消渴痹通胶囊对糖尿病周围神经病变大鼠血清MDA、SOD的影响※

米佳 王国强 侯宁 刘励文 王萌萌 王秀阁*

消渴痹通胶囊对糖尿病周围神经病变大鼠血清MDA、SOD的影响※

米佳1王国强1侯宁2刘励文2王萌萌2王秀阁1*

（1长春中医药大学附属医院内分泌科，长春130021；2长春中医药大学研究生学院，长春130000）

目的观察消渴痹通胶囊对糖尿病周围神经病变（DPN）大鼠血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的影响。方法将60只雄性SD糖尿病大鼠高脂饲料喂养4周后注射链脲佐菌素，造模成糖尿病模型的大鼠，再维持高糖状态2个月造成糖尿病周围神经病变的模型。随机分为模型组、硫辛酸胶囊组、消渴痹通胶囊组3组，每组各20只。另选取健康雄性SD大鼠10只为正常对照组。消渴痹通胶囊组0.26 g/(kg·d)灌胃给药，硫辛酸胶囊组按照0.042 g/(kg·d)灌胃给药，模型组和空白组灌服同体积10 mL·kg-1的生理盐水，每天给药1次，连续给药12周。观察各组大鼠的血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的变化。结果在治疗12周末，与模型组比较，治疗组血清SOD活性明显升高（P＜0.05）、MDA含量明显降低（P＜0.05），其中以消渴痹通胶囊组效果最佳。结论消渴痹通胶囊能提高DPN大鼠SOD活性，降低MDA含量，提示抗氧化机制可能是消渴痹通防治DPN的机制之一。

糖尿病周围神经病变；消渴痹通胶囊；MDA；SOD；抗氧化；消渴；痹证

近年来，全球范围内糖尿病（diabetes mellitus，DM）患病率不断迅猛增长。糖尿病患者持续的高血糖状态，随着病程的增加，其慢性并发症发病率也逐步上升[1]。有研究表明，约70%的DM患者可能出现糖尿病周围神经损害[2]。糖尿病周围神经病变发生机制复杂，其中包括氧化应激、多元醇通路激活、糖基化终末产物、蛋白激酶途径激活、神经营养因子缺乏、神经微血管病变等假说，很难用单一机制阐明。作为目前研究的热点，氧化应激不仅可能直接造成神经元及神经细胞损伤，也可以参与其他如糖脂代谢紊乱、微血管病变等不同发病机制中[3]。针对此发病机制，现代医学一般应用酶类和非酶类抗氧化剂进行抗氧化治疗。但由于人体氧化应激机制复杂，单纯应用降糖、抗氧化药物的临床疗效并不理想。祖国医学在整体观念、辨证论治的基础上，发挥中药多靶点、多途径的综合作用，取得了较为满意的疗效。此次动物实验旨在结合中医古今文献，在已有的前期研究基础上[4-5]，进一步深入探讨消渴痹通胶囊对DPN大鼠氧化应激的影响，探讨消渴痹通胶囊可能的作用机制，并为临床应用提供新的思路和方法。

1 材料与方法

1材料

1.1.1 实验动物SPF级4周龄健康雄性SD大鼠，共70只，

体重180～220 g，分笼饲养，室温（20±2）℃，相对湿度50%~60%，通风良好，室内12 h明暗自动切换，自由摄食、饮水。

1.1.2 药物与试剂消渴痹通胶囊，长春中医药大学附属医院制剂室提供；硫辛酸胶囊：江苏万禾制药有限公司（批号H20100158）；超氧化物歧化酶试剂盒、丙二醛测定试剂盒，南京建成生物工程研究所提供。

1.2 实验性动物模型的制作将大鼠适应性喂养1周后，随机选取60只开始高脂饲料喂养，喂养4周后禁食不禁水12 h后，将链脲佐菌素用新鲜配置的0.1 mmol/L柠檬酸钠缓冲液避光操作中配制成1%浓度的溶液，按40 mg/kg腹腔一次性注射，72 h后取尾静脉血测血糖，血糖≥16.7 mmol/L即为糖尿病大鼠模型建造成功，建成糖尿病大鼠模型后继续维持高脂饲料饲养8周后造成DPN模型[6]。成膜后维持高脂饲料喂养，直至处死。

