环氧合酶2和血管内皮生长因子C在直肠癌组织中的表达及其临床意义

周国江,赵子龙,杨 勇,任玉峰,程 肇,王 娟

(安康市中心医院 病理科，陕西 安康725000)



*通讯作者

环氧合酶2和血管内皮生长因子C在直肠癌组织中的表达及其临床意义

周国江,赵子龙*,杨 勇,任玉峰,程 肇,王 娟

(安康市中心医院 病理科，陕西 安康725000)

目的 研究环氧合酶2(COX-2)和血管内皮生长因子C(VEGF-C)在直肠癌中的表达及临床意义。方法 选取93例直肠癌组织标本及其癌旁正常组织标本切片进行免疫组织化学染色，测定组织中COX-2、VEGF-C的表达水平，并分析其与直肠癌临床病理特征的关系。结果 直肠癌组织标本中COX-2、VEGF-C表达的阳性率均显著高于癌旁正常组织，差异具有统计学意义(P<0.05)。COX-2、VEGF-C的表达与性别、年龄均无关(P>0.05)；与分化程度、Duke＇s分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。Spearman相关分析结果表明，直肠癌组织中COX-2、VEGF-C表达呈正相关(r=0.489，P=0.000)。结论 COX-2和VEGF-C在直肠癌组织中的表达明显升高，且与疾病的发生发展密切相关，可作为直肠癌的诊断、治疗以及预后判断重要的辅助指标。

环氧合酶2；血管内皮生长因子C；直肠癌；表达

(ChinJLabDiagn,2016,20:1649)

直肠癌是临床上常见的消化系统恶性肿瘤，其发病率呈逐年上升的趋势。直肠癌的恶性程度比较高、侵袭力较强、容易发生转移，患者的预后差，目前该病的发生机制尚不完全清楚[1,2]。环氧合酶 2(cyclooxygenase-2，COX-2)是前列腺素合成过程中的一个限速酶，有研究证实，COX-2参与多种恶性肿瘤的发生、发展过程[3]。血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C，VEGF-C)是一种与血管内皮生长因子(VEGF)同源的内皮细胞生长因子，可以诱导淋巴管内皮细胞增殖、迁移，并可以使淋巴管的通透性明显增加[4]。相关研究表明，COX-2、VEGF-C的表达与直肠癌的发生、发展有着十分密切的关系[5,6]。本研究使用免疫组织化学技术检测了93例直肠癌组织COX-2和VEGF-C的表达，初步探讨其表达在直肠癌发生、发展中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 病理标本来自2013年6月至2015年8月我院病理科保存的术中病理切片诊断明确的直肠癌标本93例，另取93例癌旁正常组织标本(距离癌组织6 cm以上)。患者术前均未接受任何化疗、放疗以及内分泌治疗。其中男性62例，女性31例；年龄38-79岁，平均年龄(53.6±9.2)岁；低分化53例，中高分化40例；有淋巴结转移58例，无淋巴结转移35例；Duke＇s分期：A期+B期51例，C期+D期42例。

1.2 主要试剂 鼠抗人COX-2即用型单克隆抗体(购自福州迈新生物技术开发有限公司)，山羊抗人VEGF-C多克隆抗体(稀释浓度1∶100)、兔超敏二步法免疫组织化学检测试剂盒以及DAB显色试剂盒(均购自福州迈新生物技术开发有限公司)。

1.3 检测方法 按试剂盒说明书操作。阳性对照采用已知COX-2、VEGF-C阳性表达的直肠癌组织切片；阴性空白对照采用PBS缓冲液代替一抗。

1.4 结果判断 对COX-2、VEGF-C的表达水平进行半定量评估。显微镜下计算阳性表达细胞所占的百分数，对出现染色的细胞进行染色程度评判，最后将两个得分相加。①阳性细胞的染色强度：分别按照无着色、淡黄色、棕黄色以及棕褐色程度计分为0、1、2、3分；②阳性细胞数不足5%为0分；阳性细胞数在5%-25%之间为1分，阳性细胞数在26%-50%之间为2分，阳性细胞数在51%-75%之间为3分，阳性细胞数超过75%为4分。得分结果判断：0分为阴性(-)，1-2分为阳性(+)，3-6分为中度阳性(++)，7分及以上为强阳性(+++)。

