维药小枝玫瑰花中没食子酸含量测定

姜君君， 郭玉婷， 施 洋， 郝宇薇， 刘婧怡， 兰 卫

(1新疆医科大学中医学院, 乌鲁木齐 830011； 2乌鲁木齐市第四人民医院, 乌鲁木齐 830002； 3新疆医科大学对口协作办公室；4新疆医科大学学报编辑部, 乌鲁木齐 830011)



维药小枝玫瑰花中没食子酸含量测定

姜君君1,2， 郭玉婷3， 施 洋4， 郝宇薇1， 刘婧怡1， 兰 卫1

(1新疆医科大学中医学院, 乌鲁木齐 830011；2乌鲁木齐市第四人民医院, 乌鲁木齐 830002；3新疆医科大学对口协作办公室；4新疆医科大学学报编辑部, 乌鲁木齐 830011)

目的 建立测定维药小枝玫瑰花中没食子酸含量的方法。方法 采用反相高效液相色谱法，色谱柱大连伊力特SinoChrom ODS-BP(250 mm×4.6 mm，5 μm)，以甲醇-0.3%磷酸(6∶94)为流动相，检测波长272 nm。结果 没食子酸质量浓度在5.05～101.00 μg/mL范围内峰面积线性关系良好(r=0.999 9)，平均回收率为100.15%(RSD=1.39%)，小枝玫瑰花中没食子酸含量为0.491 7 mg/g。结论 该方法简便、准确，重复性好，可用测定小枝玫瑰花中没食子酸的含量。

小枝玫瑰； 没食子酸； 含量测定

小枝玫瑰花为蔷薇科植物玫瑰花(Rosa rugosa Thunb.)亚种(branchlets Rosa rugosa Thunb.)的干燥花蕾[1]，主要分布在新疆南疆地区，其中以和田地区最多，维药名为克孜力古丽，味甘、微苦，性温，归肝、脾经。研究表明，玫瑰花提取物具有抗病毒[2]、抗氧化[3-4]、抗肿瘤[5]、抑制中枢神经[6]、扩血管、保护心肌[7-8]、降血糖[9-11]等作用。近年来，因玫瑰花治疗糖尿病疗效确切、安全无毒而引起广大学者的高度重视。本研究采用反相高效液相色谱法测定维药小枝玫瑰中没食子酸的含量，为制订小枝玫瑰质量标准提供参考依据，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器 高效液相色谱仪(岛津LC-6AD双泵，SPD-20A紫外检测器，SIL-20A,柱温箱CTO-10ASVP，CBM-20A，Lcsolution分析系统)，ME204E电子分析天平(METTLER TOLEDO)。

1.2 试药 没食子酸对照品(金测分析技术有限公司，批号：00007040-226)，玫瑰花由新疆和田阳光沙漠玫瑰有限公司提供，批号：20150615，经新疆医科大学中医学院中药资源教研室主任盛萍教授鉴定为小枝玫瑰(branchlets Rosa rugosa Thunb)的干燥花蕾。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：大连伊力特SinoChrom ODS-BP色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相：甲醇-0.3%磷酸溶液(6∶94)，流速：1.0 mL/min，检测波长：272 nm，柱温：25℃，进样量：对照品10 μL，供试品20 μL，见图1、2。

图1对照品HPLC色谱图

图2 样品HPLC色谱图(1没食子酸)

2.2 对照品储备液的制备 精密称取没食子酸对照品10.1 mg，置100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1 mL含没食子酸101 μg的溶液,备用。

2.3 供试品溶液的制备 称取玫瑰花0.420 6 g置具塞锥形瓶中，加入70%甲醇50 mL，超声提取(25℃,频率100%)30 min，称定重量并补足至50 mL，摇匀滤过，取滤液即得。

2.4 标准曲线的制备 分别精密量取对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、5.0、10.0 mL置10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，按“2.1”项下色谱条件测定，峰面积分别为186 094、336 192、681 668、998 995、1 662 007、3 307 239，以峰积分面积(Y)对浓度(X)进行线性回归。得回归方程为：Y=32 582.34X+16 156.67，r=0.999 9，没食子酸浓度在5.05～101.00 μg/mL的范围内线性关系良好。