1.3 分组及给药方法将造模成功的DPN大鼠随机分组模型组、硫辛酸胶囊组、消渴痹通胶囊组3组，每组20只。另外10只SD大鼠为正常对照组。将硫辛酸胶囊及消渴痹通胶囊分别配置成混悬液，造模成功后，消渴痹通胶囊使用时按照0.26 g/(kg·d)体重灌胃，硫辛酸胶囊灌胃时给药剂量为0.042 g/(kg·d)。模型组和空白组灌服同体积10 mL·kg-1的生理盐水。各组大鼠均连续灌胃12周，每日1次。用药治疗期间正常对照组大鼠饲以普通饲料，其他组饲以高脂饲料，自由进食、饮水，每周称重，根据体重调整灌胃剂量。

1.4 标本采集在灌胃给药12周后，所有大鼠尾静脉取血，以自动血糖仪检测血糖。电子秤称取每只大鼠体重，禁食、禁水12 h后，经内眦于眶后静脉丛取血，分装不同试管中，4℃保存备检，以检测血清SOD、MDA水平。

2 结果

2.1 血清MDA的检测在治疗第12周末，模型组、硫辛酸胶囊组、消渴痹通胶囊组大鼠MDA的表达明显高于正常对照组（P<0.01）。硫辛酸胶囊组和消渴痹通胶囊组与模型组相比均明显降低（P<0.01，P<0.05），说明消渴痹通胶囊和硫辛酸胶囊均有降低大鼠MDA表达的作用，且消渴痹通胶囊组优于硫辛酸胶囊组（P<0.05）（见表1）。

2.2 血清SOD的检测在治疗第12周末，模型组、硫辛酸组、消渴痹通胶囊组大鼠SOD的表达明显低于正常对照组（P<0.01）。硫辛酸胶囊组和消渴痹通胶囊组与模型组相比均明显升高（P<0.01，P<0.05），说明消渴痹通胶囊和硫辛酸胶囊均有升高大鼠SOD表达的作用，且消渴痹通胶囊组优于硫辛酸胶囊组（P<0.05）（见表1）。

表1 各组大鼠血清MDA、SOD的表达变化（±s，μmol/l）

表1 各组大鼠血清MDA、SOD的表达变化（±s，μmol/l）

注：与正常组相比*P＜0.01；与模型组相比△P＜0.01，△△P＜0.05；与硫辛酸组相比＃＃P＜0.05

组别M D A S O D正常对照组模型组消渴痹通组硫辛酸组3 . 9 9 ± 0 . 3 2 8 . 6 7 ± 0 . 8 3*5 . 7 4 ± 0 . 2 9*△＃＃6 . 3 6 ± 0 . 3 1*△△6 8 . 3 5 ± 4 . 3 3 4 4 . 2 9 ± 2 . 3 5*5 5 . 1 8 ± 3 . 4 3*△＃＃4 9 . 8 5 ± 2 . 5 3*△△

3 讨论

祖国医学认为，糖尿病周围神经病变可由气阴两虚，络脉瘀阻而致。消渴日久，耗气伤阴，气血阴阳亏虚，血行不畅，瘀血内生，阻于络脉，即因虚致瘀，本虚标实。以“益气活血，化瘀通络”立法的消渴痹通胶囊由黄芪、桂枝、鸡血藤、豨莶草、全蝎等组成。方中黄芪，又称为“补药之长”，本病“虚”为本，故重用为君，补益经络之气，达到气旺行血，血行瘀去络通的目的。本病中病机中的“实”为血瘀络痹，故同时，方中辅用活血、通络药物以袪“标”之实邪。《本草便读》有记载：“凡藤类之属皆可通经入络”。本方配伍鸡血藤，药达病络，在活血祛瘀的同时兼具养血的效果，祛邪不伤正。豨莶草，以通经活络见长，与鸡血藤同用，用于筋脉瘀阻，肢体麻木之症[7]，二药合为臣药。牛膝能够强筋骨，袪恶血，以助鸡血藤药力。威灵仙，性猛急，走而不守，宣通十二经络，无论上下皆可用。全蝎，通络止痛。桂枝，则温通经脉，故以上4种共为佐使药。全方配伍特点：补气药与活血药相伍，兼之辅以通络药，合而用之，补气、袪瘀、通络三法并行，标本兼顾，达到气旺、瘀消、络通，诸证自愈的目的。且三法相合，使补而不壅滞，络脉调达，活血又不伤正。实验结果表明，与正常对照组相比，糖尿病周围神经病变大鼠的血清MDA水平明显升高，血清SOD水平明显降低。消渴痹通胶囊在一定程度上能抑制糖尿病周围神经病变大鼠血清MDA的表达，同时升高血清SOD水平，提示抗氧化机制可能是消渴痹通防治糖尿病周围神经病变的作用机制之一，这为我们以后开展中药复方有效物质的研究提供了思路。

