Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸诱导老年痴呆大鼠模型

张培华 程 琳

(南阳理工学院张仲景国医学院，河南 南阳 473004)



Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸诱导老年痴呆大鼠模型

张培华 程 琳

(南阳理工学院张仲景国医学院，河南 南阳 473004)

目的 建立Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸诱导老年痴呆(AD)中大鼠模型。方法 120只大鼠平均分为观察组，实施Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸诱导AD，不实施Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸诱导AD为对照组，针对两组大鼠的记忆水平等指标进行观察比较。结果 两组定位航行试验中，潜伏期4 d及后2 d差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组学习记忆能力中象限百分比、20%、40%区域有统计学差异(P<0.05)。观察组空间探索学习记忆中象限百分比、20%、40%区域、穿过原平台的次数与对照组有统计学差异(P<0.05)。结论 Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸诱导AD模型，与传统的模拟AD模型可以更好地AD的发病特征，可以将其作为AD治疗中的新模型。

Aβ25～35；鹅膏蕈氨酸；老年痴呆

老年性痴呆(AD)是一种中枢神经减退性病症，主要的临床症状为进行性精神状态衰变，利用记忆力减退，情绪的改变、行为的失常等〔1～4〕。本文研究Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸诱导AD大鼠模型的建立。

1 资料与方法

1.1 一般资料 Wistar雄性大鼠120只均来自湖北省实验动物研究中心，合格证号：0038006，15月龄。平均分为观察组和对照组，实施Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸诱导AD为观察组，不实施Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸诱导AD为对照组。

1.2 方法 使用的试剂有Aβ25～35(Sigma公司)、鹅膏蕈氨酸，主要仪器迷宫自动实验记录仪(中国医学科学院)、脑立体定位仪(美国TPI公司)。将Aβ25～35 1 mg溶于100 μl灭菌生理水中，保证浓度为10 μg/μl，并将其封口，使用封口膜封好之后，放置在37℃的环境中进行孵育，使得Aβ25～35聚集、老化。将1 mg的鹅膏蕈氨酸溶入100 μl的灭菌蒸馏水中，浓度控制在10 μg/μl。将已经处理好的Aβ25～35、鹅膏蕈氨酸的溶液，注射给观察组。先使用戊巴比妥钠进行腹腔麻醉注射，之后将大鼠固定在定位仪上，将Aβ25～35、鹅膏蕈氨酸溶液注射到大鼠大脑局部软组织，并进行皮肤的缝合。对照组不进行任何的处理。两组大鼠放在制作的迷宫中，对其学习记忆能力进行评价。第一，定位航行试验。将大鼠放置四个象限的水池中，对其2 min内其找到平台出口的时间(对潜伏期的逃避)进行记录。第二，空间探索试验。将实验水池中的平台撤除，将大鼠放入实验水池中，并记录其2 min内跨越原平台位置的次数，并针对两次记录的结果进行分析。记录平台象限游泳距离占总距离的百分比、池壁20%和40%区域有用距离百分比。可以围绕着空间线索找到平台位置，运动轨迹最多的为正常；基本上可以围绕着池壁游泳，也会沿着4个象限平台对其左右两侧的象限进行寻找，偶尔可以找到平台，或者是极少找到平台，则为不正常。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行t检验。

2 结 果

2.1 定位航行试验结果 两组定位航行试验中，潜伏期4 d及训练末后2 d差异有统计学意义(P<0.05)。观察组学习记忆能力中象限百分比、20%、40%区域差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2 空间探索试验结果 观察组空间探索学习记忆中象限百分比、20%区域、40%区域、穿过原平台的次数与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表1 两组定位航行试验中大鼠的潜伏期和学习记忆结果对比±s,n=60)

表2 两组空间探索试验学习记忆结果±s,n=60)

3 讨 论

Aβ25～35是β淀粉样蛋白其是神经病学的老年斑的核心成分，其在老年痴呆大鼠模型中，可以诱导大鼠学习记忆功能下降，尤其是工作记忆能力〔5～10〕。鹅膏蕈氨酸是一种含有异恶唑环的氨基酸，其是强烈的神经毒素，可以对大脑造成严重的损伤。对大鼠的大脑神经元产生较大的毒性作用，导致大脑内老年斑的沉积，延缓动物的行动，降低其学习记忆能力〔11〕。

Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸对大鼠的大脑组织产生的影响较大，其对大鼠的学习能力、记忆能力等产生较大的损伤，Aβ25～35促进大鼠衰老，鹅膏蕈氨酸影响大鼠的神经元系统，降低大鼠的工作学习记忆能力，Aβ25～35合并鹅膏蕈氨酸可应用于大鼠，诱导AD大鼠模型的建立。

为了更好地治疗AD，研制更多治疗药物，需要进行相关的模拟实验，而不能从人体上进行活体实验，只能从动物实验中获取相关的数据，进行AD治疗药物的研制〔12〕。

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11 黄忠仕，焦 杨，张士军，等.龙眼参多糖对老年痴呆模型SAMP8小鼠学习记忆的改善作用〔J〕.中国老年学杂志，2008；28(21)：2086-8.

12 齐 鹏，杨晓庆，杜志敏，等.阿尔兹海默症动物模型的研究现状〔J〕.新乡医学院学报，2013；30(10)：838-41.

〔2015-02-19修回〕

(编辑 苑云杰)

2015年河南省科技攻关项目(No.152102310025)

张培华(1978-)，女，硕士，讲师，主要从事老年痴呆研究。

R332

A

1005-9202(2016)22-5525-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.014