2.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液10 μL，在上述色谱条件下连续进样6次，理论塔板数按没食子酸峰计算不低于7 300，没食子酸峰与相邻峰分离度大于1.5，拖尾因子在0.95～1.05间，测定峰面积分别为3 310 574、3 312 723、3 294 154、3 261 022、3 259 336、3 261 964，仪器精密度以没食子酸计算,RSD=0.35%(n=6)，表明精密度良好。

2.6 稳定性试验 取供试品溶液于制备后0、2、4、7、14、24 h进样，测定峰面积分别为1 089 964、1 099 772、1 125 889、1 118 438、1 187 820、1 130 697、1 128 716，峰面积RSD=1.51%(n=6)，表明供试品溶液24 h内稳定。

2.7 重复性试验 称取样品6份，按“2.3”项下方法平行制备供试品试液，按“2.1”项下色谱条件进样分析，测得峰面积分别为1 359 266、1 351 423、1 328 505、1 372 644、1 366 370、1 385 147，平均值为1 360 559， RSD=1.43%(n=6)。

2.8 回收率试验 称取已知含量的玫瑰花粉末5份，每份0.200 g，精密称定，分别加入没食子酸储备液3 mL，按“2.3”项下方法操作，并进样分析，计算回收率，结果平均回收率为100.15%,RSD=1.39%,见表1。

表1 回收率实验结果

2.9 含量测定 称取样品6份，按“2.3”项下方法平行制备供试品试液，按“2.1”项下色谱条件进样分析，测得峰面积分别为1 378 375、1 322 314、1 376 713、1 364 436、1 374 179、1 367 338，平均值为1 363 892，计算得没食子酸含量为4.917 mg/g,RSD=1.55%(n=6)。

3 讨论

新疆和田小枝玫瑰现多作为花茶饮用或作玫瑰花酱食用，在维吾尔医药中也有使用，根据维吾尔医药理论性平，主治胆液质性疾病。维药小枝玫瑰由于未列入国家药典，其应用范围受限，玫瑰花口服液和玫瑰花糖膏均已列入《中华人民共和国卫生部药品标准》，该标准收录的多个以小枝玫瑰为原料制剂，但标准中没有对小枝玫瑰中有效成分含量测定提出要求[12]。本研究采用反相高效液相色谱法测定维药小枝玫瑰中没食子酸的含量，方法简便、准确,重复性好，可用于小枝玫瑰花中没食子酸的含量测定。

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[5] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(上册)[M].上海:上海科技出版社,1996:791.

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[11] 郭玉婷,兰卫,田思敏,等.新疆小枝玫瑰降糖作用及机制研究[J].新疆医科大学学报,2015,38(4):452-454.

[12] 中华人民共和国卫生部药典委员会编.中华人民共和国卫生部药品标准(维吾尔药分册)[S].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社,1999:152-153.

(本文编辑 施洋)

Determination of gallic acid content in the Uyghur Medicine branchlets roses

JIANG Junjun1,2, GUOY uting3, SHI Yang4, HAO Yuwei1, LIU Jingyi1, LAN Wei1

(1XinjiangMedicalUniversityInstituteofTCM,Urumqi830011,China；2TheFourthPeopleHospitalofUrumqi，Urumqi830002,China；3CounterpartCooperationOfficeofXinjiangMedicalUniversity；4EditorialDepartmentofJournal,XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830011,China)

Objective Determination of gallic acid in Uyghur branchlets roses. Methods RP-HPLC was adopted, SinoChrom ODS-BP chromatographic column (4.6×250 mm, 5 μm) was from Dalian Yilite, the mobile phase was methanol -0.3% phosphoric acid (6:94), and the detection wavelength was 272 nm. Results There was a good linear relationship of Gallic acid within the range of 5.05～101 μg/mL (r=0.999 9), and the average recovery rate was 100.15% (RSD=1.39%). The content of gallic acid in branchlets roses was 0.491 7%. Conclusion The method is simple, accurate and reproducible, and can be used to measure the content of the gallic acid in Uyghur branchlets roses.

branchlets roses; gallic acid; determination of content

新疆维吾尔自治区中小企业技术创新基金(201253217)

姜君君(1982-)，女，本科，主管药师，研究方向：药学研究。

兰 卫，男，教授，硕士生导师，研究方向：中维药研究，E-mail：lanwei516@sina.com。

R914

A

1009-5551(2016)12-1563-03

10.3969/j.issn.1009-5551.2016.12.019

2016-8-15]