糖类脂肪蛋白质鉴定实验考点剖析

江苏省郑集中学　李秋影

糖类脂肪蛋白质鉴定实验考点剖析

江苏省郑集中学李秋影

近几年高考中实验考查所占的比例逐渐增加，生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质鉴定实验是高中生物必修一学生最先接触的实验，也包含一些实验思想，是高中生物教学的重点，本文想通过例题分析归纳“还原糖、脂肪、蛋白质鉴定”的重要考点。

高考实验考查鉴定实验

例1：某校生物兴趣小组进行了生物组织中还原糖检测的实验（如图），下列叙述正确的是（ ）

A.由于斐林试剂不稳定，在使用斐林试剂时要先加0.1 g/mL的NaOH溶液，后加入 0.05g/mL的CuSO4溶液。

B.在制备生物组织样液时，加入石英砂的主要目的是促进还原糖的溶解。

C.用于该实验检测的斐林试剂也可用于检测蛋白质，只是添加试剂的顺序不同。

D.在实验材料选择方面，用苹果比用植物叶片的效果要好。

解析：本题考查叶绿体中色素的提取和分离实验、还原性糖和蛋白质的鉴定等，对于此类试题，需要考生掌握的细节较多，如实验的原理、实验选择的材料是否合理、实验采用的试剂及试剂的作用、实验操作等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。

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解答：A.斐林试剂的成分是质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05 g/mL的硫酸铜溶液，要现配现用，A错误；

B.在制备生物组织样液时，加入石英砂的主要目的是研磨充分，B错误；

C.斐林试剂和双缩脲试剂的成分相同，浓度不同，用于该实验检测的斐林试剂不可用于检测蛋白质，C错误；

D.苹果糖量高、颜色浅，适于做还原糖鉴定的实验，植物叶片可能含有还原糖，但是颜色较深，最终出现的砖红色沉淀不易观察，D正确。

故选：D。

知识链接1常用染色剂及其作用

染色剂或指示剂　作用对象　颜色变化斐林试剂（或班氏试剂） 还原糖　砖红色（50-65℃水浴加热）苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）　脂肪　橘黄色（红色）双缩脲试剂　蛋白质　紫色甲基绿　D N A　绿色吡罗红（派洛宁）　RN A　红色健那绿（铁苏木精）　线粒体　蓝绿色（蓝色）重铬酸钾　乙醇　灰绿色溴麝香草酚蓝　CO2　由蓝变绿再变黄二苯胺试剂　D N A　蓝色（沸水浴加热）

知识链接2实验材料选材

（1）在还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含还原糖量较高的生物组织（或器官），而且组织颜色较浅，或近于白色的苹果、梨等材料。另外，由于甘蔗、甜菜中含有的蔗糖是非还原糖，不宜选用。

（2）在脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选择富含脂肪的种子。

（3）在蛋白质的鉴定实验中，最好选用富含蛋白质的生物组织，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是稀释的鸡蛋清。

知识链接3双缩脲试剂与斐林试剂的异同点

斐林试剂　双缩脲试剂用途　鉴定可溶性还原糖的存在；　鉴定蛋白质、二肽及多肽成分　0.1g/mL氢氧化钠溶液0.05g/mL硫酸铜溶液发生的反应0.1g/mL的氢氧化钠溶液（A液）0.01g/mL的硫酸铜溶液（B液）双缩脲（H2N O C-N H-CO N H2）能与铜离子作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应使用方法现配现用；混合均匀；隔水加热；Cu(O H)2被还原为砖红色的Cu2O先加A液，与样液混匀后滴加B液颜色反应　呈砖红色　呈紫色

例2（多选）关于生物组织中还原糖的鉴定，下列叙述正确的是（ ）

A.量取2mL斐林试剂时应优先选用5mL量筒而不用10mL量筒。

B.隔水加热时，试管中液体的液面应低于烧杯中水的液面。

C.在组织样液中加入斐林试剂后试管内液体呈现无色，加热后变成砖红色。

D.实验结束时将剩余的斐林试剂装入棕色瓶，以便长期保存备用。

解析：本题考查生物组织中可溶性还原糖的鉴定的实验，意在考查学生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用；并对实验现象和结果进行解释、分析、处理。

解答：A.量取2mL斐林试剂时应优先选用5mL量筒而不用10mL量筒，这样量取更准确，故A选项正确；B.隔水加热时，试管中液体的液面应低于烧杯中水的液面，有利于试管中液体的快速升温，故B选项正确；C.在组织样液中加入斐林试剂后试管内液体呈现蓝色，斐林试剂的颜色为蓝色，故C选项错误；D.斐林试剂要现用现配，不能长期保存，故D选项错误。故选：A B。

知识链接4实验设计步骤中模式化语言

①取若干支洁净的试管编号为A、B、C……或1、2、3……备用。

②分别向各试管中加入等量的实验物质1、实验物质2等。（通常为稀释溶液）

③分别向各试管中加入等量的鉴定物质，并给以适宜的条件。

④观察并记录实验结果。（通常以表格的形式对实验结果进行记录）

知识链接5实验结果误差分析

对于结果的误差分析要准确掌握每个实验的规范操作，注意事项及目的要求。例如：在做蛋白质鉴定实验时，在2 mL蛋白质溶液中加入2 mL双缩脲试剂A液后，又加入2 mL双缩腺试剂B液，振荡均匀，溶液颜色呈蓝色，最可能原因是：加入双缩脲试剂B液过量。