按 ±1℃/12 h的速率调节温度[18]，达到各预设温盐组合时开始实验。

实验期间，24 h持续微波充气，各组每天以湛江等鞭金藻、亚心型扁藻浓缩藻液混合饵料投喂 4次，保持水中藻量约1.5×104个/mL，并通过观察水色调整投喂量，保证稚贝摄食充足又不产生明显假粪。每天等温等盐50%换水及吸污1次。每天统计并记录大珠母贝稚贝的死亡数量，及时清理死亡稚贝。当每个平行组稚贝出现明显生长且2 d以上没有出现死亡时即结束实验，用游标卡尺测量所有稚贝的壳长、壳高，并计算稚贝的存活率和壳长、壳高日增长率。实验共进行15 d。

1.2.3 测定指标

稚贝存活率（RS）： RS＝（S1/S0）×100% ，

壳高日增长率（RH）：RH＝（H1－H0）/t ，

壳长日增长率（RL）：RL＝（L1－L0）/ t ，

公式中，S1和 S0分别为实验结束和开始时存活的稚贝数，t为实验时间（d），H1和H0分别为实验结束和开始时稚贝的壳高（mm），L1和L0分别为实验结束和开始时稚贝的壳长（mm）。稚贝死亡的界定以贝壳完全张开、对刺激没有反应为标准。

1.2.4 数据处理 实验数据用平均值±标准差（Mean ± SD）表示，通过最小二乘法对温度和盐度两个因子与响应值（存活率、壳高日增长和壳长日增长）之间的定量关系进行多元二次回归拟合，建立回归模型：

式中，ˆy为测定的响应值，b0为回归常数，b1、b2分别为温度和盐度的一次效应，b3为温度和盐度的互作效应，b4、b5为温度和盐度的二次效应。

采用Design Expert 8.0软件对数据进行处理，主要包括：模型拟合的ANOⅤA 分析、模型系数的F显著性检验，响应曲面和等高线作图。显著水平设定为α＝0.05，极显著水平α＝0.01。

2 结果与分析

2.1 温度和盐度对稚贝存活的影响

对稚贝存活率进行多元回归拟合，得到存活率（SR）与温度（t）和盐度（S）的二次多项回归模型（编码）：＝0.940＋0.063 t＋0.048S－0.060 t× S－0.130 t2－0.087S2。模型的方差分析见表2，结果表明，所建立的回归模型极显著（P＜0.01），失拟项不显著（P＞0.05），表明模型的拟合效果较好。模型的多元相关系数R2＝0.969 2，校正系数R2＝0.938 5，说明该模型能解释约96%的响应值变化，模型的选择恰当，可用于响应值的预测。

表3是回归模型系数的显著性检验结果（表中系数为编码值）。由表 3可知，温度的一次效应、温度和盐度的二次效应以及温盐的互作效应对大珠母贝存活率的影响均达到极显著水平（P＜0.01），而盐度的一次效应对大珠母贝存活的影响仅达显著水平（P＜0.05）。

表2 存活率回归模型的方差分析Table 2 Variance analysis of regression model of survival rate

表3 存活率模型系数的显著性检验Table3 The significant test for the coefficient of survival rate model

稚贝存活率的响应曲面和等高线见图 1。由图1－a可见，温度对存活率的影响曲线较陡，因此温度对存活率的影响极显著（P＜0.01），盐度曲线相对温度较平缓，影响显著（P＜0.05）。由图 1－b可见，等高线图呈椭圆形，表明温、盐的交互作用对存活率的影响极显著（P＜0.01）。特定盐度下，随温度的升高，存活率先上升后下降；特定温度下，随盐度的升高，存活率也先上升后下降。对存活率模型进行优化，结果显示，温度25.54℃、盐度31.70是存活的最佳温盐组合，此时存活率最大，为95%。

图1 温度、盐度及其互作效应对大珠母贝稚贝存活率影响的响应曲面（a）和等高线图（b）Fig.1 Response surface plot (a) and its contour plot (b) of the effects of temperature，salinity and their mutualinteractions on the survival rate of Juveniles of P.maxima

