MYH9在大肠癌中的表达及临床意义

杨素丽,谢 风,孙景春,杨照微，王 海

(吉林大学中日联谊医院 检验科，吉林 长春130033)



MYH9在大肠癌中的表达及临床意义

杨素丽,谢 风,孙景春,杨照微，王 海*

(吉林大学中日联谊医院 检验科，吉林 长春130033)

目的 探讨非肌肉肌球蛋白ⅡA在大肠癌癌组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测MYH9蛋白在90例大肠癌及相应癌旁组织中的表达，探讨MYH9在不同阶段大肠癌中表达及其与临床病理特征的相关性。结果 MYH9蛋白在大肠癌组织中阳性表达强度明显高于癌旁组织(P<0.05)。并且其表达水平与TNM分期、有无淋巴结转移及细胞分化程度显著相关(P<0.05)，而与患者的年龄、性别、肿瘤类别无关(P>0.05)。结论 MYH9在大肠癌中表达上调，并且与肿瘤恶性临床病理特征有关。

非肌肉肌球蛋白ⅡA；大肠癌；浸润；转移

(ChinJLabDiagn,2016,20:1652)

大肠癌(Colorectal cancer,CRC)是全球范围内发病率和死亡率较高的疾病之一，总的五年生存率小于65%，并且一般疾病诊断时已处于晚期阶段，导致治疗成功率受到了很大的限制。有报道显示，25%的患者诊断时已经发生了转移[1]。探寻大肠癌特异性表达的标志物可以为大肠癌诊治提供可靠的依据。本文着重研究MYH9，编码非肌肉肌球蛋白重链IIA[2]。肌球蛋白超家族有15类，肌球蛋白II，是常规的双头肌球蛋白，可以形成两级细丝，直接参与调节非肌肉细胞细胞质分裂，细胞运动及细胞形态。由于MYH9有助于细胞极化，连接，分离和转移[3,4]，有研究指出MYH9在肿瘤细胞的迁移、侵袭和转移中发挥重要作用[5,6]。且MYH9的过表达与食管癌、膀胱癌及胃癌的预后有直接关系[7-9]。Ken Katono等[10]研究表明MYH9在肺癌组织中高表达与瘤内血管浸润及淋巴结转移有关，并且可作为非小细胞肺癌预后的独立危险因素,说明MYH9在肿瘤浸润转移及预后判断方面具有一定的价值。但是，MYH9对人大肠癌细胞浸润和转移的影响尚不完全清楚，为了进一步研究MYH9蛋白表达与大肠癌的关系，本研究通过免疫组织化学方法检测MYH9蛋白在90例大肠癌及相应癌旁组织中的表达，来探讨MYH9在不同阶段大肠癌中表达及其与临床病理特征的相关性。

1 材料和方法

1.1 研究对象

本研究收集了2014年10月-2015年10月在吉林大学中日联谊医院因大肠癌住院接受手术治疗的90例患者的大肠癌组织及相应癌旁组织，男60例，女30例，年龄30-81岁，中位年龄60岁，其中结肠癌59例，直肠癌31例。所有患者术前未行放、化疗，术后有明确的病理诊断。切下的组织标本经甲醛固定，石蜡包埋制成3 μm厚的石蜡切片。脱蜡后用苏木精和伊红染色。

1.2 试剂

兔抗人MYH9蛋白单克隆抗体及免疫组织化学试剂盒购于美国cusabio公司。

1.3 方法

按试剂盒说明书操作。已明确MYH9蛋白表达阳性片作为阳性对照，用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.4 结果判断

结果判断严格按照试剂盒说明书判断标准执行：细胞胞浆中出现特异性免疫染色为阳性。A：按照显色细胞比例记分，阳性细胞数占≤1/3为1分，阳性细胞数占1/3-2/3为2分，阳性细胞数比例≥2/3为3分。B：按照细胞显色强度记分，无阳性反应细胞为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。积分数=A×B。积分数为0判断为(-)，积分数1-2判断为(+)，积分数3-4判断为(++)，积分数6-9判断为(+++)。

1.5 统计学分析

统计学分析用SPSS 18.0版本执行，组间比较采用U检验，χ2检验分析MYH9蛋白表达与大肠癌临床病理特征的相关性。P值<0.05表明差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MYH9在大肠癌及相应癌旁组织中表达

MYH9蛋白在大肠癌组织中阳性定位在胞浆中，以中等阳性为主。结果如图1，统计学结果显示，大肠癌组织中MYH9阳性表达率约88.9%(80/90)，而癌旁组织中MYH9阳性表达率约20.0%(18/90)，MYH9蛋白在大肠癌组织中阳性表达强度明显高于癌旁组织(P<0.001)。见表1。

表1 MYH9在大肠癌及癌旁组织中的表达(例)

注：*P<0.001

2.2 MYH9表达与临床病理特征的关系

大肠癌组织中MYH9蛋白表达情况与相应的临床病理特征进行相关性分析，统计学结果显示，结肠癌和直肠癌中MYH9蛋白表达差异无显著性(χ2=0.197，P=0.657)。低TNM分期(Ⅰ+Ⅱ期)与高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期)MYH9蛋白差异有显著性(χ2=10.87，P=0.001)。有淋巴结转移的肿瘤组织与无淋巴结转移的肿瘤组织中MYH9蛋白差异有显著性(χ2=18.70，P<0.001)。低分化肿瘤与高中分化肿瘤组织中MYH9蛋白差异有显著性(χ2=6.41，P=0.011)。MYH9蛋白表达情况与患者的年龄、性别、肿瘤类别无关(P>0.05)。见表2。

