核酸检测与酶免检测平行筛查血液的效果评价

李玉泉

吉林省白山市中心血站检验科，吉林白山134300

核酸检测与酶免检测平行筛查血液的效果评价

李玉泉

吉林省白山市中心血站检验科，吉林白山134300

目的探讨在实施血液平行筛查过程中，分析核酸检测以及酶免检测在血液筛查中应用价值。方法选择2010年8月—2016年6月血站检验科献血者的血液样品39236份标本作为该次实验对象；针对所有献血者的血液样品，分别开展ELISA检测以及NAT检测，在实施ELISA检测的过程中，检测项目主要体现为HBsAg检测、抗-HIV检测以及抗-HCV检测等。对最终的临床检测结果实施对比分析。结果在所有标本中，NAT检测阳性率达到0.56%；ELISA检测阳性率达到了0.51%；NAT以及ELISA检测阳性率为0.40%；ELISA检测阴性，NAT检测阳性率为0.16%。最终对鉴别结果进行分析发现，属于HBV-DNA的患者27例，属于HCV-RNA的患者2例；属于NAT阴性ELISA阳性的标本共包括42份，所占比例为0.11%；针对ELISA双试剂检测阳性同NAT阳性分析发现，阳性符合率达到了78.9%；HBsAg同NAT阳性符合率为80.3%；抗-HCV同NAT阳性符合率为66%；抗-HIV双试剂阳性同NAT阳性率符合率达到了100%。结论在实施血液平行筛查过程中，有效选择NAT方法以及ELISA方法，能够有效发挥防漏互补的特点，可以将献血者的血液检测窗口期有效缩短，针对血液安全做出有效保障，针对血液平行筛查的安全性做出有效保证。

核酸检测；酶免检测；平行筛查血液

在选择ELISA（酶联免疫检测）对献血者标本进行检测后最终显示合格的标本中，选择NAT（血站核酸检测）加以检测后，针对病毒感染的患者可以进行有效明确。针对检察人员临床实施NAT检测以及实施ELISA检测，可以获得显著的血液筛查效果，最终将血液安全性显著提高［1］。为了探讨在实施血液平行筛查过程中，核酸检测以及酶免检测的在血液筛查中的应用价值，该文主要将我站的献血者的血液标本作为该次实验观察对象，分别选择核酸检测的方法以及酶免检测的方法进行干预，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选择2010年8月—2016年6月血站检验科检测的献血者标本39236份作为该次实验对象；对于每位献血者，对其血液标本进行留取，剂量为3×5 mL。第1管属于EDTA-K2真空抗凝管，血站检验科实施血清学检测；第2管属于带分离胶无菌EDTA-K2真空抗凝管，临床实施NAT检测；第3管属于带分离胶EDTA-K2真空抗凝管，有效进行标本留取。针对所有标本完成采集后，于冰箱（2～8℃）中进行保存。针对NAT管，对其完成采血的4 h之内，有效实施离心处理（1 600 g×20 min），在2 d内有效完成检测工作，对于无法实施检测的标本，于-20℃的环境中进行保存。

1.2方法

检验科的工作人员，合理进行相关设备的准备工作，主要选择STARLET全自动酶免加样仪、FAME16/20全自动酶免检测分析仪以及ProcleixTIC-RIS全自动核酸检测分析系统实施核酸检测。做好试剂的准备工作［2］。对于相关检测方法主要根据试剂说明书进行相关操作。主要选择ELISA试剂对HBsAg、抗-HIV以及抗-HCV实施检测。与此同时，选择Procleix TIGRIS全自动核酸分析系统实施单人份核酸检测。选择ELISA阴性标本、NAT联检阳性标本实施HBV-DNA、HIV-RNA以及HCV-RNA实施鉴别试验［3］。

2　结果

在所有标本中，最终表现为NAT阳性的标本共包括220份，检测阳性率达到了0.56%；最终检测表现出ELISA阳性的标本达到了199份，检测阳性率达到了0.51%；检测NAT以及ELISA阳性的标本为157份，检测阳性率为0.40%；ELISA检测阴性，NAT检测阳性的标本达到了63份，所占比例为0.16%；最终对鉴别结果进行分析发现，属于HBV-DNA的患者27例，属于HCV-RNA的患者2例；属于NAT阴性ELISA阳性的标本共包括42份，所占比例为0.11%；针对ELISA双试剂检测阳性同NAT阳性分析发现，阳性符合率达到了78.9%；HBsAg同NAT阳性符合率为80.3%；抗-HCV同NAT阳性符合率为66%；抗-HIV双试剂阳性同NAT阳性率符合率达到了100%，具体结果可见表1、表2以及表3。

