HER2 ECD和CA15-3联合检测对乳腺癌复发转移的诊断价值

朱娟娟，胡志军，沈国栋，周东升，汪亚勤，唐吉斌

HER2 ECD和CA15-3联合检测对乳腺癌复发转移的诊断价值

朱娟娟1，胡志军1，沈国栋2，周东升1，汪亚勤1，唐吉斌1

选取86例乳腺癌术后病例（复发转移34例，未复发转移52例），ELISA法检测血清HER2胞外段（HER2 ECD）浓度，化学发光免疫分析法检测糖类抗原15-3（CA15-3）浓度。复发转移组患者血清中HER2 ECD与CA15-3浓度显著高于未复发转移组，二者联合检测可提高对乳腺癌复发转移诊断的灵敏度和特异度，血中HER2 ECD的阳性率与患者组织学分级、淋巴结转移情况及组织HER2状态相关，CA15-3阳性率与组织学分级、淋巴结转移有关。

HER2 ECD；乳腺癌；复发转移；CA15-3；联合检测

HER2属于受体酪氨酸激酶中的生长因子受体家族，其过表达对乳腺癌是一个独立的预后因子，提示预后差，容易复发和转移，目前主要通过免疫组织化学法（immunohistochemistry，IHC）和荧光原位杂交法（fluorescence in situ hybridization，FISH）对组织进行检测。近年来研究［1］表明，HER2胞外段即HER2 ECD可以从细胞表面切割进入血中循环，可导致与细胞膜关联的胞内区（p95蛋白）持续活化和下游MAPK及PI3K通路的增强，使细胞增殖失控更具侵袭性。加上其采集方便、可进行准确的定量检测等优势，外周血中HER2 ECD检测越来越得到人们的重视，有望成为IHC和FISH等检测的有效补充手段［2］。糖类抗原15-3（carbohydrate antigen 15-3，CA15-3）是目前最常用的判断乳腺癌预后及复发的独立性因子。该研究通过检测外周血血清中HER2 ECD与CA15-3在乳腺癌不同发展阶段的浓度水平来探讨其诊断价值，以期为临床工作提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 病例资料 研究对象为2013年1月～2014年7月在铜陵市人民医院术后进行放化疗治疗的病历资料完整的86例乳腺癌患者，女85例，男1例；年龄31～67岁，中位年龄51岁；浸润性导管癌82例，大汗腺样癌、导管原位癌、浸润性小叶癌、黏液癌各1例。86例患者中34例发生复发转移，52例未发生复发转移。

1.2 标本采集 住院患者早晨空腹采集静脉血3 ml，静置20 min，3 000 r/min离心10 min，取血清至于洁净EP管中，于-80℃冰箱冻存备用。

1.3 检测方法 HER2 ECD采用 ELISA法检测，试剂盒由美国eBioscience公司提供，所有操作按说明书和实验操作规程进行。反应结束后于450 nm波长依序测量各孔的吸光度（optical density，OD）值，以标准品浓度和OD值绘制标准曲线，根据标准曲线即可计算样本的浓度。CA15-3检测采用全自动化学发光免疫分析仪（ARCHITECT i2000）和配套试剂进行检测，HER2 ECD以2003年美国FDA规定的15 g/L为临界值，CA15-3以铜陵市人民医院检验科采用的31.3 U/L为临界值，高于临界值即为阳性。

1.4 统计学处理 数据均采用SPSS 19.0软件进行统计分析。计数资料以例数或百分比表示，组间资料比较采用 χ2检验，计量资料比较用非参数Mann-Whitney检验，相关性分析用Spearman检验，采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）对实验数据进行分析与评价。

2 结果

2.1 乳腺癌复发转移组和未复发转移组HER2 ECD及CA15-3浓度的比较 复发转移组中的HER2 ECD及CA15-3的浓度均显著高于未复发转移组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 相关性分析 乳腺癌复发转移组中HER2 ECD与CA15-3的浓度呈正相关性（rs=0.681，P＜0.05）。

2.3 HER2 ECD、CA15-3对乳腺癌复发转移的诊断价值 应用ROC曲线分析实验所得数据（图1）。HER2 ECD和CA15-3的曲线下面积（AUC）分别为0.850和0.900，对乳腺癌的复发转移具有中等诊断价值。以15 g/L为临界值时，HER2 ECD对乳腺癌转移复发诊断的灵敏度为 58.8%，特异度为98.1%，符合率为82.6%。以31.3 U/L为临界值时，CA15-3的灵敏度为73.5%，特异度为98.1%，符合率为96.2%。将二者联合分析，结果显示并联检测对乳腺癌转移复发的灵敏度为94.1%，特异度为96.2%，符合率为83.7%，串联检测对乳腺癌转移复发的灵敏度为38.2%，特异度为100.0%，符合率为77.6%。见表2。