2.2 温度和盐度对稚贝壳长日增长的影响

对稚贝壳长日增长进行多元回归拟合，得到壳长日增长（GL）与温度（t）和盐度（S）的二次多项回归模型（编码）：＝2.000＋0.280 t＋0.040 S－0.060 t×S－1.240 t2－0.510 S2。模型的方差分析见表 4，结果表明，所建立的回归模型极显著（P＜0.01），失拟项检验结果显著（P＜0.05），表明拟合方程可能无效，但由于实验中纯误差均方较小（MS＝4.33×10-4），且模型的决定系数R2＝0.984 2，校正系数R2＝0.968 4，说明该模型能解释98.42%的响应值变化，仅有1.58%的误差，所以拟合的二次方程有效，可用于响应值的预测。

表5是壳长日增长回归模型系数的显著性检验结果（表中各系数值为编码值）。由表 5可知，温度的一次效应、温度和盐度的二次效应均对稚贝壳长日增长的影响极显著（P＜0.01），但盐度的一次效应以及温盐的互作效应对壳长日增长的影响不显著（P＞0.05）。

表4 回归模型的方差分析Table 4 Variance analysis of regression model of shell length growth

表5 壳长日增长模型系数的显著性检验Table 5 The significant test for the coefficient of the daily growth of shell length model

稚贝壳长日增长的响应曲面和等高线见图2。由图2－a可见，温度对壳长日增长的影响曲线较陡，因此温度对壳长日增长的影响极显著（P＜0.01），盐度曲线相对较平缓，对壳长日增长的影响不显著（P＞0.05）。由图2－b可见，等高线图接近圆形，表明温度和盐度的互作效应对壳长日增长的影响不显著（P＞0.05）。特定盐度下，随温度的升高，壳长日增长先上升后下降；特定温度下，随盐度的升高，壳长日增长也先上升后下降。在温度接近24℃，盐度接近30时，壳长日增长有最大值，对壳长日增长模型进行优化，结果显示，温度24.95℃、盐度30.39时壳长日增长最大，为2.01mm/d。

图2 温度、盐度及其交互作用对大珠母贝稚贝壳长日增长影响的响应曲面（a）和等高线（b）Fig.2 Response surface plot (a) and its contour plot (b) of the effects of temperature，salinity and their mutualinteractions on the daily growth of shell length of P.maxima

2.3 温度和盐度对稚贝壳高日增长的影响

对稚贝壳高日增长进行多元回归拟合，得到壳高日增长（GH）与温度（t）和盐度（S）的二次多项回归模型（编码）：＝1.770＋0.280t＋0.028S＋0.065 t×S－1.020 t2－0.510S2。模型的方差分析见表 6，结果表明，所建立的回归模型极显著（P＜0.01），失拟项检验结果显著（P＜0.05），表明拟合方程可能无效，但由于实验中纯误差均方较小（MS＝6.33×10-4），且模型决定系数R2＝0.979 5，校正系数R2＝0.959 0，说明该模型能解释97.95%的响应值变化，仅有总变异的2.05%不能用此模型解释，所以拟合的二次方程有效，可用于壳高日增长响应值的预测。

表7是壳高日增长回归模型系数的显著性检验结果（表中各系数为编码值）。由表 7可知，温度的一次效应、温度和盐度的二次效应对稚贝壳高日增长的影响极显著（P＜0.01），但盐度的一次效应以及温盐的交互效应对壳长日增长的影响不显著（P＞0.05）。

表6 壳高日增长回归模型的方差分析Table 6 Variance analysis of the daily growth of shell height model

表7 壳高日增长模型系数的显著性检验Table 7 The significant test for the coefficient of the daily growth of shell height model

稚贝壳高日增长的响应曲面和等高线见图3。由图3－a可见，温度对壳高日增长的影响曲线较陡，因此温度对壳高日增长的影响极显著（P＜0.01），盐度曲线相对较平缓，对壳高日增长的影响不显著（P＞0.05）。由图3－b可见，等高线图接近圆形，表明温度和盐的交互作用对壳高日增长的影响不显著（P＞0.05）。特定盐度下，随温度的升高，壳高日增长先上升后下降；特定温度下，随盐度的升高，壳高日增长也先上升后下降。对壳高日增长模型进行优化，结果显示，壳高生长的最优温盐组合为：温度25.12℃盐度30.30，此时壳高日增长为1.79mm/d。

2.4 大珠母贝稚贝生长的最佳温盐组合

本研究中，生长指标包括壳长和壳高，稚贝生长的最佳温盐组合为上述两个指标的重叠部分，对壳长和壳高日增长模型进行综合优化，得到生长的最佳温盐组合为：温度25.01℃、盐度30.34，此时壳长日增长最大达2.01mm/d，壳高日增长达1.79mm/d。

