5种常用水产药品对似鲶高原鳅鱼苗的急性毒性实验

何阔，杨淞，汤巨平，赵柳兰，吴浩，吴应斌

（1.四川农业大学动物科技学院，四川成都 611130；2.四川省似鮎高原鳅省级原种场，四川峨眉山 614224）

5种常用水产药品对似鲶高原鳅鱼苗的急性毒性实验

何阔1，杨淞1，汤巨平2，赵柳兰1，吴浩1，吴应斌2

（1.四川农业大学动物科技学院，四川成都 611130；2.四川省似鮎高原鳅省级原种场，四川峨眉山 614224）

本文选择在似鲶高原鳅适宜的水温，采用静水法生物测试的方法，研究了氰戊菊酯、硫酸铜、高锰酸钾、聚维酮碘和甲醛5种药物对似鲶高原鳅鱼苗的急性毒性实验。实验结果表明：5种常用水产药物对似鲶高原鳅24 h半致死浓度（24 h LC50）依次为0.183、0.261、3.69、16.3、77.4 mg/L；48 h LC50分别为0.143、1.87、3.33、13.2、75.4 mg/L；96 h LC50分别为0.13、1.42、3.1、11.1、69.7 mg/L；对似鲶高原鳅的安全浓度分别为0.013、0.142、0.31、1.11、6.97 mg/L。5种药物对似鲶高原鳅的毒性强度依次为：氰戊菊酯＞硫酸铜＞高锰酸钾＞聚维酮碘＞甲醛。似鲶高原鳅对氰戊菊酯、硫酸铜等杀虫剂非常敏感，而对聚维酮碘、甲醛等杀菌剂相对不太敏感，但对高锰酸钾这种杀菌剂较为敏感，所以在使用高锰酸钾时注意浓度的控制。本文就5种药物对似鲶高原鳅的急性毒性效应特征进行分析和探讨。

似鲶高原鳅；半致死浓度；急性毒性；安全浓度

似鲶高原鳅（Triplopysa siluroides）隶属于鲤形目（Cypriniformes）、鳅科（Cobitidae）、条鳅亚科（Nemacheilinae），高原鳅属（Triplophysa）[1]，俗称老虎鱼、黄河鲢鱼、土鲇鱼，是鳅科鱼类中个体较大者。在国内，其主要分布于青海、四川、甘肃的黄河干流中上游及其支流中，宁夏黄河干流也偶有分布。似鲶高原鳅栖息于河流、湖泊多砾石处，以小鱼或水生昆虫、蠕虫为食，体色随个体生长及环境而有变化。由于在自然分布区域被大量捕捞，从而导致资源大幅度下降，目前仅在人烟稀少的高原地区有一定数量，所以对似鲶高原鳅的合理利用和保护管理极其重要与急切。

似鲶高原鳅是一种高蛋白低脂肪，肉味香美的名贵经济鱼类[2]，目前为了更好地开发利用这一珍贵高档水产品，其人工繁殖已经取得突破，近年来四川与青海等地逐渐开始了似鲶高原鳅的人工养殖和繁殖，诸多学者也从繁殖、养殖、病害等方面进行了似鲶高原鳅的基础研究[3-7]。但由于使用配合饲料以及高密度养殖等方式，改变了似鲶高原鳅的自然生活习性，导致其免疫能力下降，不时有疾病发生。如车轮虫病以及爱德华氏菌引起的出血、烂鳃等症状，以上疾病可通过硫酸铜和高锰酸钾或聚维酮碘进行防治[6，8]。但这类药物对似鲶高原鳅的毒性试验还未见报道。因此，本文研究了5种常用水产药物氰戊菊酯、硫酸铜、高锰酸钾、聚维酮碘和甲醛对似鲶高原鳅的急性毒性实验，为评价常用水产药物对似鲶高原鳅生长、发育和繁殖过程中疾病的防控与治疗提供理论参考依据，也为山区河流的人工放流、资源恢复提供种源保障，具有显著的经济效益和生态效益。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物似鲶高原鳅[体质量（1.30±0.26）g，体长（5.78±0.28）cm]若干尾，从中选择体长体质量差异较小的进行实验。实验鱼由四川省似鲇高原鳅原种场提供。

