免疫固定电泳及免疫球蛋白定量在多发性骨髓瘤诊断和分型中的应用

陈云峰，葛 亮，沈建江

(江苏省中医院 检验科，江苏 南京210029)



*通讯作者

免疫固定电泳及免疫球蛋白定量在多发性骨髓瘤诊断和分型中的应用

陈云峰，葛 亮*，沈建江

(江苏省中医院 检验科，江苏 南京210029)

目的 探讨免疫固定电泳和免疫球蛋白定量在多发性骨髓瘤诊断和分型中的应用。方法 采用血清蛋白电泳技术、免疫固定电泳技术、免疫比浊法对87例多发性骨髓瘤患者进行分析。结果 87例患者血清蛋白电泳77例检出M蛋白，阳性率为88.5%，免疫固定电泳均为阳性，免疫分型IgGκ 29例，占33.3%；IgGλ 22例，占25.3%；IgAκ 10例，占11.5%；IgAλ12例，占13.8%；IgMκ 4例，占4.6%；IgMλ 3例，占3.4%；κ轻链2例，占2.3%；λ轻链5例，占5.7%；同时相应类型的免疫球蛋白和轻链增高伴其它组分降低。结论 免疫固定电泳和免疫球蛋白定量对多发性骨髓瘤的诊断和分型具有重要的临床应用价值。

多发性骨髓瘤；血清蛋白电泳；免疫固定电泳；免疫球蛋白

(ChinJLabDiagn,2016,20:1881)

多发性骨髓瘤(MM )是恶性浆细胞病中最常见的一种类型，是单克隆浆细胞恶性增殖并分泌大量单克隆免疫球蛋白的一种血液系统恶性肿瘤。近年来发病率逐年上升，发病年龄呈年轻化趋势。其临床表现多样、轻重程度不一、受累的靶器官各不相同，极易造成漏诊、误诊[1,2]，对该疾病的及时诊断、治疗以及预后都造成很大影响。随着免疫固定电泳(IFE)分析的广泛应用，使MM的诊断及分型日益完善，其快速准确、高度特异性和敏感性的优势使其成为目前临床实验室诊断MM的常规首选方法之一[3]。我们对87例 MM患者进行血清蛋白电泳、血清免疫固定电泳和免疫球蛋白定量检测，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 87例MM患者均来自2013年7月至2014年6月我院门诊和住院的病人，其中男58例，女29例，年龄在28-90岁，平均年龄68.9岁，全部病例均符合MM的诊断标准[4]。正常对照组30例，男15例，女15例，平均年龄62.7岁，排除肝病、血液病、肾脏病、肿瘤、风湿病等影响免疫球蛋白检测结果的病例，空腹采集静脉血3 ml，2 h内分离血清，避免溶血和脂血。

1.2 实验仪器、试剂和方法 采用法国Serbia Hydras 全自动电泳分析仪和配套试剂进行血清蛋白电泳和血清免疫固定电泳检测，根据检测结果进行免疫球蛋白分型。采用美国Beckman Immage特定蛋白分析仪和原装试剂，用透射免疫比浊法进行免疫球蛋白定量测定，实验前均对仪器进行校准并严格按试剂盒说明书进行操作。

2 结果

2.1 87例MM患者经免疫固定电泳均检出M蛋白，检出阳性率为100%，经血清蛋白电泳检出77例M蛋白，检出阳性率为88.5%。10例血清蛋白电泳未检出M带的，经免疫固定电泳分析后，确定其中4例为IgA型，6例为轻链型。

2.2 血清免疫固定电泳结果的判断 单克隆条带(M带)是呈狭窄、致密、浓染、界限分明的沉淀带，与参考泳道(ELP)上的M带处于同一个水平位置。以下为常见类型的电泳图谱，见图1-4。

图1 正常人 图2 IgG-κ型

图3 IgA-λ型 图4 单纯λ轻链型

2.3 87例MM经免疫固定电泳分析，IgG型 51例，占58.6%，为最多，IgA型次之，22例，占25.3%。IgG κ型29例，占33.3%，IgG λ型22例，占25.3%；IgA κ型10例，占11.5%，IgA λ型12例，占13.8%；IgM κ型4例，占4.6%，IgM λ型3例，占3.4%；单纯轻链κ型2例，占2.3%，单纯轻链λ型5例，占5.7%，免疫固定电泳对单克隆蛋白检出率为100%。其结果见表1。

表1 87例MM患者血清免疫固定电泳分型结果

2.4 各种类型多发性骨髓瘤患者的免疫球蛋白与正常对照组免疫球蛋白相比较，IgG型MM中，IgG含量明显升高，IgA、IgM降低，与正常对照组相比P<0.05；IgA型MM中，IgA含量明显升高，IgG、IgM降低，与正常对照组相比P<0.05；IgM型MM中，IgM含量明显升高，IgG、IgA降低，与正常对照组相比P<0.05；轻链型MM中，IgG、IgA、IgM的含量均明显降低，与正常对照组相比P<0.05。结果见表2。

