右美托咪啶对失血性休克大鼠血清IL-6、IL-10及TNF-α水平的影响*

尹小勇，文先杰，冯国良，郭小亮，冯超群，李学轮

(1.顺德均安医院麻醉科，广东佛山528329；2.佛山市第一人民医院麻醉科)



右美托咪啶对失血性休克大鼠血清IL-6、IL-10及TNF-α水平的影响*

尹小勇1，文先杰2，冯国良1，郭小亮1，冯超群1，李学轮1

(1.顺德均安医院麻醉科，广东佛山528329；2.佛山市第一人民医院麻醉科)

目的：观察右美托咪啶对失血性休克大鼠血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平的影响，探讨右美托咪啶对失血性休克大鼠炎症反应的影响。方法：雄性SD大鼠32只，体重220～240 mg，随机分为4组，每组8只，分别为假手术组(S组)，模型组(M组)，生理盐水组(NS组)和右美托咪啶组(D组)。D组大鼠在大鼠休克模型制备前腹腔注射右美托咪啶30 μg/kg(2 μg/mL)，NS组大鼠则注射等容积的生理盐水。在模型制备前(T1)、准备放血前即刻(T2)、液体复苏前即刻(T3)、液体复苏结束即刻(T4)及液体复苏结束后120 min分别取股静脉血2 mL，采用ELISA法检测血浆中TNF-α、IL-6、IL-10的表达。结果：与T1比较，M组、NS组、D组大鼠血清IL-6、IL-10、TNF-α的含量在T3、T4、T5时间点含量升高(P<0.05)；与S组比较，M组、NS组、D组大鼠血清IL-6、TNF-α在T3、T4、T5时间点含量升高(P<0.05)；与NS组比较，D组大鼠血清IL-6、TNF-α含量在T3、T4、T5时间点含量降低(P<0.05)、IL-10含量增加(P<0.05)。结论：腹腔注射右美托咪啶可以抑制IL-6和TNF-α的表达，增加抗炎因子IL-10的表达，改善失血性休克大鼠炎症反应。

失血性休克；大鼠；炎症反应；IL-6；TNF-α；IL-10

失血性休克是临床上最常见的休克类型，常需要紧急抢救，尤其是创伤出血性休克，常需要手术治疗。炎性因子包括肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)等致炎因子和白细胞介素-10 (interleukin-10,IL-10)等抗炎因子，正常情况下机体维持致炎因子和抗炎因子的动态平衡。右美托咪啶对失血性休克大鼠血清IL-6、IL-10及TNF-α水平有何影响目前尚不清楚。本研究通过建立大鼠失血性休克模型，观察右美托咪啶对失血性休克大鼠血清IL-6、IL-10及TNF-α水平的影响，探讨右美托咪啶对失血性休克大鼠炎症反应的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 雄性SD大鼠32只，体重220～240 mg(广东省实验动物中心提供)，随机分为4组，每组8只，分别为假手术组(S组)，模型组(M组)，生理盐水组(NS组)和右美托咪啶组(D组)。

1.2 方法 大鼠术前禁食12 h，自由饮水，腹腔注射1 %戊巴比妥纳(40 mg/kg)，待动物麻醉后，仰卧位固定于大鼠手术台上，用电热毯保持直肠温(36.3±0.5)℃，暴露右侧颈内动脉并置管(22 G动脉穿刺针)，连续监测平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)、心率(heart rate,HR)，暴露右侧股动脉、股静脉并置管，分别用于抽取血液和液体会输，所有手术均严格无菌操作，操作完成后稳定30 min，假手术组仅暴露股动静脉而不置管进行放血，模型组则由股静脉缓慢抽取血液2 mL/(kg·min),加肝素保存用于回输，继续抽取或回输血液使MAP稳定在40 mmHg左右60 min后进行液体复苏120 min，复苏时用自体血全部回输并追加输入乳酸林格式液维持MAP在80～100 mmHg。D组大鼠在大鼠休克模型制备前腹腔注射右美托咪啶(批号：14061032，江苏新晨医药有限公司)30 μg/kg(2 μg/mL)。NS组大鼠则注射等容积的生理盐水。

1.3 检测指标 在模型制备前(T1)、准备放血前即刻(T2)、液体复苏前即刻(T3)、液体复苏结束即刻(T4)及液体复苏结束后120 min分别取股静脉血2 mL放入抗凝管中混匀，于-80度冰箱保存备用，按照试剂说明书提供的方法和步骤，采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)法检测血浆中TNF-α、IL-6、IL-10的表达。ELISA试剂盒购自武汉博士德生物有限公司。