图3 温度、盐度及其交互作用对大珠母贝稚贝壳高日增长影响的响应曲面（a）和等高线（b）Fig.3 Response surface plot（a） and its contour plot（b）of the effects of temperature，salinity and their mutualinteractions on the daily growth of shell height of P.maxima

3 讨论

3.1 温度对大珠母贝稚贝存活和生长的影响

养殖水体的温度对贝类的生理活动具有一定的调控作用，其随季节的更替上下波动，影响着贝类的存活和生长[19-21]。本研究中，温度的一次效应和二次效应对大珠贝稚贝存活和生长的影响极显著（P＜0.01）。一次效应表明，稚贝的存活和生长与温度之间存在线性关系，其易受到温度的影响；二次效应表明，稚贝存在最佳的生存和生长温度，且在实验温度范围内，随温度的升高稚贝存活率、壳长日增长和壳高日增长均呈现先上升后下降的变化趋势。这与王丹丽[22]对青蛤（Cyclina sinensis），以及栗志民[23]对皱肋文蛤（Meretrix lyrata）的研究结果一致。

贝类的生存和生长与其摄食能力的高低密切相关，刘永等[24]发现在25℃时，稚贝的摄食能力最强，与本研究优化条件后得到的最佳温度基本一致。在适宜温度范围内，大珠母贝稚贝的内环境与外界环境处于相对平衡状态，其摄食能力增强，用于维持生命活动以及调节机体适应环境的能量相对较少，大部分能量流向利于稚贝生长等方向，因此，生长加快，壳高和壳长日增长上升。在许多水产动物中已经证实，营养不良将会导致机体免疫力下降，动物易感染致死的类立克次体和弧菌等病害，从而存活率降低[16]，因此，充足的食物摄取是保证高存活率的先决条件。在适宜温度范围内，大珠母贝稚贝的摄食能力高，机体营养充足，免疫力强，因而存活率相对较高；温度超过适宜范围，过高或者过低都不利于稚贝存活。这是因为低温胁迫下，贝类纤毛的摆动强度和频率下降，导致贝类的摄食能力受到抑制，不能满足自身的需要，使得用于生长的能量来源受阻，生长速度减缓，壳长和壳高的日增长呈下降趋势，最后稚贝因能量供应不足虚脱而死[25]。高温胁迫下，稚贝活动强度会增大，基础代谢能力增强，摄食能力前期也有所增强，但大部分能量用于机体活动需要，因而用于稚贝生长所需的能量较少，生长速度减慢，并且长时间的高温胁迫，贝体内的免疫相关酶变性失活，大珠母贝稚贝机体的新陈代谢能力降低，疾病更易突破其免疫系统，对其存活造成威胁，同时还会加剧贝类的氧化应激反应，产生大量活性氧自由基，损害贝类组织、器官，以致死亡[26-27]，造成稚贝存活率降低。

3.2 盐度对大珠母贝稚贝存活和生长的影响

盐度是水生动物生存所需的重要非生物环境因素之一，养殖水体的盐度易因旱季水分的蒸发或雨季的到来发生变化，从而带来渗透压的改变。贝类属变渗透压动物，需要及时根据周围盐度的变化调节自身渗透压平衡，这种调节需要消耗能量[28]。研究结果表明，盐度对稚贝存活的一次效应显著（P＜0.05），但对其生长的一次效应不显著（P＞0.05），说明稚贝的存活与盐度之间存在线性关系，存活率易受到盐度的影响；但稚贝的生长与盐度之间不存在线性关系，生长不易受盐度的影响，原因可能是在实验所设盐度范围内，稚贝还能正常的对渗透压进行调节。盐度的二次效应对稚贝存活和生长的影响均极显著（P＜0.01），所以，稚贝的存活率、壳长日增长和壳高日增长随盐度升高先上升后下降，存在最佳的存活和生长盐度。这是因为在适宜盐度范围内，大珠母贝的渗透压较稳定，用于这部分调节的能量减少，大部分能量用于生长，因此，稚贝的生长速度提高，壳长和壳高日增长的趋势呈上升状态[29]。而一旦盐度超出了大珠母贝的适宜范围后，贝体内的能量会进行再分配，用于代谢和维持自身渗透压的能量增多，用于生长的能量减少，稚贝生长迟缓[30]。另外，与温度的影响作用一致，盐度也会影响稚贝的摄食，从而影响稚贝的存活和生长。范嗣刚[16]和郝博飞等[31]研究结果表明，大珠母贝在盐度30时具有最大摄食率，这与存活率模型和生长指标模型经优化后得到的盐度相接近。因此，控制盐度对于大珠母贝的养殖具有重要作用。

