囊胚培养及移植在体外受精周期中的应用

杨世俊

楚雄州人民医院生殖医学科，云南楚雄 675000

囊胚培养及移植在体外受精周期中的应用

杨世俊

楚雄州人民医院生殖医学科，云南楚雄 675000

目的 探讨囊胚培养及移植在体外受精周期中的应用。 方法 整群选取2012年1月—2014年12月期间来该院接受体外受精-胚胎移植的64例患者作为该次研究对象，按照选择胚胎培养及移植时期的不同将64例体外受精-胚胎移植患者分成研究组和对照组，研究组为选择囊胚期胚胎培养及移植的患者，共33例，对照组为选择卵裂期胚胎培养及移植的患者，共31例。受精成功后采用G1进行早期胚胎培养，采用G2进行囊胚培养。 结果 两组患者中各有1例消移植周期病例，实际移植周期数分别为32个和30个，研究组患者的胚胎植入率为37.1%，妊娠率为53.1%，与对照组患者的19.4%和33.3%比较，差异有统计学意义（P<0.05）。两组患者的流产率和异位妊娠率比较差异无统计学意义（P>0.05），但对照组患者的多胎率明显高于研究组患者（P<0.05）。结论 选择囊胚期胚胎培养及移植可有效提高胚胎植入率和妊娠率，降低不良妊娠结局发生率和移植周期取消率。

囊胚培养；移植；卵裂期；体外受精周期；胚胎植入率；妊娠结局

临床研究发现胚胎植入率在较大程度上影响着体外受精-胚胎移植的成功率，如何有效提高体外受精胚胎植入率，一直以来都是我国临床重点研究课题之一[1]。近年来伴随着我国医学技术的不断进步，体外受精-胚胎移植技术在胚胎培养方面也取得了较大进步，胚胎植入率也得到了明显提高[2]。该院于2012年开始进行囊胚培养及移植周期研究，并整群选取2012年1月—2014年12月期间来该院接受体外受精-胚胎移植的64例患者作为研究对象，对囊胚培养及移植在体外受精周期中的应用进行了分析，现将所得结果做出以下整理报道，以期能为临床对该项目进行深入研究提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

该次研究整群选取2012年1月—2014年12月期

间在该院接受体外受精-胚胎移植的64例患者作为研究对象，并按照选择胚胎培养及移植时期的不同将64例患者分成研究组和对照组。

研究组33例患者为囊胚期胚胎培养及移植的患者，平均年龄为（31.9±1.1）岁，平均不孕时间为（5.4± 0.8）年。对照组31例患者为选择卵裂期进行胚胎培养及移植的患者，平均年龄为（31.5±1.3）岁，平均不孕时间为（5.5±0.7）年。两组患者的临床基本资料比较存在的差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

两组患者入院后，该院对两组患者实施相同的促排卵方案，具体促排卵方案为促性腺激素激动剂、促卵泡素、尿促性腺激素、人绒毛膜促性腺激素长周期促排卵。于两组患者月经周期1周后开始检测两组患者卵泡发育情况，并根据患者卵泡发育的具体情况适当调整促排卵方案，当患者有2个直径大于18 mm的卵泡时，给予患者注射人绒毛膜促性腺激素促进排卵，于注射后34 h后经阴道超声取卵。

1.2.1 体外受精 成功取卵后进行洗涤，并放入含有人血清白蛋白中的受精液中进行培养，4 h后开始授精，授精结束后16～18 h内严密观察受精卵情况，将其中正常的受精卵取出放入G1培养液中进行培养。