表1　ELISA同NAT平行检测结果

表2　ELISA阳性标本NAT联检情况

3　讨论

诸多疾病均会通过血液的形式进行传播，例如丙型肝炎疾病、乙型肝炎疾病以及艾滋病等，针对人体均会表现出较大程度的影响。对此需要研究有效方法加以血液检测，最终才能够将输血传播的风险有效排除，从而将相关纠纷出现的概率显著降低［4］。在实施血液筛查过程中，酶联免疫法获得了极为广泛的应用。此外选择核酸检测方法加以检测，最终针对医疗质量的提高可以发挥显著的促进作用。检测方法的有效应用，可以将输血传播途径加以有效排除，从而有效降低疾病传染的概率，提高用血患者的安全性，实现献血者本身的价值［5］。

近年来，为了将艾滋病的防治力度有效提高，针对诸多献血者血液在进行筛查过程中，TMA核酸检测技术以及ELISA检测平行筛查获得广泛应用。通过对39236份献血者标本实施平行检测后发现，最终发现表现出NAT阳性的标本220份，检测阳性率达到了0.56%。最终检测表现出ELISA阳性的标本达到了199份，检测阳性率达到了0.51%；检测NAT以及ELISA阳性的标本为157份，检测阳性率为0.40%；ELISA检测阴性，NAT检测阳性的标本达到了63份，所占比例为0.16%；最终对鉴别结果进行分析发现，属于HBV-DNA的患者27例，属于HCV-RNA的患者2例；属于NAT阴性ELISA阳性的标本共包括42份，所占比例为0.11%；针对ELISA双试剂检测阳性同NAT阳性分析发现，阳性符合率达到了78.9%；HBsAg同NAT阳性符合率为80.3%；抗-HCV同NAT阳性符合率为66%；抗-HIV双试剂阳性同NAT阳性率符合率达到了100%。从而证明将ELISA检测结果同NAT检测结果二者表现较不一致，采用两种方法对病毒标志物加以检测后发现，分析原因为相关的标志物主要在患者的外周血中存在的时间不同导致。从而证明采用此两种方法对献血者进行检测，较易表现出假阳性以及漏检的情况。将此两种方法加以筛查后，最终可以将血液安全性显著提高。

通过9.6倍超浓缩加以有效处理后，最终HBV病毒含量以及HCV病毒含量分别为5.92±1.98倍以及4.7±1.43倍，其可以将NAT检测灵敏度显著提高，可以将NAT筛查阳性标本鉴别率显著提高。因为条件受到了限制，无法利用超浓缩技术对鉴别阳性标本实施多次鉴别，但是因为需要对血液加以考虑，最终针对NAT联检阳性全部表现出潜在感染的情况，对于其他血液有效进行报废处理［6］。

针对献血者实施ELISA检测，其表现出较高特异度，但是下列几方面仍然会对其产生一定程度的影响。其一在操作方面会表现出一定程度的影响，在实施自动化加样的过程中，对于非一次性加样针同含有较高抗原血样相遇后，无法彻底实施清洗，从而导致出现了污染的情况，临床可以利用复检手动有效实施排除。其二在试剂方面会表现出一定程度的影响，如果出现了抗原制备不纯的情况之后，会导致出现假阳性的情况。采用不同试剂进行联合检测，对于最终表现出阳性的标本，存在较高概率表现出真阳性的情况。其三在样品方面会表现出一定程度的影响，对于样品溶血、自身抗体以及交叉反应物质针对最终的检测结果均会表现出一定程度的影响。对此需要选择特异性较高以及灵敏度较高的检测方法实施临床检测，合理完成专门试剂质量评估方案的创建，确保试剂以及检测标准全部合格，确保在实施血液病毒感染检测的过程中，需要选择成熟检测技术［7］。