3.3 温盐互作效应对稚贝存活和生长的影响

温盐的互作效应在贝类的研究中已非常广泛，刘志刚等[18]研究了温度和盐度的互作效应对华贵栉孔扇贝（Mimachlamys nobilis）生存及生长的影响；吕晓露等[32]研究了温度和盐度 2个因素对施獭蛤（Lutraria sieboldii）稚贝成活以及生长的联合效应；王亚男[33]等报道了温度、盐度对马氏珠母贝（Pinctada martensi）外套膜Hsp70 基因表达量的联合影响；朱晓闻等[34]研究了温度、盐度和 pH对马氏珠母贝清滤率的联合效应。前人的研究结果表明，多因素存在时，对其互作效应的研究更具科学性。本研究采用中心复合设计，考察了温度与盐度的协同效应，得出温度和盐度对大珠母贝稚贝的存活具有明显的交互作用（P＜0.01），但对生长的影响不显著（P＞0.05）。前者说明在大珠母贝存活方面，温度和盐度可以相互影响，Castagna[35]认为温盐互作效应的产生是温度影响了稚贝对盐度的反应速率。因此，在大珠母贝人工养殖时，为了保证高的存活率，不仅要考虑温度和盐度单因素的影响，还应该考虑温度和盐度之间的交互作用。后者说明在稚贝生长上，温度和盐度不会相互影响，朱晓闻[34]认为原因在于温度主要通过影响酶的活性来调节贝类生长、而盐度主要通过影响贝类渗透压的调节来干扰贝类活动，这两个过程是独立进行的。其他一些学者认为，温度和盐度存在互作效应的前提是温度和盐度或者这两者其中有一个必须是接近极限范围[36]，如果温度和盐度都处于正常的安全范围之内两者的关系就不明显。这可能就是温度和盐度对稚贝的生长不存在互作效应的另外一个原因。贝类对温度和盐度的适应能力与种类的遗传性和个体的生理状态有关，而与其个体大小关系不明显，同种类的所有大小个体都以相同方式对温度和盐度作出反应[37-38]。本研究所得结果可为该贝稚贝培育及成体的养殖提供参考依据。通过模型优化得出，温度 25.54℃、盐度31.70是存活的最佳温盐组合，此时存活率最大，为95%；温度25.01℃、盐度30.34是生长的最佳温盐组合，此时壳长和壳高日增长均达到最大，分别为2.01、1.79mm/d。实际生产采用此组合，可缩短养殖周期，使稚贝生长处于较高水平，提高生产效益。

[1]姜因萍，何毛贤.大珠母贝的研究概况[J].海洋科学，2009，33（2）：92-96.

[2]蒲利云，曾关琼，陈傅晓，等.大珠母贝人工繁育技术研究[J].水产科技情报，2012，39（1）：1-5.

[3]刘永，余祥勇，邓陈茂，等.大珠母贝人工繁殖技术的研究[J].广东海洋大学学报，2007，27（3）：38-44.

[4]成书营，喻达辉，黄桂菊，等.大珠母贝种苗海区深水中间培育技术研究[J].广东农业科学，2011，38（15）：102-104.

[5]邓陈茂，梁飞龙.大珠母贝人工苗养成的研究[J].海洋科学，2000，24（10）:11-13.

[6]刘建业，曾关琼，喻达辉，等.大珠母贝人工苗水泥池中间培育技术的初步研究[J].福建水产，2009，3（1）：55-59.

[7]梁飞龙，许国领，邓防茂.大珠母贝亲贝人工促熟培育与诱导排放精卵的研究[J].海洋湖沼通报，1998，7（2）：34-37.

[8]劳赞，欧春晓，梁盛，等.大珠母贝人工苗育成研究[J].广东海洋大学学报，2003，23（4）：20-24.

[9]JERRY D R，KⅤⅠNGEDAL R，LⅠND C E，et al.Donor-oyster derived heritability estimates and the effect of genotype×environment interaction on the production of pearl quality traits in the silver-lip pearl oyster，Pinctada maxima[J].Aquaculture，2012，s 338-341：66-71.

[10]JONES D B，JERRY D R，KHATKAR M S，et al.Determining genetic contributions to host oyster shell growth：Quantitative trait loci and genetic association analysis for the silver-lipped pearl oyster，Pinctada maxima[J].Aquaculture，2014，434：367-375.

