三明市某规模化猪场几种疫病的检测情况与分析

邱位木 陈小丽 吴德喜 李宝兰

福建省三明市农业局福建三明365001

三明市某规模化猪场几种疫病的检测情况与分析

邱位木 陈小丽 吴德喜 李宝兰

福建省三明市农业局福建三明365001

通过对三明市某大型猪场进行猪瘟、普通蓝耳病、高致病性蓝耳病、伪狂犬病的病原学和血清学检测，以更好地了解这些疫病在猪场的流行情况，为猪场这几种疫病的防控和净化奠定基础。本次调查分别检测45份后备母猪血清、92份生产母猪血清、13份生产公猪血清，共计150份血清，150份扁桃体样品。通过ELISA方法分别检测了猪瘟、普通蓝耳病、伪狂犬病gE和伪狂犬病gB。荧光定量PCR方法检测了猪瘟、高致病性蓝耳病。结果猪瘟和高致病性蓝耳病病原学阳性率分别为8%和5.3%。一个月后对病原学检测阳性猪采样复查，结果猪瘟阳性率4.6%，高致病性蓝耳病阳性率2.6%。猪瘟免疫抗体合格率93.3%，普通蓝耳病免疫抗体合格率96%，伪狂犬病gB免疫抗体合格率100%，伪狂犬病gE感染抗体2%。生产母猪胎次越多，猪瘟和普通蓝耳病的免疫抗体水平越高。

ELISA荧光定量PCR猪瘟普通猪蓝耳病高致病性猪蓝耳病伪狂犬病

随着畜牧业的快速发展，养殖基数越来越大，散养和规模养殖并存，给疫病防控造成很大的难度。尤其是近年来规模化猪场出现了多种疫病混合感染，病毒的变异、临床的非典型化等更是加剧了猪的繁殖系统、消化系统、呼吸系统疾病，给养猪生产带来了巨大的经济损失[1]。目前我国的动物疫病防控主要还是通过疫苗免疫，虽然能有效控制一些重大动物疫病，但并不能消灭或者根除动物疫病[2]。因此，净化是消灭或根除动物疫病的一种重要方式。在一个养殖场或者区域通过检疫、淘汰阳性动物、培育健康动物并与生物安全隔离区建设相结合的方式，达到净化疫病的目的[3]。种用动物是养殖的源头，一旦种用动物携带病原，就会通过引种大面积传播病毒。所以，净化工作的重中之重就是种用动物的净化。

三明市农业局动物疫控中心兽医实验室对某规模猪场做了几个病种的检测，初步了解某规模种猪场猪瘟、普通蓝耳病、高致病性蓝耳病、伪狂犬病的疫苗免疫效果、感染抗体存在情况和病毒核酸存在情况，为该场今后的防疫和净化工作提供科学数据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要仪器设备酶标仪（瑞士SUNRISE），移液器eppendorf（0.1～2.5 μL、10～100 μL、100～1000 μL），冰箱（海尔）；恒温培养箱（广东韶关科力试验仪器公司DNP-9162A）；生物安全柜（美国Labconco），高速冷冻离心机（德国Sigma），组织研磨仪、荧光定量PCR仪（德国凯杰）等。

1.1.2 试剂盒猪瘟、普通蓝耳病、伪狂犬病gE、伪狂犬病gB抗体检测试剂盒均为美国IDEXX ELISA试剂盒。猪瘟、高致病性蓝耳病、普通蓝耳病病原检测试剂盒均为深圳匹基荧光定量PCR试剂盒。

IDEXX试剂盒置4℃冰箱保存，匹基试剂盒置冷冻冰箱保存。

1.2 方法

1.2.1 血清样品制备通过耳缘静脉分别随机采集生产母猪、后备母猪、生产公猪的全血5 mL，其中后备母猪45头、生产母猪92头、生产公猪13头，共150份猪全血。静置2 h以上，待血液凝固析出血清，即可离心出血清备用。

1.2.2 免疫情况与疫苗类型该规模场采取自繁自养的养殖方式，养殖场设施设备齐全，防疫管理规范，有合适本场的免疫程序。猪瘟疫苗是从普莱柯生物工程股份有限公司自购的细胞源苗，猪蓝耳病疫苗是从美国勃林格自购的经典猪蓝耳病活疫苗，猪伪狂犬病疫苗是从美国勃林格自购的gE基因缺失疫苗。

1.2.3 试验方法血清抗体均采用间接ELISA抗体检测试剂盒进行检测，病原均采用荧光定量PCR检测试剂盒进行检测。检测操作与结果判定严格按照试剂盒的使用说明书进行。

2 结果与分析

2.1 猪瘟检测结果猪瘟检测结果显示（见表1），各类种猪猪瘟平均免疫抗体合格率为93.3%，其中公猪的合格率为92.3%，后备母猪为93.3%，生产母猪为93.4%，均达到较高水平。猪瘟病原荧光定量PCR第一次采样检测阳性率为8%，一个月后对病原检测阳性猪重新采样复查，发现阳性率降低至4.6%。

2.2 蓝耳病检测结果猪普通蓝耳病免疫抗体检测结果显示（见表2），各类种猪普通蓝耳病平均免疫抗体合格率为96%，其中公猪的合格率为100%，生产母猪为95.6%，后备母猪为95.5%，均达到较高水平。高致病性蓝耳病病原荧光定量PCR第一次采样检测阳性率5.3%，一个月后对病原检测阳性猪重新采样复查，发现阳性率下降到2.6%。

