新疆苜蓿根际寄生线虫种类研究

曹雪松，杨亚鹏，杨华，董艳秋，李克梅

(1. 新疆农业大学农学院，乌鲁木齐 830052；2. 新疆农业科学院植物保护研究所，乌鲁木齐 830091)



新疆苜蓿根际寄生线虫种类研究

曹雪松1，杨亚鹏1，杨华2，董艳秋1，李克梅1

(1. 新疆农业大学农学院，乌鲁木齐 830052；2. 新疆农业科学院植物保护研究所，乌鲁木齐 830091)

【目的】调查新疆苜蓿根际寄生线虫种类，明确寄生线虫种类和优势种群，为评价寄生线虫危害苜蓿提供依据。【方法】从新疆19个地区的苜蓿种植地采集493份苜蓿根围土壤，采用浅盘法分离其中的线虫，根据线虫形态结合文献鉴定线虫种类。【结果】共分离鉴定得到 7 属9种植物线虫。【结论】总体而言，目前新疆苜蓿根际寄生虫种类不多，数量相对较少，其中真滑刃属线虫、滑刃属线虫、螺旋属线虫是优势种群，未发现根结线虫。

苜蓿；寄生线虫；根际；鉴定

0 引 言

【研究意义】新疆作为畜牧大省，主要的人工牧草是苜蓿，苜蓿的重要特点是产量高、品质优，是新疆发展畜牧产业的重要基础[1]。苜蓿同其他农作物一样，在生长过程中，常常遭致各种病原生物侵染危害，导致苜蓿产量降低、品质下降，种植年限缩短。目前国内对苜蓿病害的研究主要集中在真菌病害、细菌病害、病毒病害方面[2]，而对因线虫引起的苜蓿病害鲜见报道。至2011年我国苜蓿种植面积达到377.5×104hm2[3]，掌握苜蓿寄生线虫种类，对正确评价苜蓿线虫病害的危害有重要意义。【前人研究进展】致苜蓿病害的病原生物包括传统的真菌、细菌、病毒、线虫和寄生性种子植物，其中最主要的是真菌，我国已发现36种病原真菌危害苜蓿[4]，已报道新疆有苜蓿病害24种，病原35种[5]。据国外报道，植物线虫是一种危害广泛的病原，已知危害牧草的寄生性线虫有250种以上[6]，其中严重危害苜蓿的寄生性线虫主要有苜蓿茎线虫(DitylenchusmedicaginisWasilewska，1965)[7]和根结线虫(Meloidogyne)[8]。我国宝音温都苏[9]报道在内蒙古苜蓿寄生线虫有8个属，但未鉴定到种。其他地区尚未见苜蓿寄生线虫的报道。【本研究切入点】目前新疆地区未见关于苜蓿线虫病害的报道，研究拟对新疆苜蓿根际寄生线虫开展调查。【拟解决的关键问题】准确鉴定新疆苜蓿根际寄生线虫的种类并掌握其分布。明确寄生线虫种类和优势种群，为评价寄生线虫危害苜蓿提供依据。

1 材料与方法

1.1 材 料

根围土壤样本均采自新疆地区各苜蓿种植地。2014年6月至2015年10月在新疆各地州、市、团场苜蓿地采用对角线五点采样法[10]随机选取紫花苜蓿植株采集根围土壤样本。采集时，先用铁锹铲去比较干燥的2～3 cm表层土，再取苜蓿根围0～30 cm深度的土壤约500 g，装入自封袋中，作为一个样本，标记后带回实验室，取200 g土样及时分离其中的线虫或置4℃冰箱保存。

1.2 方 法

1.2.1 线虫分离、杀死与固定

采用浅盘法分离土壤中的线虫。继而将线虫悬浮液放入60～65℃的水浴锅中2～3 min温和热杀死，将杀死后的线虫用FG固定液(福尔马林∶甘油∶蒸馏水=10∶1∶89)固定后放入1.5 mL的离心管中进行保存，待鉴定[11]。

1.2.2 线虫的形态观察和鉴定

将已固定的线虫制成临时玻片，在解剖镜及光学显微镜下逐条进行形态观察、描述及鉴定指标的数据测量。形态测计采用De Man公式[12]。根据谢晖等[13]、刘维志[14]分类系统进行分类，同时参照Siddiqi[15]和Fortuner[16]分类系统鉴定种类。

2 结果与分析

2.1 新疆苜蓿根际寄生线虫种类

从新疆各地的苜蓿种植区域采取土样493份，共分离鉴定出7属9种植物线虫，分别为：丝尾垫刃线虫属(Filenchus)、平滑垫刃属(Psilenchus)、新平滑垫刃属(Neopsilenchus)、茎线虫属(Ditylenchus)、螺旋属(Helicotylenchus)、真滑刃属(Aphelenchus)、滑刃属(Aphelenchoides)；普通丝尾垫刃线虫[Filenchusvulgaris(Brzeski，1963)Lowmsbery et Lownsbery，1983]、活泼平滑垫刃线虫(Psilenchushilarulusde Man，1921)、食菌茎线虫(DitylenchusmyceliophagusGoodey，1958)、燕麦真滑刃线虫(AphelenchusavenaeBastian，1865 )、孤独真滑刃线虫(AphelenchuseremitusThoren，1961)、同形真滑刃线虫[AphelenchusisomerusAnderson & Hooper，1980(Ebsary，1991)]、帕拉莫诺夫真滑刃线虫(AphelenchusparamonoviNesterov & Lisetskaya，1965)、林伯滑刃线虫(AphelenchiodeslimberiSteiner，1936)、蘑菇滑刃线虫(AphelenchiodescomposticolaFranklin，1957)。