[11]JONES D B，JERRY D R，KHATKAR M S，et al.A high-density SNP genetic linkage map for the silver-lipped pearl oyster，Pinctada maxima:a valuable resource for gene localisation and marker-assisted selection[J].Bmc Genomics，2013，14（1）：1-18.

[12]JONES D B，ZENGER K R，JERRY D R.Ⅰn silico whole-genome EST analysis reveals 2322 novel microsatellites for the silver-lipped pearl oyster，Pinctada maxima[J].Marine Genomics，2011，4（4）：287-90.

[13]JONES D B，JERRY D R，FORÊT S，et al.Genome-wide SNP validation and mantle tissue transcriptome analysis in the silver-lipped pearl oyster，Pinctada maxima[J].Marine Biotechnology，2013，15（6）：647-58.

[14]谢绍河，梁飞龙，符韶，等.养殖水深和笼具对大珠母贝成活率与生长的影响研究[J].中国农学通报，2013，29（2）：31-35.

[15]梁飞龙，林伟财，邓岳文，等.换水频率和附着基对大珠母贝育苗效果的影响[J].中国农学通报，2015，31（29）：33-38.

[16]范嗣刚，黄桂菊，刘宝锁，等.盐度与温度对大珠母贝和合浦珠母贝滤水率及摄食率的影响[J].水生态学杂志，2014，35（3）：61-65.

[17]ROBERT R，HⅠS E，DⅠNET A，et al.Combined effects of temperature and salinity on fed and starved larvae of the European flat oyster Ostrea edulis[J].Marine Biology，1987，97（1）：95-100.

[18]刘志刚，刘建勇，杨博.温度与盐度对华贵栉孔扇贝幼贝存活与生长的互作效应研究[J].海洋科学，2011，35（10）：75-80.

[10]栗志民，钱佳慧，劳翠英，等.温度和盐度对华贵栉孔扇贝免疫相关酶的联合效应[J].海洋科学进展，2015，33（2）：227-238.

[11]刘志刚，刘建勇，杨博.温度与盐度对华贵栉孔扇贝幼贝存活与生长的互作效应研究[J].海洋科学，2011，35（10）：75-80.

[12]TETTELBACH S T，RHODES E W.Combined effects of temperature and salinity on embryos and larvae of the northern bay scallop Argopecten irradians irradians[J].Marine Biology，1981，63（3）：249-256.

[13]CAⅠN T D.The combined effects of temperature and salinity on embryos and larvae of the clam Rangia cuneata[J].Marine Biology，1973，21（1）：1-6.

[19]钱佳慧，栗志民，申玉春，等.温度和盐度对华贵栉孔扇贝抗氧化酶活性的联合效应研究[J].南方水产科学，2015，11（6）：49-57.

[20]王成东，聂鸿涛，闫喜武，等.温度和盐度对薄片镜蛤孵化及幼虫生长与存活的影响[J].大连海洋大学学报，2014，29（4）：364-368.

[21]DAⅤⅠS M.The combined effects of temperature and salinity on growth，development，and survival for tropical gastropod veligers of Strombus gigas[J].Journal of Shellfish Research，2000，19（2）：883-889.

[22]王丹丽，徐善良，尤仲杰，等.温度和盐度对青蛤孵化及幼虫、稚贝存活与生长变态的影响[J].水生生物学报，2005，29（5）：495-501.

[23]栗志民，刘志刚，姚茹，等.温度和盐度对皱肋文蛤幼贝存活与生长的影响[J].生态学报，2010，30（13）：3406-3413.

[24]刘永，焦宗垚，张春芳.温度对大珠母贝滤水率的影响[J].广东海洋大学学报，2010，30（1）：23-26.

[25]彭建华，陈文祥，栾建国，等.温度、pH对二种淡水贝类滤水率的影响[J].动物学杂志，2004，39（6）：2-6.

[26]CHEN J，MAⅠ K，MA H，et al.Effects of dissolved oxygen on survival and immune responses of scallop（Chlamys farreri，Jones et Preston）[J].Fish and ShellfishⅠmmunology，2007，22（3）：272-81.

[27]陈政强，陈昌生，战文斌.低氧胁迫对九孔鲍免疫防御因子的影响[J].水产学报，2012，36（11）：1739-1747.

[28]章启忠，刘志刚，王辉.华贵栉孔扇贝稚贝盐度适应性的研究[J].广东海洋大学学报，2008，28（1）：40-43.