1.1.2 实验药品高锰酸钾（分析纯），硫酸铜（晶体，分析纯），甲醛（37%～40%），氰戊菊酯，聚维酮碘。实验药物先用清水配成母液，再根据实验需求配成相应的浓度。

1.2 实验方法

1.2.1 饲养管理实验用水为充分曝气后的自来水，水温在（18±1）℃，pH为弱碱。实验在直径为36 cm、高度为18 cm的实验盆中进行。试验期间不充气，不投饵料，每个实验盆加入5 L水，并随机放入12尾似鲶高原鳅。

1.2.2 预实验为确定药液的大致浓度范围，参考已报道其他鱼类的相关资料[9-12]，设计3个药物浓度，每个浓度放入5尾似鲶高原鳅，观察12 h似鲶高原鳅对各种药物的最大耐受浓度和完全死亡浓度。

1.2.3 正式实验根据预实验，对5种药物设计以下不同的实验浓度（表1）。根据静水法生物测试[13]，实验期间不更换药液（除甲醛24 h换一次外），实验期间不投喂饵料，避免饲料的影响，也不需要充气。根据预实验结果按等比或等差级数设5个浓度梯度（各设3个平行组）及1个空白对照组。每一浓度组放12尾似鲶高原鳅，观察其行为表现、中毒现象，同时记录死亡情况并计算病死率。似鲶高原鳅中毒后，经过玻璃棒多次刺激无反应则判断为死亡，捞出。

“我国石化行业大而不强，发展受到资源、能源、环境的严重制约。在新时代背景下，亟需运用新的信息化、智能化等现代信息技术，推进以高效化和绿色化为目标的智能优化制造，实现新旧动能全面转型发展。”中国工程院院士、华东理工大学教授钱锋积从事工业过程建模与控制及工业过程先进控制研究几十年之经验，对石化行业推进智能制造提出了独到见解。

1.3 数据处理

表1 实验药物浓度

记录各实验组似鲶高原鳅的24、48、96 h的死亡数，并计算出平均病死率。

半致死浓度：用直线内插法，以浓度为横坐标，病死率为纵坐标，求出各药物的半致死浓度LC50。

安全浓度：采用常规方法计算安全浓度，即按96 h的LC50×0.1计算安全浓度。

用SPSS18.0进行数据分析，数据均用平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 行为表现

在氰戊菊酯实验中观察到似鲶高原鳅在高浓度0.40 mg/L 1 h后，出现中毒现象，其表现为狂躁不安，在实验盆中狂游。似鲶高原鳅深度中毒后，出现呼吸障碍现象、间接性呼吸，并身体抽搐，时不时往水面窜，翻滚侧游，身体抽搐扭曲。死亡后，有的似鲶高原鳅肚子胀大，体色发白。

似鲶高原鳅放入高锰酸钾实验液后，在高浓度8.0 mg/L 45 min后开始表现烦躁不安，随后侧卧于水底，呼吸困难。死亡后其躺于盆底，腹部呈现出一团红块。

在聚维酮碘实验中，似鲶高原鳅先呼吸频率加快，在最高浓度40 mg/L从110次/min经过20 min增加至178次/min，表现性情暴躁，偶尔出现狂游。深度中毒后，其呼吸频率减慢，出现侧游，使劲往水面窜，游泳能力减弱，体色变淡，慢慢沉入水底刺激反应极弱，直至死亡。

在甲醛实验组观察到，似鲶高原鳅放入实验液中，最高浓度150 mg/L实验组先呼吸频率略微加快，从108次/min变为120次/min。其受刺激后，出现间歇性狂游，表现为狂躁不安；明显中毒后，开始侧游，运动能力减弱，呼吸频率减慢，对外界刺激反应减弱，体色发白，死亡后有掉皮现象。