1.4 统计学分析 采用SPSS 11.0统计学软件进行分析，计量资料以均数±标准差表示，组内比较采用t检验，组间比较采用单因素方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠IL-6含量的表达 与T1比较，M组、NS组、D组大鼠血清IL-6的含量在T3、T4、T5时间点含量升高(P<0.05)。与S组比较，M组、NS组和D组大鼠血清IL-6在T3、T4、T5等时间点含量升高(P<0.05)。与NS组比较，D组大鼠血清IL-6含量在T3、T4、T5时间点含量降低(P<0.05)，见表1。

表1 大鼠各时点血浆IL-6含量比较(x±s，n=8，pg/mL)

2.2 各组大鼠IL-10含量的表达 与T1比较，M组、NS组、D组大鼠血清IL-10的含量在T3、T4、T5时间点含量升高(P<0.05)；与S组比较，M组、NS组和D组大鼠血清IL-10在T3、T4、T5时间点含量升高(P<0.05)；与NS组比较，D组大鼠血清IL-10含量在T3、T4、T5时间点含量升高(P<0.05)，见表2。

表2 大鼠各时点血浆IL-10的

2.3 各组大鼠TNF-α含量的表达 与T1比较，M组、NS组、D组大鼠血清TNF-α的含量在T3、T4、T5时间点含量升高(P<0.05)；与S组比较，M组、NS组和D组大鼠血清TNF-α在T3、T4、T5时间点含量升高(P<0.05)；与NS组比较，D组大鼠血清TNF-α含量在T3、T4、T5时间点含量降低(P<0.05)，见表3。

表3 大鼠各时点血浆TNF-α

3 讨论

失血性休克所致的全身炎症反应是导致多器官功能障碍综合征发生发展的重要原因。大量失血后，交感-肾上腺髓质系统兴奋，儿茶酚胺释放增多，引起肺内局部的炎症反应增强。根据细胞因子在炎性反应中的不同作用分为促炎性细胞因子和抗炎性细胞因子。休克所致的炎症反应实际上是促炎性细胞因子和抗炎性细胞因子失衡[1]。促炎性细胞因子主要包括TNF、IL-1、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)、IL-6、IL-8等，与炎症的发生和发展密切相关。抗炎性细胞因子主要包括IL-4、IL-10等，有拮抗炎性介质的作用,抑制炎症的发展加剧。TNF-α是炎症早期最主要前炎性因子。在炎性反应初期，TNF-α除能动员血循环中的中性粒细胞向炎症部位聚集外，还能动员骨髓白细胞进入血液循环，同时激活内皮细胞。内皮细胞受TNF-α刺激时，释放E-选择素、L-选择素、细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule，ICAM-1)等黏附因子，进一步诱导IL-6等细胞因子的分泌，共同参与炎性反应。

研究表明，右美托咪啶可抑制TNF-α诱导的ICAM-1表达上调，抑制炎性反应，阻断炎性细胞对血管内皮黏附的直接损伤作用[2，3]。同时，右美托咪啶抑制TNF-α诱导人脐静脉血管内皮细胞NF-κB p65的表达，抑制其与ICAM-1启动子结合，降低ICAM-1的表达水平,进一步抑制炎症反应。一项临床研究表明，手术创伤应激可直接或间接地引起TNF-α合成及释放增加，大量的TNF-α进入血流，可引起全身炎症反应。右美托咪啶能抑制手术创伤所致的血清TNF-α、IL-6的至炎因子的增加，对抗炎因子IL-10的释放也有一定的抑制作用。本研究结果表明，失血性休克大鼠腹腔注射右美托咪啶可以抑制IL-6和TNF-α的表达，增加抗炎因子IL-10的表达，提示右美托咪啶可以抑制失血性休克大鼠炎症反应的发生。

综上所述，腹腔注射右美托咪啶可以抑制IL-6和TNF-α的表达，增加抗炎因子IL-10的表达，改善失血性休克大鼠的炎症反应。

[1] Sven A,Maybauer DM,Fraser JF, et al.A meta-analysis of analgesic and sedative effects of dexmedetomidine in burn patients.[J].Burns Journal of the International Society for Burn Injuries, 2013, 39(4):625-631.

[2] Alice F,Tina P,David G,et al.A comparison of dexmedetomidine and midazolam for sedation in severe pediatric burn injury.[J].Journal of Burn Care & Research Official Publication of the American Burn Association,2012,33(6):759-63.

[3] 王惠枢,徐世元,张良成,等.右美托咪定对严重烫伤大鼠心肌细胞凋亡的影响[J].中华麻醉学杂志,2013,33(10)：1202-1205.

佛山市卫计委医学科研项目(2015045)

文先杰

2016-01-30)