[29]HEPHER B，LⅠAOⅠ C，CHENG S H，et al.Food utilization by red tilapia-Effects of diet composition feeding level and temperature on utilization efficiencies for maintenance and growth[J].Aquaculture，1983，32（34）：255-275.

[30]强俊，任洪涛，徐跑，等.温度与盐度对吉富品系尼罗罗非鱼幼鱼生长和肝脏抗氧化酶活力的协同影响[J].应用生态学报，2012，23（1）：255-263.

[31]郝博飞，黄桂菊，喻达辉，等.盐度和饵料种类及浓度对大珠母贝稚贝滤水率的影响[J].广东农业科学，2012，（8）：132-134.

[32]吕晓露，孙宗红，刘志刚，等.温度与比重互作对施獭蛤稚贝成活与生长的影响[J].南方水产科学，2015，11（3）：59-66.

[33]王亚男，王辉，罗明明，等.温度、盐度对马氏珠母贝外套膜Hsp70基因表达量的联合影响[J]．广东海洋大学学报， 2012，32（3）：35-41.

[34]朱晓闻，王辉，刘进，等.温度、盐度和 pH对马氏珠母贝稚贝清滤率的联合效应[J].生态学报，2012，32（12）：3729-3736.

[35]CASTAGNA M.Culture of the bay scallop，Argopecten irradinans Lamark，in Ⅴirginia[J].Marine Fisheries Review.1975，11（37）：19-24.

[36]CALABRESE A.Ⅰndividual and combined effects of salinity and temperature on embryos and larvae of the coot clam,Mulinia lateralis (SAY) [J].Mar Biol Lab，1969，137：417-428.

[37]何义朝，张福绥，王萍，等.墨西哥湾扇贝稚贝对盐度的耐受力[J].海洋学报（中文版），1999，21（4）：87-91.

[38]尤仲杰，陆彤霞，马斌，等.几种环境因子对墨西哥湾扇贝幼虫和稚贝生长与存活的影响[J].热带海洋学报，2003，22（3）：22-29.

（责任编辑：陈庄）

Combined Effects of Temperature and Salinity on the Survival and Growth Rate of Juveniles of Pinctada maxima

TAN Jie1，CHEN Zhen-jiang1，LⅠUFU Shao-mei3，TANG Xiao-chen1,2，LⅠU Zhi-gang1,2
（1.Fisheries College Guangdong Ocean University；2.Guangdong Province，Nanhai Economic invertebrates healthy breeding Engineering Research Center；3.Zhanjiang Silverwave Ltd.of Marine Biotechnology，Zhanjiang 524000，China）

By using two-factor central composite design（CCD） and response surface methodology（RSM），the synergistic effect of temperature (16 –32℃) and salinity (22 –38) on the survival and growth of juveniles of Pinctada maxima are studied.The results show that the linear and quadratic effects of temperature on juvenile survival rate,growth of shell length and shell height are significant particularly (P＜0.01).The linear effects of salinity on juvenile survival rate are significant (P＜0.05) but the linear effect of salinity and the interaction effect of temperature and salinity on the growth of shell length and shell height is not significant (P＞0.05).By response surface methodology,a model equation is established for the relationship of juvenile survival rate,growth of shell length and shell height to the two factors,with the R2of 0.969 2,0.984 2,0.979 5,correction coefficients are respectively 0.938 5,0.959 0,0.968 4,suggesting that the fitting capability of the model was satisfactory and could be practicably applied for prediction on response values.Based on the established model,the survivalrate reached the maximum (95%) at the 2-factor combination of 25.54℃/ 31.70.The growth of shell length and shell height have reached their maximum (2.01,1.79mm/d) when the 2- factor combination is 25.01℃/ 30.34.The research results can provide reference to the cultivation of juveniles of Pinctada maxima and artificial breeding.

Pinctada maxima; juveniles; temperature; salinity; combined effects

S968.35

A

1673-9159（2016）06-0044-08

10.3969/j.issn.1673-9159.2016.06.008

2016-06-27

农业部948项目（2010-Z33）；广东省海洋渔业科技推广专项(A201008A01，A201201A06，A201208A07)

谭杰（1990—），硕士研究生，研究方向为贝类遗传育种与养殖研究。Tel： 15017373995；E-mail：1065864989@qq.com

刘志刚（1963—），教授，从事贝类遗传育种与养殖技术研究。E-mail：liuzg919@126.com