2.2 病死率

试验开始，低浓度组似鲶高原鳅活动情况与对照组基本相似大多成群静伏于实验盆底部，少数缓慢游动，而高浓度组似鲶高原鳅反应激烈，显得十分兴奋，呼吸频率加快。一段时间后，低浓度组似鲶高原鳅活动情况变化不大，而高浓度组活动能力开始减弱，呼吸频率也随之变缓，受外界刺激后反应迟钝，体色变浅。随着时间延长，不同药物中高浓度组似鲶高原鳅均出现死亡，低浓度少有死亡出现，具体病死率见表2。

表2 5种药物不同浓度下似鲶高原鳅病死率

2.3 安全浓度与半致死浓度

5种药物对似鲶高原鳅的安全浓度依次为氰戊菊酯0.0131 mg/L、硫酸铜0.142 mg/L、高锰酸钾0.31 mg/L、聚维酮碘1.11 mg/L、甲醛6.97 mg/L。若以安全浓度为衡量标准，该试验表明似鲶高原鳅对5种药物敏感程度依次氰戊菊酯＞硫酸铜＞高锰酸钾＞聚维酮碘＞甲醛。似鲶高原鳅对氰戊菊酯和硫酸铜两种杀虫剂敏感程度较高，而对杀菌剂甲醛和聚维酮碘的敏感程度相对较低。5种药物的半致死浓度和安全浓度见表3。

3 讨论

菊酯类农药是一类人工合成与天然除虫菊素的化学结构相似的杀虫药，菊酯类农药和有机磷农药一样，对鱼类仍属于高效高毒，而且作用迅速，致死率高，对渔业生产造成很大危害。该研究中氰戊菊酯对似鲶高原鳅96 h的LC50值为0.131 mg/L，远超鲤鱼的48 h LC50为0.005 mg/L[14]，以及斑马鱼96 h LC50为0.9×10-4mg/L[15]。由此可见，似鲶高原鳅对氰戊菊酯反应远没有其他鱼类敏感，安全浓度也远高于这两种鱼。其中斑马鱼平均体长为2.8 cm，比本实验选用似鲶高原鳅（平均体长5.78 cm）的规格小，因此可能有斑马鱼鱼苗较小的关系，使得斑马鱼比似鲶高原鳅敏感。生产上可以考虑使用氰戊菊酯对似鲶高原鳅进行杀虫，但由于其气味大，也要根据实际情况使用。

表3 5种药物对似鲶高原鳅的半致死浓度与安全浓度

有关硫酸铜对鱼类的急性毒性研究国内已有许多报道，长薄鳅的安全浓度为0.005 mg/L[16]，梭鲈鱼的安全浓度为0.481 mg/L[17]，唐鱼的安全浓度0.061 mg/L[18]。可能不同的鱼类具有不同的生理特性，对硫酸铜敏感度都不相同。硫酸铜常用来毒杀鱼体上的寄生的原生动物、水体中大量藻类等，常用浓度为0.5～0.8 mg/L，通常的使用浓度远高于似鲶高原鳅的安全浓度0.142 mg/L。因此，在似鲶高原鳅鱼苗阶段注意使用，尽量减少或避免使用硫酸铜，以免造成重金属中毒而大量死亡。

高锰酸钾是一种强氧化剂，遇有机物即放出氧，从而起到杀菌、杀虫、解毒作用。生产上常用于防治鱼、虾等细菌、真菌和寄生虫类疾病和设施、工具的消毒，渔业生产常用剂量为2～5 mg/L[19]，而高锰酸钾对似鲶高原鳅的安全浓度为0.31 mg/L，低于常用药浴和遍洒浓度[20]，高于虹鳟的0.217 mg/L[21]，低于金鱼的0.80 mg/L[22]和黄颡鱼的1.11 mg/L[23]。由此可见，似鲶高原鳅对高锰酸钾比较敏感，特别是在碱性和微酸性条件下，高锰酸钾易产生二氧化锰沉淀，对水生动物的鳃组织有较高的损坏作用，使用时应该根据实际情况调整使用。