1.2.2 胚胎移植 取卵后3 h将卵子周围的颗粒细胞清除，根据卵子成熟情况进行单精子显微注射，然后放入G1培养液中培养，并分别于培养后第2天和第3天对胚胎质量进行评估。若胚胎胞质颗粒形态规则或形态稍欠规则，分布均匀，卵裂速度适中，卵裂球均匀，且卵裂碎片小于20%则判定为优质胚胎。于受精后2～5 d上午从培养液中挑取2～3个优质胚胎进行移植。受精后第3天对接受囊胚培养的患者进行常规胚胎评估，若出现紧密连接，将G1培养液洗净，放入G2培养液中继续培养，从第5天起严密监测囊胚形成情况。采用人类囊胚分级系统对形成的囊胚进行分级，并选择2个或3个3期以上囊胚进行移植，若培养后无3期以上囊胚，可适当延长培养时间，如仍无3期以上囊胚，则需放弃移植。于囊胚移植后14 d检查患者是否妊娠，于移植35 d后采用影像学技术观察胎心搏动情况，明确患者妊娠结果。

1.3 观察指标

该次研究观察两组患者的胚胎植入率、妊娠率和妊娠结局。

1.4 统计方法

使用统计学软件对该次研究过程中所得研究数据进行统计学处理，软件版本为SPSS 21.0，胚胎植入率、妊娠率等计数型对比资料采用例数/百分比（n/%）表示，采用χ2进行组间差异检验，P＜0.05代表差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者的胚胎植入率比较

该次研究过程中研究组患者和对照组患者中均有1例患者取消移植周期，经统计得出研究组患者的胚胎植入率为37.1%，明显高于对照组患者的19.4%（P＜0.05），表1。

表1 2组患者的胚胎植入率比较

2.2 两组患者的妊娠率比较

研究组未取消移植周期的32例患者中，共17例患者成功妊娠，妊娠率为53.1%，对照组未取消移植周期的30例患者中，共10例患者成功妊娠，妊娠率为33.3%。两组患者的妊娠率比较差异有统计学意义（χ2=7.836，P=0.004）。

2.3 两组患者的妊娠结局比较

经统计发现两组患者在流产率和异位妊娠率上存在的差异无统计学意义（P＞0.05），但对照组患者的多胎率明显高于研究组患者（P＜0.05），见表2。

表2 2组患者的妊娠结局对比分析

3 讨论

囊胚培养及移植是人类辅助生殖技术中的重要组成部分，如何提高接受人类辅助生殖技术患者的妊娠率及安全性，已成为现阶段我国临床生殖医学重点研究内容之一[3]。在我国临床对人类辅助生殖技术进行研究的初期，多数研究者认为在卵裂期进行胚胎培养及移植可获得较高的妊娠率，但近年来随着临床对人类辅助生殖技术研究的不断深入，研究者发现于囊胚期进行胚胎培养和移植所获得的胚胎植入率和妊娠率均明显高于卵裂期胚胎培养和移植。出现这一结果的原因

是因为囊胚在形成的过程中，依次经历了细胞融合、囊胚腔出现及囊胚腔扩张等形态变化，且在基因调控方面经历了由母型调节向胚胎型调节转变的过程，因此相对于卵裂期而言，囊胚器期胚胎具有更好的发育潜能。

该院该次针对囊胚培养及移植在体外受精周期中的应用进行了研究，研究过程中将囊胚期胚胎的培养时间延长后发现，胚胎植入率和妊娠率分别为37.1%和53.1%，明显高于卵裂期胚胎培养和移植的19.4%和33.3%。唐永梅等[4]在对“选择性囊胚培养和移植的临床应用和效果分析”这一课题进行研究时发现，培养第2天移植的胚胎植入率和妊娠率明显低于培养第5天移植的胚胎植入率和妊娠率，与该院该次研究结果具有一致性。早期，传统辅助生殖技术均于取卵后48～72 h之间进行移植，尽管获得了较高的受精率和卵裂率，但胚胎植入率却难以超过15%[5-6]。分析出现上述问题的原因，主要是由于胚胎在输卵管内发育至第5～6天时，囊胚才能移植至宫腔，而胚胎过早移植至宫腔内，会导致胚胎发育和内膜发育丧失协调性，故不能获得较高的胚胎植入率。同时，该次研究还发现囊胚期进行胚胎移植，胚胎发育与女性生理机能同步，此时移植女性宫腔内粘液减少，便于医师操作，且子宫收缩减少，可避免胚胎排出体外。此外，参与该院该次研究的64例患者中，共有2例患者取消移植周期，研究组和对照组各1例，2例患者的取消原因均为囊胚质量不合格，其中1例患者受培养环境和卵子质量的影响，另1例患者受男方因素的影响，由此可知人类辅助生殖技术并不能确保所有患者均能获得囊胚移植，这一观点在汪彩珠[7]等的临床研究中也有体现。该次研究两组患者的异位妊娠率和流产率比较差异无统计学意义，但对照组患者的多胎率相对较高。由此可知不同时期进行胚胎培养及移植可对妊娠结局造成不同程度的影响。