表2 87例MM患者和正常对照组血清免疫球蛋白定量结果

注：*P<0.05

3 讨论

多发性骨髓瘤(MM ) 是发生于B淋巴细胞的恶性浆细胞疾病，患者体内出现单克隆的异常免疫球蛋白或本周蛋白。MM好发于中老年，但近年发病率逐渐增高且发病年龄有提前趋势，由于本病患者早期无明显临床表现的改变，后期可因发热、尿液改变、腰腿痛等被误诊为呼吸系统感染、肾炎或骨病而延误病情，临床上MM的误诊率可高达40-50%。因此，许多MM患者错过了最佳治疗时机，在临床诊治中应给予足够重视[5]。随着科学技术发展，免疫电泳技术在分子生物学和医学领域内广泛应用，成为临床检验和分析研究中不可缺少的技术，免疫固定电泳(IFE)是灵敏度较高的分离及鉴定蛋白质的方法，具有较强的特异性。IFE是应用单克隆抗体检测单克隆免疫球蛋白，可检出含量极少量的单克隆成分，早期诊断效果较好。免疫球蛋白定量检测可见一种或几种球蛋白增高，而其他几种相应降低。因此单用免疫球蛋白定量不能很好的提示MM，需要结合IFE来鉴别有无单克隆成分的存在[6]。

本文采用免疫固定电泳和免疫球蛋白定量对多发性骨髓瘤患者进行检测，结果显示，IFE对单克隆蛋白检出率为100%，较血清蛋白电泳的检出率(88.5%)高，由此可见血清蛋白电泳图谱中未出现M 蛋白峰也不能排除MM，分析原因，一方面，当M带位于β与γ之间或β区，与β球蛋白重合，或因IgA聚集形成M峰变宽，不典型时容易造成结果的误读，特别是单纯轻链型和IgA型；另一方面，单纯轻链型常由于大量单克隆免疫球蛋白轻链从尿中排出，血中含量减少，血清蛋白电泳的敏感性较低而漏检。此外，本实验还采用免疫固定电泳对87例MM 患者血清M蛋白进行分型鉴定，结果显示IgG型占58.6%，其中κ型33.3%，λ型25.3%；IgA型占25.3%，其中κ型11.5%，λ型13.8%；IgM型占8.0%，其中κ型4.6%，λ型3.4%；单纯轻链型占8.0%，其中κ型2.3%，λ型5.7%。提示IFE可直接判断M蛋白的类型，有较高的敏感性和特异性，可作为MM的常规检测方法，另外，由于MM患者经治疗好转后，M蛋白可减轻或消失，因此IFE还可用来评估MM患者的病情和疗效，以便及时调整治疗方案[7]。

免疫球蛋白定量对于发病早期的患者，敏感性较低，容易漏检，且不能提示单克隆成分的存在，但对于已经确诊的患者，测定免疫球蛋白含量有助于临床判断病情和观察疗效。本实验中，在各型MM患者中，其相应类型的免疫球蛋白和游离轻链含量均有不同程度的增高，同时伴有其他类型免疫球蛋白含量的降低和轻链比值的改变，与文献报道一致[8]。

免疫固定电泳技术由于结合了抗原抗体反应的特异性和蛋白质电泳的高分辨率，具有高度的敏感性、特异性[9]，在MM的鉴别诊断、指导治疗、疗效监测、预后判断都有重要的临床意义[10]。随着MM发病率逐年升高、发病年龄的年轻化的趋势，早期明确诊断显得格外重要。所以我们在进行MM的诊断时，应将免疫固定电泳作为常规方法，并结合血清蛋白电泳、免疫球蛋白定量和其它指标，进行综合分析，提高对多发性骨髓瘤的诊断和鉴别诊断能力，从而降低MM的漏诊率、误诊率。

[1]陈广化，林凤茹．多发性骨髓瘤的误诊因素分析[J].临床荟萃，2015，30(10)：1120．

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Application of serum immunofixation electrophoresis and immunoglobulin quantitative in diagnosis and clinical typing of multiple myeloma

CHENYun-feng，GELiang,SHENJian-jiang.

(DepartmentofClinicalLaboratory,JiangsuProvinceHospitalofTraditionalChineseMedicine,Nanjing210029,China)

Objective To investigate the application of immunofixation electrophoresis (IFE) and immunoglobulin quantitative in diagnosis and clinical typing of multiple myeloma(MM)．Methods 87 MM patients are detected serum protein electrophoresis,IFE and immunoturbidimetry.Results Among 87 cases of MM patients,77 cases for serum protein electrophoresis test were M protein,the positive of rate was 88.5%.IFE test for all 87cases were positive.Moreover，In cases of 87 MM patients,there were 29 cases of IgGκ,22 IgG λ,10 IgAκ,12 IgAλ,4 IgMκ,3 IgMλ,2 κ light chain and 5 λ light chain.Furthermore,corresponding type of immunoglobulin and light chain increased,accompanying with other type of immunoglobulin decreased.Conclusion IFE has important value on clinical application in diagnosing and clinical typing of MM.

Multiple myeloma；Serum protein electrophoresis；Immunofixation electrophoresis；Immunoglobulin

1007-4287(2016)11-1881-03

R446.62

A

陈云峰(1972-)，女，副主任技师，主要从事临床免疫学检验。

2016-01-19)