聚维酮碘可用于养殖水体，养殖器具的消毒，也可用于治疗弧菌、嗜水气单胞菌、爱德华氏菌等细菌引起出血、烂鳃、疖疮、腐皮等细菌性疾病。似鲶高原鳅的96 h半致死浓度11.1 mg/L与蓝点笛鲷幼鱼48 h的半致死浓度12.98 mg/L[24]和斑马鱼96 h半致死浓度17.63 mg/L[25]相差不多，与异育银鲫的96 h LC50为74.77 mg/L[25]相比敏感许多。不同的鱼对聚维酮碘的耐受力不同，可能由于似鲶高原鳅是冷水型鱼，实验水温也偏低的原因，影响聚维酮碘的药效。

甲醛是一种有刺激性臭味的化学制剂，在气态或液态下，均呈现强大的杀菌作用。甲醛能溶解类脂，能与蛋白质的氨基结合而使蛋白质凝固变性，具有较强的广谱杀菌和杀虫功能，在水产养殖中有其独特的作用[26]，因此广泛应用于水产动物疾病防治[27]。由本实验结果显示，甲醛对似鲶高原鳅的安全浓度6.97 mg/L，参照其他鱼类的甲醛毒性实验[18，28]，如甲醛对孔雀鱼的96 h安全浓度8.33 mg/L，月光鱼的96 h安全浓度6.74 mg/L。甲醛相对其他水产药品毒性较低，在生产上作为遍洒药物时，用药量大，经济上不合算，因此一般情况下不作为全塘泼洒，而只作为浸洗药物。

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Acute toxicity of five commonly-used aquatic drugs to Triplopysa siluroides fry

He Kuo1，Yang Song1，Tang Juping2，Zhao Liulan1，Wu Hao1，Wu Yingbing2
(1.College of Animal Science and Technology，Sichuan Agricultural University，Chengdu 611130，China；2.Breed farm of mountain loach，E'mei shan 614224，China）

In this paper，the experiment was conducted to investigate the acute toxicity effect of five aquatic drugs to Triplopysa siluroides fry under their suitable water temperature indoor.The results showed that the 24 hhalf lethal concentrations（24 h LC50）of the five medicaments were:0.183，0.261，3.69，16.3，77.4 mg/L；and 48 h LC50were 0.143，1.87，3.33，13.2，75.4 mg/L;while 96 h LC50were 0.13，1.42，3.1，11.1，69.7 mg/L respectively.The safe concentrations（SC）were 0.013，0.0142，0.31，1.11 and 6.97 mg/L for experiment fry，respectively.Through analysis and comparison，the toxicities of five medicaments were in order of phenvalerate> CuSO4>KMnO4>povidone-iodone>formaldehyde.At the same time the results indicated that povidone-iodone and formaldehyde were low toxicity to Triplopysa siluroides，while phenvalerate，CuSO4and KMnO4were high toxicity.So it is a good suggestion that povidone iodone and formaldehyde could be recommended to use for disease control，while phenvalerate，CuSO4and KMnO4should be used carefully because of their high toxicities. Lastly，the acute toxicity effect of five drugs on Triplopysa siluroides were also analyzed and discussed in this paper.

Triplopysa siluroides；half lethal concentration；acute toxicity；safe concentration

10.3969/j.issn.1004-2091.2016.10.004

Q176

A

1004-2091（2016）10-0017-06

2016-03-14）

四川省科技厅“十三五”水产育种攻关子项目

何阔（1994-），男，主要从事鱼类健康养殖研究.E-mail:897285204@qq.com

杨淞（1979-），男，副教授.E-mail:ysys210@hotmail.com