1.5 统计学方法 数据资料的统计学分析使用SPSS17.0软件系统进行，数值变量类资料使用独立样本资料的t检验或配对t检验，计数资料使用R×C列联表的χ2检验；相关性分析采用Spearman秩相关检验。若P<0.05，则判断差异有统计学意义。

2 结果

2.1 观察组及对照组阳性率

如表1所示，直肠癌组织标本中COX-2、VEGF-C表达的阳性率均显著高于癌旁正常组织，差异经χ2检验有统计学意义(P<0.05)。

表1 两组COX-2、VEGF-C阳性率比较(n，%)

注：与对照组比较，aP<0.05。

2.2 COX-2、VEGF-C表达与食管癌临床病理特征的关系

如表2所示，COX-2、VEGF-C的表达与性别、年龄均无关(P>0.05)；与分化程度、Duke＇s分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。

2.3 直肠癌组织中COX-2、VEGF-C表达的相关性

如表3所示，Spearman相关分析结果表明，直肠癌组织中COX-2、VEGF-C表达呈正相关(r=0.489，P=0.000)。

表2 COX-2、VEGF-C表达与直肠癌临床病理特征的关系

表3 直肠癌组织中COX-2、VEGF-C表达的相关性

3 讨论

COX-2是前列腺素合成过程中的一种限速酶，在正常的组织中几乎不表达，但是，在细胞因子、生长因子和癌基因等具有促癌作用的因子作用下，它的表达出现不同程度的上调，并参与肿瘤的发生、发展过程[7,8]。

肿瘤新生血管的形成是实体肿瘤生长、转移必须的条件。近年来的研究发现[9]，COX-2可以通过促进血管生成，从而对肿瘤的生长、转移和浸润造成影响。VEGF-C是一种重要的促淋巴管生成因子，它对于血管和淋巴管的生成具有至关重要的作用，可以与血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)作用从而影响血管的生成过程，与VEGFR-3作用可以影响淋巴管的生成过程[10-11]。实验表明[12]，VEGF-C是COX-2的下游效应基因，COX-2可以使VEGF-C的表达上调，其中，COX-2的催化产物PGE2起着十分重要的介导作用。本研究结果表明，直肠癌组织标本中COX-2、VEGF-C表达的阳性率均显著高于癌旁正常组织标本(P<0.05)；相关分析结果表明，直肠癌组织中COX-2、VEGF-C表达呈正相关(P<0.05)。

肿瘤的侵袭和转移是重要的生物学特征，也是导致直肠癌患者死亡的主要原因之一[13]。恶性肿瘤的侵袭和转移是一个多因子、多基因共同参与的病理过程。在内毒素、生长因子、激素以及肿瘤促进因子等的作用下，COX-2可以高表达，从而可以促进VEGF-C的表达。VEGF-C主要在直肠癌细胞中表达，在肿瘤血管内皮细胞中并没有明显的表达。因此，可以推测VEGF-C主要是通过旁分泌作用来诱导肿瘤血管及淋巴管的形成，促进肿瘤细胞的生长、转移，同时可能作为一种自分泌生长调节因子直接促进肿瘤细胞的生长[14，15]。本研究结果表明，COX-2、VEGF-C的表达与分化程度、临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。提示COX-2、VEGF-C阳性表达的直肠癌恶性度较高，比较容易发生淋巴结转移，患者的预后较差。因此，COX-2、VEGF-C的高表达与直肠癌淋巴转移有关，从而对患者的生存造成影响。检测其表达水平有助于判断直肠癌淋巴转移以及患者的预后[16]。

[1]符 炜,李爱娜,王玉兰.CCX-CKR与VEGF-C在人直肠癌中的表达及临床意义[J].安徽医科大学学报,2012,47(2):178.

[2]Ferlay J,Autier P,Boniol M,et al.Estimates of the cancer incidence and mortality in Europe in 2006[J].Ann Oncol,2007,18(3):581.