对于NAT检测，并非绝对可靠，无法选择NAT检测对ELISA检测加以取代，在实施NAT检测的过程中，往往受到诸多因素的影响，例如核酸检测窗口期、出现了病毒核酸变异的情况、病毒含量过低以及实验操作的相关问题均会导致，其均会导致最终在实施NAT检测的过程中，表现出假阴性的情况。但是临床通过实施NAT检测，针对血液筛查表现出较大的帮助。

当前，HBV疾病较为流行，通过输血感染HBV的患者例数呈现出逐渐增加的趋势。在实施血液筛查的过程中，NAT又会表现出系列的问题，并且此种技术针对实验条件表现出较多的要求，如果针对相关的实验条件有所忽略，或者难以有效实现，最终较易表现出假阴性或者表现出假阳性的情况，从而导致在实施临床诊断的过程中，表现出诸多的负面影响。

综上所述，为了将血液安全性显著提高，临床除了对检测人员实施ELISA检测之外，配合实施NAT检测具有重要的意义。对此血站需要根据实际情况展开临床检测，合理选择具体的检测模式进行干预。选择单人份核酸检测同ELISA检测平行筛查献血者血液模式有效实施检测，最终可以有效发挥防漏互补的效果，可以将检测周期显著缩短，针对检测人员血液安全供应做出有效保证，最终有效避免出现疾病感染的现象。

［1］孙波.输血前血液筛查中新型HBV基因突变及抗原分析的研究［D］.济南：山东大学，2013：1059-1061.

［2］程卫芳，段有红，周学勇，等.2种核酸检测平台在与ELISA平行检测中的应用［J］.中国输血杂志，2013（12）：1235-1237.

［3］王立林，卢亮，聂冬梅，等.2种核酸筛查系统对血清学阳性献血者检测结果的分析［J］.中国输血杂志，2015（9）：1090-1093.

［4］于志军，邓雪莲，高慧卉，等.血清学检测与核酸检测在献血者血液筛查中的相关性研究［J］.实用预防医学，2014（5）：532-534.

［5］王庆敏，蒋昵真，黄成垠.单采血小板样本混样核酸与酶免平行检测结果分析［J］.临床输血与检验，2016（3）：217-220.

［6］朱为刚，王立林，聂冬梅，等.核酸检测试剂cobas MPX v2.0降低输血HBV残余风险的评估［J］.中国输血杂志，2016（6）：574-577.

［7］詹少兵.HIV-1 P24抗原免疫PCR检测及其适配子筛选应用&HPV血清学检测方法研究［D］.北京：中国疾病预防控制中心，2013：1025-1027.

Evaluation of Effect of Nucleic Acid Test and Enzyme Immunoassay Test in the Parallel Screening of Blood

LI Yu-quan
Department of Clinical Laboratory，the Blood Center of Baishan City，Baishan，Jilin Province，134300 China

Objective To study and analyze the application value of nucleic acid test and enzyme immunoassay test in the screening of blood.Methods 39236 pieces of blood specimens of blood donors in the department of clinical laboratory in blood station from June 2010 to August 2016 were selected as the experimental objects，and the blood samples of all blood donors were respectively tested by ELISA and NAT，and the ELISA test items mainly included HBsAg test，anti-HIV test and anti-HCV test，and the final clinical test results were compared and analyzed.Results In all specimens，the test positive rates of NAT，ELISA and NAT combined with ELISA were respectively 0.56%，0.51%and 0.40%，ELISA test was negative，the positive rate of NAT was 0.16%，and the analysis of test results showed that HBV-DNA was in 27 cases，HCVRNA was in 2 cases，and negative NAT and positive ELISA was in 42 specimens，accounting for 0.11%，and the analysis of positive ELISA dual wavelength and positive NAT showed that the positive coincidence rate reached 78.9%，the positive coincidence rate of HBsAg and NAT reached 80.3%，and the positive coincidence rate of anti-HCV and NAT was 66%and the anti-HIV dual wavelength and NAT positive coincidence rate reached 100%.Conclusion In the implementation course of blood parallel screening，the effective choice of NAT method and ELISA method can effectively give play to the features of leak-proof and complementation，effectively shorten the blood test window phase of blood donors，and effectively ensure the blood safety and safety of blood parallel screening.

Nucleic acid test；Enzyme immunoassay test；Parallel screening of blood

R7

A

1672-5654（2016）10（b）-0092-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.29.092

李玉泉（1968.2-），女，吉林白山人，本科，中级，研究方向：血站检验。

（2016-07-14）