2.3 伪狂犬病检测结果猪伪狂犬病检测结果显示（见表3），各类种猪伪狂犬病gB免疫抗体合格率均为100%。各类种猪伪狂犬病gE平均感染抗体2%，其中公猪感染率为0、生产母猪感染率为2.2%、后备母猪的感染率为2.2%。

表1 猪瘟检测结果

表2 蓝耳病检测结果

表3 伪狂犬病检测结果

2.4 母猪胎次与几种疫病抗体的关系从表4可见，4胎以上母猪的免疫抗体合格率都是100%，1～3胎母猪的免疫抗体水平，随着胎次的增加抗体水平也越来越高，1胎母猪的猪瘟和普通蓝耳病免疫抗体水平都是75%，合格率偏低，2胎母猪的猪瘟和普通蓝耳病免疫抗体水平达到83%和91.7%，合格率达到一个相对理想的水平，3胎母猪的猪瘟和普通蓝耳病免疫抗体水平达到93.7%和96.8%，合格率已经达到一个较高的水平。母猪的生产胎次对免疫抗体有着相关的影响，母猪生产胎次越多，猪瘟和

普通蓝耳病的免疫抗体也就越高。

表4 母猪胎次与几种疫病抗体的关系

3 讨论

从以上检测数据分析，该猪场猪瘟、普通蓝耳病、伪狂犬病gB免疫抗体水平都达到90%以上，说明疫苗的免疫效果好，猪群对这几种病有着比较强的防御力。伪狂犬病gE感染抗体为2%，表明该猪场存在伪狂犬病野毒感染但是感染率不高，要对该猪场进行伪狂犬病净化可行性高且难度不大。猪瘟和高致病性蓝耳病的病原荧光定量PCR检测，第一次采样检测结果和一个月后第二次采样复查结果不一致，可能是因为猪瘟与高致病性蓝耳病疫苗均为活疫苗，第一次采样距疫苗注射时间不到10 d，有部分是疫苗毒核酸被检出。第二次采样是在一个月后，再次对样品进行病原检测，过滤掉部分疫苗毒阳性数，从第二次检测结果看，猪瘟病毒核酸阳性率为4.6%、高致病性蓝耳病病毒核酸阳性率为2.6%，猪瘟和高致病性蓝耳病存在野毒感染情况，但从全省农业部上报系统的历年统计数据来看，该猪场的猪瘟和高致病性蓝耳病的病原阳性率均低于全省平均阳性率，猪场应该及时淘汰感染猪只，及时消灭隐性的感染源。

动物疫病净化狭义上讲就是在一个养殖场，通过检测的手段对一系列动物疫病进行检测，发现带病或疑似带病动物及时进行淘汰[4]。三明市近五年的净化工作跟农业部和省农业厅对接，就是要从原种场、大型规模场开始逐步扩大到所有养殖场，消灭或根除动物疫病，从而带动养殖场提升管理水平、改善生物安全环境、提高动物疫病防控能力，增加养殖场及其产品竞争力，有力促进产品质量安全、公共卫生安全和养殖业安全，为三明市畜牧业健康发展、农民生产增效保驾护航。

[1]管亮,华耀,施雷,等.种猪群猪圆环病毒病的净化技术研究[J].动物医学进展,2015(7)：61-66.

[2]刘源.共谱动物疫病新篇章[J].中国畜牧业,2015(18)：18-19.

[3]姚明霞,恽建伟.小型规模猪场疫病防控要点[J].中国畜牧兽医文摘,2011(5)：130.

[4]陈国顺.小型商品猪场的疫病防治[J].福建畜牧兽医, 2011,33(3)：56-57.

The monitor and analysis of the swine diseases in the large scale swine farm in Sanming city

Qiu Weimu Chen Xiaoli Wu Dexi Li Baolan
(Agricultural Bureau of Sanming City,Fujian 365001)

In order to know well about the epidemic status of the swine diseases in the large scale swine farm and give the fundament for the prevention and purification of these swine diseases,the certain tissue and the serum of the swine were detected by using the ELISA and the fluorescence ration PCR,the study referred to the swine fever,porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS), high pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome and pseudorabies.The samples that were used for tests separately from the 45 replacement gilt serums,92 sow serums,13 boar serums and the 150 tonsils.The swine fever,porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS)and pseudorabies were studied by using ELISA,the swine fever and high pathogenic PRRS were studied by using fluorescence ration PCR.The result showed∶the pathogen positive rate of the swine fever and the high pathogenic PRRS is separately 8%and 5.3%,the positive swine were detected again one month later,the pathogen positive rate of the swine fever and the high pathogenic PRRS is separately 4.6%and 2.6%.The percent of pass about the swine fever,the PRRS,and pseudorabies gB immune antibody was separately 93.3%,96%,and 100%,the infection antibody of the pseudorabies gE was 2%.The more parities the sows have,the higher level of the immune antibody about the swine fever and the PRRS was.

ELISA Fluorescence ration PCR Swine fever Porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS)High pathogenic PRRS Pseudorabies

A

1003-4331（2016）06-0014-03