[1]NaitoR，Tohda C.Characterization of anti-neurodegenerative effects of polygala tenifllia in A β(23-35)-treated cortical neurons[J].Biol Pharm Bull，2006，29（9）:1892-1896.

[2]Maritim AC，Sanders RA，Watkins JB.Diabetes，oxidative stress，and antioxidants:a review[J].J Biochem Mol Toxicol，2003，17(1):24-38.

[3]屈岭，梁晓春.糖尿病周围神经病变与氧化应激关系的研究现状[J].中国中西医结合杂志，2007（8）:764-768.

[4]王秀阁，姜喆，朴春丽.内外合治糖尿病下肢血管病变90例临床观察[J].中国中医药科技，2008，15(4):307.

[5]韩辅，何银山，张文龙，等.消渴痹通治疗糖尿病周围神经病变临床疗效观察[J].中外健康文摘，2013，5(13):161-162.

[6]潘晓燕，郑景晨，龚小花，等.α-硫辛酸对糖尿病周围神经病变氧化应激和内皮功能的影响[J].中国糖尿病杂志，2009，17(5):372-373.

[7]谢海洲.鸡血藤既可养血又可通络[J].中医杂志，2003（10）:729-730.

Effect of Xiaoke Bitong Capsule on MDA and SOD in Diabetic Peripheral Neuropathy Rats

MI Jia1,WANG Guoqiang1,HOU Ning2,LIU Liwen2,WANG Mengmeng2,WANG Xiuge1*
(1.Department of Endocrinology,the Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine,Changchun 130021,China; 2.Graduate School,Changchun University of Traditional Chinese Medicine,Changchun 130000,China)

Objective To investigate the effect of Xiaoke Bitong capsule on MDA and SOD in diabetic peripheral neuropathy rats. Methods The sixty male SD rats were made to be the diabetes rats with injecting streptozotocin for one-time after feeding with highfat and high-carbohydrate diet for 4 weeks.Then,those rats were made to be diabetic peripheral neuropathy Rats by feeding with high-fat and high-carbohydrate diet for 2 months.The sixty diabetic peripheral neuropathy rats were randomly divided into the model group,the thioctic acid capsules group and the Xiaoke Bitong group.There were 20 rats in each group.A normal control group was also set up by male SD rats which were feeding of normal diet.The Xiaoke Bitong group and the thioctic acid capsules group were given Xiaoke Bitong decoction 0.26g/(kg·d)and thioctic acid capsules suspension 0.042g/(kg·d)gavage respectively,while the normal group and the model group were given the same amount of normal saline.After twelve weeks,levels were compared between each group.Results Comparing with the model group,levels of SOD significantly increased(P<0.05),levels of MDA significantly decreased(P<0.05),but the Xiaoke Bitong group was better than the thioctic acid capsules group.Conclusion Xiaoke Bitong capsule can improve the activity of SOD,and also can decreased the level of MDA.It suggests that the antioxidant mechanism may be one of the mechanisms of Xiaoke Bitong capsule in the prevention and treatment of diabetic peripheral neuropathy.

Xiaoke Bitong capsule;diabetic peripheral neuropathy;MDA;SOD;antioxidant;consumptive thirst;bi syndrome

10.3969/j.issn.1672-2779.2016.22.062

1672-2779（2016）-22-0137-02

：李海燕本文校对：陈曦

2016-06-17）

国家中医药管理局全国名老中医药专家传承工作室项目；吉林省中医药管理局课题（No：2014-Q1）；吉林省卫生计生委课题（No：2014z096）

＊通讯作者：362730191@qq.com