2.2 新疆苜蓿寄生线虫的优势种群

在新疆苜蓿各类寄生线虫中，真滑刃属线虫占绝对优势，达总数的53.04%，其次是螺旋属占总数的23.82%，而滑刃属则相对出现几率小，仅9.63%，其他类群则差别不大。表1

2.3 新疆苜蓿寄生线虫的分布

真滑刃属、螺旋属线虫分布最广，几乎在每个采集地均有发现，其次为滑刃属线虫。其他鉴定出的线虫分布主要集中在呼图壁县及塔城地区。同时发现南疆地区苜蓿寄生线虫种类、数量较少，仅发现真滑刃属线虫，这可能与南疆地区干旱的气候及土质有关。表2

表1 不同属种线虫检出频次及百分数

表2 新疆苜蓿根际寄生线虫分布

3 讨 论

线虫动物门是动物界中最大的门之一，其中，有许多种类是寄生植物的，这些线虫称为植物线虫[17]。植物寄生线虫直接危害各种农林经济作物，除自身对植物构成危害之外，还常与其周围的一些病原细菌、真菌和病毒共同侵染，引起“复合侵染”，有些线虫还是病毒传播的介体，使其危害更重，同时植物寄生线虫也是制约植物及其产品进出口的主要有害生物[10]。新疆已有报道根结线虫严重危害设施黄瓜和番茄[18]，甘薯茎线虫严重影响沙湾地区的甘薯种植[19]，大豆孢囊线虫亦威胁新疆大豆生产[20]。

研究从各采样地区苜蓿根际寄生线虫的检测结果来看，线虫种类和数量均不多，且很多样品中未能分出线虫。且在北疆分布较广泛，南疆地区鉴定种类相对较少，这可能与南疆夏季高温、长途运输导致南疆样品中线虫存活率低有关。因此，应进一步加强南疆地区苜蓿根际线虫的研究。

在已鉴定的寄生线虫中，真滑刃属线虫占绝对的优势，其次是螺旋属和滑刃属，其他类群检出率低，差别不大。这些线虫均为植物根际常见寄生线虫，且数量不多，尚不足以对苜蓿生长造成危害。但也不排除苜蓿根系深，而采样深度仅局限在0～30 cm根际土壤，是否根尖附近有其他种类的线虫还有待进一步研究。

4 结 论

研究对苜蓿根际寄生线虫种类的调查结果表明，新疆苜蓿根际已发现7属9种寄生线虫，分别是丝尾垫刃线虫属中的普通丝尾垫刃线虫；平滑垫刃属中的活泼平滑垫刃线虫；新平滑垫刃属；茎线虫属中的食菌茎线虫；螺旋属；真滑刃属中的燕麦真滑刃线虫、孤独真滑刃线虫、同形真滑刃线虫、帕拉莫诺夫真滑刃线虫；滑刃属中的林伯滑刃线虫、蘑菇滑刃线虫。其中真滑刃属线虫检出率占绝对优势，达53.04%，其次是螺旋属，而滑刃属则相对出现几率小，其他类群则差别不大。从分布情况来看，北疆地区苜蓿根际寄生线虫种类及数量较多，而南疆地区种类及数量均较少，仅发现有真滑刃属线虫。此次调查中并未发现在国外严重危害的根结线虫。

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Fund project:Supported by the key laboratory project of grassland resources and ecology in Xinjiang Uygur Autonomous Region (XJDX0209-2012-01)，Special funds for public welfare industry (agriculture) scientific research projects (201303057) and Joint program of production, study and research base project for graduate students training of Xinjiang Agricultural University (xjaucxy-yjs-20141035)funding

Preliminary Report of Alfalfa Rhizosphere Parasitic Nematodes Species in Xinjiang

CAO Xue-song1, YANG Ya-peng1, YANG Hua2, DONG Yan-qiu1, LI Ke-mei1

(1. College of Agronomy, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052, China；2.ResearchInstituteofPlantProtection,XinjiangAcademyofAgriculturalSciences,Urumqi830091,China)

【Objective】 This project aims to conduct the investigation of Xinjiang alfalfa plant-parasitic nematodes in order to clarify the species of plant-parasitic nematodes and dominant population and provide an evidence for accurate evaluation of the damage of plant-parasitic nematodes to Alfalfa.【Method】493 samples of alfalfa rhizosphere soil were collected from 19 regions of alfalfa cultivated fields in Xinjiang, and the nematodes were isolated by using the shallow dish method. The nematode specifies was identified according to the morphological characteristics of nematode species and references to the literatures.【Result】7 groups and 9 species of plant nematodes were separated and identificated from alfalfa rhizosphere soil.【Conclusion】Overall, the species of Xinjiang alfalfa plant-parasitic nematodes was few, and the quantity was relatively less at present.Aphelenchus,AphelenchoidesandHelicotylenchusare the dominant population among them but Meloidogyne was not found.

alfalfa; parasitic nematodes; rhizosphere; identification

10.6048/j.issn.1001-4330.2016.07.014

2016-03-10

新疆维吾尔自治区草地资源与生态重点实验室项目(XJDX0209-2012-01)；国家公益性行业农业科研专项(201303057)；新疆农业大学产学研联合培养研究生示范基地项目(xjaucxy-yjs-20141035)

曹雪松(1991-)，男，硕士研究生，研究方向为牧草病害及防治，(E-mail)976403178@qq.com

李克梅(1973-),女，江苏如皋人，副教授，博士，研究方向为牧草病害，(E-mail) lindali1118@sina.com

S551+.7；S186

A

1001-4330(2016)07-1276-05