正常组织低倍镜下观察结果(200×)，大肠癌组织高倍镜下观察结果(200×)

3 讨论

研究结果表明，MYH9在大肠癌中表达阳性率为88.9%(80/90)，并且其表达情况与临床TNM分期及有无淋巴结转移显著相关，而与患者的年龄、性别、肿瘤类别无关。此结果与其在食管癌、膀胱癌及胃癌[7-9]中研究结果相一致。因此，MYH9的表达与患者预后直接相关，可以作为大肠癌患者独立预后因素。

局部微环境浸润是肿瘤转移早期阶段的重要步骤，MYH9有利于这种转移需要的局部微环境入侵。有体外实验表明，MYH9表达缺乏的细胞迁移能力弱[11]。板状伪足结构对边缘细胞迁移是必不可少的，而此结构由Rac、WAVE 复合物及Arp2/3复合物调控。近期，Morimura等研究表明MYH9对板状伪足结构连接到WAVE2必不可少[12]。因此，MYH9表达可能与肿瘤细胞获得侵袭和转移能力有关，随后导致肿瘤内淋巴血管侵袭以及较差的预后。此与本研究结果MYH9表达与有无淋巴结转移显著相关相一致。

表2 大肠癌组织中MYH9蛋白的表达与临床病理特征的关系(n=90)

注：*P<0.001

本研究结果显示MYH9表达与肿瘤分化程度显著相关。低分化肿瘤以细胞质容易分裂为特征，在细胞质分裂时，细胞形成一个收缩环压缩质膜形成两个以胞质桥连接的子代细胞。MYH9有利于收缩环的收缩，在细胞质分裂中有重要作用[13]。因此，也验证了本研究MYH9表达与肿瘤分化程度显著相关。

综上所述，MYH9在大肠癌组织中异常高表达，并且其表达水平与肿瘤TNM分期、有无淋巴结转移及肿瘤细胞分化程度显著相关。因此，MYH9有望成为大肠癌诊断及预后判断的分子标志物。本研究仅仅采用免疫组化的方法对MYH9在大肠癌组织中的表达进行了研究，而在其他肿瘤及血清中的表达还需要进一步研究。

[1]Bujanda L,Sarasqueta C,Hijona E,et al.Colorectalcancer prognosis twenty years later[J].World J Gastroenterol，2010,16:862.

[2]Palandri F,ZoliM,Polverrelli N,et al.MYH9-related thrombocytopenia and intracranial bleedings:a complex clinical/surgical management and review of the literature[J].Br J Haematol,2015,170(5):729.

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[6]Derycke L,Stove C,Vercoutter-Edouart AS,et al.The role of non-muscle myosin IIA in aggregation and invasion of human MCF-7 breast cancer cells[J].Int J Dev Biol,2011,55:835.

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[10]Ken Katono,Yuichi Sato,Shi-Xu Jiang,et al.Prognostic Significance of MYH9 Expressionin Resected Non-Small Cell Lung Cancer[J].PLOS ONE,2015,10(3):1.

[11]Derycke L,Stove C,Vercoutter-Edouart AS,et al.The role of non-muscle myosin IIA in aggregation and invasion of human MCF-7 breast cancer cells[J].Int J Dev Biol,2011,55:835.

[12]Morimura S,Suzuki K,Takahashi K.Nonmuscle myosin IIA is required for lamellipodia formationthrough binding to WAVE2 and phosphatidylinositol 3,4,5-triphosphate[J].Biochem Biophys Res Commun,2011,404:834.

[13]Matsumura F.Regulation of myosin II during cytokinesis in higher eukaryotes[J].Trends Cell Biol,2005,15:371.

Expressions and significance of MYH9 in colorectal cancer

YANGSu-li,XIEFeng,SUNJing-chun,etal.

(DepartmentofClinicalLaboratory,China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity,Changchun130033,China)

Objective To establish the expressions and significance of MYH9 in colorectal cancer.Methods The expression of MYH9 were detected in 90 cases colorectal cancer and adjoining colorectal tissues by immunohistochemical method,and the relationship between MYH9 expression and the clinical pathological features were analyzed by Pearson chi-square test.Results MYH9 expression was significantly increased in colorectal cancer than adjoining colorectal tissues(P<0.05).Meanwhile,the expression of MYH9 in colorectal cancer was related to different TNM stages,lymphnode metastasis and tumor differentiation(P<0.05).But the expression of MYH9 had no relationship with patient’s age,sex and tumor types(P>0.05).Conclusion MYH9 expression was significantly increased in colorectal cancer,and had a closed relationship with the clinical pathological features.

MYH9;colorectal cancer;invasion;metastasis

吉林省科技发展项目(20140414005GH，20140311092YY，

1007-4287(2016)10-1652-03

R735.3+4

A

2016-01-15)

20150101153JC)

*通讯作者