2.4 乳腺癌患者血清中HER2 ECD、CA15-3阳性率与患者临床特征关系 HER2 ECD和CA15-3的阳性率在不同年龄人群中分布差异无统计学意义。在不同组织学分级以及淋巴结转移状态患者中HER2 ECD和CA15-3的阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）：Ⅲ级的阳性率要明显高于Ⅰ级和Ⅱ级，有淋巴结转移的阳性率也明显高于无淋巴结转移患者。除此之外，组织HER2阳性患者的HER2 ECD阳性率明显高于组织HER2阴性的患者，差异有统计学意义（P＜0.05），而CA15-3的阳性率在组织HER2阳性组和阴性组之间的差异无统计学意义。见表3。

图1 HER2 ECD和CA15-3的ROC曲线

表1 乳腺癌患者血清中HER2 ECD和CA15-3水平比较［M（P25，P75）］

表2 HER2 ECD和CA15-3对乳腺癌复发转移的诊断价值（%）

表3 乳腺癌患者HER2 ECD、CA15-3表达情况与患者临床特征关系［n（%）］

3 讨论

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，目前的治疗方法主要以手术为主，而术后监测有无复发转移对降低死亡率至关重要。外周血中肿瘤指标检测凭着取材方便、可进行动态监测的优点已在临床上广泛应用。

CA15-3是目前公认的用于监测乳腺癌复发转移的糖类抗原［3］，HER2 ECD作为组织HER2蛋白的切割产物不仅反映乳腺癌的肿瘤负荷，还反映肿瘤细胞的生物学活性，已有研究［4-5］显示升高的HER2 ECD不仅可提示肿瘤的预后复发，还有助于肿瘤的疗效判断［6-7］，本研究结果表明HER2 ECD 和CA15-3在复发转移组中的浓度明显高于未复发转移组，并且二者的浓度在复发转移组中呈正相关性，提示这两种因子联合检测有利于对乳腺癌复发转移的诊断。研究还用了ROC曲线分析两种因子对乳腺癌复发转移的诊断价值，显示HER2 ECD和CA15-3的AUC分别为0.850和0.900，具有中等诊断价值。本研究并未采用尤登指数（灵敏度+特异度-1）最大时的临界值，而是采取在临床接受程度更为广泛的15 g/L和31.3 U/L作为HER2 ECD和CA15-3的临界值，结果显示单独分析时HER2 ECD的灵敏度稍高于CA15-3，二者特异度相同，与文献［5］报道略有偏差，可能与样本数量以及是否限定组织HER2状态等因素有关。但是二者并联检测时可提高诊断的灵敏度，串联检测时可提高诊断的特异度，符合文献［8-9］报道。

本研究还显示HER2 ECD的阳性率与年龄无关，与组织学分级和淋巴结转移有关，与文献［10-11］报道一致。HER2 ECD水平与组织HER2表达之间的相关性尚存有争议［12-13］，其原因可能与样本来源、数量以及阈值界定不同有关［14］，本研究的对象是乳腺癌术后患者，排除了肿瘤负荷的影响，但仍可看出HER2 ECD的阳性率在组织HER2阳性组中明显高于HER2阴性组，提示HER2 ECD水平的升高对判断组织HER2阳性的患者术后复发转移具有重要的临床意义［2］，本研究中有2例组织HER2阴性的患者血中HER2 ECD为阳性，可能与技术误差及肿瘤细胞的生物学转变有关。CA15-3在临床已得到广泛应用，其水平变化与其局部淋巴结及远处转移情况之间存在一致性，尤其是有远处转移灶者，本研究显示CA15-3的阳性率与淋巴结转移相关和组织学分级相关，而与年龄、组织HER2状态无关。

综上所述，HER2 ECD、CA15-3与乳腺癌的病程进展相关，其检测具有连续性、实时性和方便性的优点，可对肿瘤进行动态监测，二者联合检测可为乳腺癌的临床诊断和治疗提供思路和理论指导。

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A

1000-1492（2016）09-1378-04

时间：2016-8-1 14：07

http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20160801.1407.068.html

2016-04-14接收

安徽省铜陵市卫生局科技计划项目（编号：卫科研［2012］05）；安徽省科技计划项目（编号：1301042094）

1安徽医科大学铜陵临床学院、铜陵市人民医院临床检验中心，铜陵 2440022安徽医科大学附属省立医院老年医学科，合肥 230001

朱娟娟，女，主管检验师；唐吉斌，男，副教授，副主任检验师，责任作者，E-mail：13705628207@163.com