[3]Gately S,Kerbel R.Therapeutic potential of selective cyclooxygenase-2 inhibitors in the management of tumor angiogenesis[J].Prog Exp Tumor Res,2003,37:179.

[4]Timoshenko AV1,Rastogi S,Lala PK.Migration-promoting role of VEGF-C and VEGF-C binding receptors in human breast cancer cells[J].Br J Cancer,2007,97(8):1090.

[5]危芬兰,王胜德.HIF-1a、COX-2在直肠癌组织中的表达及其临床意义[J].上海医药,2015,36(19):50.

[6]胡 强,周利红,刘 宣,等.HIPK2调控COX-2及β-catenin表达对人结直肠癌细胞VEGF表达的影响[J].世界华人消化杂志,2014,22(9):1266.

[7]孙玉成,金恩鸿.CGA与COX-2在直肠癌中的表达及临床意义[J].中国癌症防治杂志,2015,7(4):287.

[8]Zhang H,Sun XF.Overexpression of cyclooxygenase-2 correlates with advanced stages of colorectal cancer[J].Am J Gastroenterol,2002,97(4):1037.

[9]张王娜,万义增,陈素贤.k-ras蛋白和环氧合酶-2在结直肠癌中的表达及意义[J].广东医学,2012,33(22):3454.

[10]Veikkola T,Jussila L,Makinen T,et al.Signalling via vascular endothelial growth factor receptor-3 is sufficient for lymphangiogenesis in transgenic mice[J].EMBO J,2001,20(6):1223.

[11]Zafirellis K,Agrogiannis G,Zachaki A,et al.Prognostic significance of VEGF expression evaluated by quantitative immunohistochemical analysis in colorectal cancer[J].J Surg Res,2008,147(1):99.

[12]王爱亮,刘志强,陆信仰,等.直肠癌中环氧化酶2、血管内皮生长因子C的表达及与血管生成、淋巴管生成相关性的研究[J].中华临床医师杂志(电子版),2012,6(5):1300.

[13]董新舒,李志高,徐海涛.直肠癌综合治疗的现状及进展[J].大肠肛门病外科杂志,2004,10:235.

[14]曾昭明,刘 杰,先雄斌,等.人直肠癌血管内皮生长因子-C的表达及其意义[J].重庆医学,2011,40(5):425.

[15]李靖涛,赵洪川,高 春,等.CTHRC1和VEGF-C在直肠癌组织中的表达及相关性[J].世界华人消化杂志,2009,17(13):1318.

[16]刘 志,赵春清,闫 威,等.VEGF与环氧合酶-2在直肠癌组织中的表达及意义[J].山东医药,2014,54(22):77.

Expression and clinical significance of cyclooxygenase 2 and Vascular Endothelial Growth Factor C In Colon cancer

ZHOUGuo-jiang,ZHAOZi-long,YANGYong，etal.

(DepartmentofPathology,AnkangCentralHospital,Ankang725000,China)

Objective To study the expression and clinical significance of cyclooxygenase 2 and Vascular Endothelial Growth Factor C In Colon cancer.Methods 93 cases of Colon cancer tissues and adjacent normal tissue specimens sections by immunohistochemical staining.The expression level of COX-2 and VEGF-C in tissue was determined.Studied its relationship with clinicopathological features of colorectal cancer.Results The positive rates of VEGF-C and COX-2 expression in rectal cancer tissues were significantly higher than that in normal adjacent tissues,and the difference was statistically significant (P<0.05).The expression of VEGF-C and P was not related to sex or age (P>0.05).It was related to the degree of differentiation,Duke's stage and lymph node metastasis (P<0.05).Spearman correlation analysis showed that the expression of COX-2 and VEGF-C in rectal cancer was positively correlated(r=0.489,P=0.000).Conclusion The expression of COX-2 and VEGF-C in colon cancer tissue was significantly increased,and it was closely related to the occurrence and development of colon cancer.It can be used as an important auxiliary index to guide clinical diagnosis,treatment and prognosis of colon cancer.

cyclooxygenase 2;Vascular Endothelial Growth Factor C;Colon cancer;expression

1007-4287(2016)10-1649-03

R735.3+7

A

2015-12-28)