总结该次研究结果得出于囊胚期进行胚胎培养和移植，移植周期取消率低，可有效提高胚胎植入率和妊娠率，降低不良妊娠结局的发生率。同时也提示，对于由优质胚胎的患者，临床应优先考虑囊胚培养及移植。

[1]周黎明.囊胚培养及移植在体外受精过程中的临床应用[J].现代实用医学,2008,20(7):553-554.

[2]刘艳丽,杨晓娜,许小燕,等.新鲜周期和复苏周期囊胚培养及移植的临床结局分析[J].郑州大学学报：医学版,2015(2): 264-267.

[3]唐永梅,韦继红,牟联俊,等.不同受精方式对囊胚培养和移植结局的影响[J].实用医学杂志,2014(14):2260-2262.

[4]唐永梅,韦立红,韦继红,等.选择性囊胚培养和移植的临床应用和效果分析[J].实用医学杂志,2014(18):2958-2960.

[5]柳雪琴,檀大羡,王书佳,等.双侧输卵管梗阻患者囊胚移植后的妊娠结局[J].临床和实验医学杂志,2011,10(17):1348-1349.

[6]王荣,费小阳,王丽卿,等.对废弃胚胎行囊胚培养在体外受精-胚胎移植中的意义[J].浙江医学,2014(17):1447-1449.

[7]汪彩珠,冯贵雪,张波,等.不同受精方式对选择性囊胚培养结局的影响[J].中华男科学杂志,2014,20(8):697-701.

Application of Embryo Culture and Transplanting in Blastocyst Stage in the In Vitro Fertilization Cycle

YANG Shi-jun
Department of reproductive medicine,Chuxiong People's Hospital,Chuxiong,Yunnan Province,675000 China

Objective To study the application of culture and transplanting in blastocyst stage in the in vitro fertilization cycle.Methods 64 cases of patients receiving in vitro fertilization-embryo transfer in our hospital from January 2012 to December 2014 were selected as the research object and divided into research group(33 cases)and control group(31 cases) according to the different embryo culture and transplanting stages,patients with embryo culture and transplanting in blastocyst stage were regarded as the research group,patients with embryo culture and transplanting in cleavage stage were regarded as the control group,after the successful fertilization,they received early embryo culture with G1 and blastocyst culture with G2.Results There was 1 case cancelling the transplanting cycle in each group,and the actual numbers of transplanting cycle of the two groups were respectively 32 and 30,the differences in the embryo implantation rate and the pregnancy rate between the two groups were statistically significant(37.1%vs 19.4%)(53.1%vs 33.3%) （P<0.05）,the differences in the abortion rate and ectopic pregnancy rate by comparison were not statistically significant（P>0.05）,however,the multiple pregnancy rate in the control group was obviously higher than that in the research group （P<0.05）.Conclusion Embryo culture and transplanting in blastocyst stage can effectively improve the embryo implantation rate and the pregnancy rate,and can reduce the incidence rate of adverse pregnancy outcome and transfer cycle cancellation rate.

Blastocyst culture;Transplanting;Cleavage Stage;In vitro fertilization cycle;Embryo implantation rate;Pregnancy outcome

R321

A

1674-0742（2016）01（a）－0099-03

10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.01.099

2015-10-05）

杨世俊（1969-），女，云南云县人，本科，副主任医师，主要从事妇科生殖内分泌，辅助生殖技术及宫腹腔镜微创手术方面的工作。