ST段抬高性急性心肌梗死患者循环血管内皮祖细胞及内皮生长因子与心功能的关系

曹志伟

（河北省唐山市滦县人民医院心内科，河北唐山067000）

ST段抬高性急性心肌梗死患者循环血管内皮祖细胞及内皮生长因子与心功能的关系

曹志伟

（河北省唐山市滦县人民医院心内科，河北唐山067000）

目的探讨ST段抬高性急性心肌梗死患者外周血循环血管内皮祖细胞和血清血管内皮生长因子水平与心功能不同分级的关系。方法选择2012年4月至2014年10月医院心内科确诊的ST段抬高性急性心肌梗死患者150例，采用流式细胞仪检测患者循环血管内皮祖细胞，以酶联免疫吸附法检测血管内皮生长因子的表达水平，并采用Pearson相关性分析其与心功能的关系。结果Pearson相关性分析表明，外周血循环血管内皮祖细胞和血清血管内皮生长因子水平均与心功能呈正相关（r=0.006 8，P=0.001）。病程12～24 h患者循环血管内皮祖细胞与血管内皮生长因子显著高于病程＜12 h患者，差异显著有统计学意义（P＜0.05）；病程24～48 h患者循环血管内皮祖细胞与血管内皮生长因子显著高于病程14～24 h患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。按心功能Killip分级，ST段抬高性急性心肌梗死患者循环血管内皮祖细胞与血管内皮生长因子水平从低到高依次为Ⅳ级＜Ⅰ级＜Ⅲ级＜Ⅱ级，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论循环血管内皮祖细胞与血清血管内皮生长均与ST段抬高性急性心肌梗死发病呈正相关，心功能不全会减少循环血管内皮祖细胞与血清血管内皮生长的分泌与激活。

冠状动脉粥样硬化性心脏病；急性心肌梗死；ST段抬高性；循环血管内皮祖细胞；血管内皮生长因子

心肌梗死多发于中老年，可严重影响患者身体健康和生活质量，其主要病因是冠状动脉粥样硬化、管腔狭窄、血栓形成等［1］。ST段抬高性急性心肌梗死是心肌发生严重且持久的缺氧或坏死，冠状动脉粥样硬化斑块破裂导致血管管腔狭窄或心肌供血减少和中断［2-3］。研究表明，内皮祖细胞和血管内皮生长因子在心肌急性缺血和再灌注损伤及修复中具有重要作用［4］。内皮祖细胞是成熟血管内皮细胞的前体，最早在外周血中被发现，随后证实其起源于骨髓。循环血管内皮祖细胞是特异性的血管内皮生长因子R-2受体，不仅可自我更新，还可在缺血和缺氧条件下分泌血管内皮生长因子。研究发现，冠状动脉粥样硬化性心脏病（简称冠心病）患者血清血管内皮生长因子可升高［5-6］。本研究中探讨了ST段抬高性急性心肌梗死患者外周血循环血管内皮祖细胞和血清血管内皮生长因子水平与心功能不同分级的关系，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

纳入标准［7］：心电图显示ST段抬高性急性心肌梗死样改变；冠状动脉造影显示1支以上冠状动脉存在严重狭窄（＞75%）甚至完全闭塞；临床表现为心悸、胸闷、胸痛；既往未经冠状动脉介入治疗或旁路移植手术治疗。本研究经本院伦理委员会审批（批号为20120206），所有入组患者均签署知情同意书。

排除标准［7］：合并瓣膜性心脏病；肝、脑、肺、肾及血液系统慢性疾病；心肌病、心肌炎等心脏疾病；全身免疫性疾病；外周血管疾病；全身或局部感染性疾病；手术创伤。

病例选择：选择2012年4月至2014年10月我院心内科确诊的ST段抬高性急性心肌梗死患者150例，其中男82例，女68例；年龄35～71岁，平均（56.4± 8.7）岁。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表1。

表1　患者一般资料比较

1.2方法

收集纳入研究对象的患者年龄、性别、就诊时间等资料，心功能评价采取Killip心功能分级方法。分别于就诊后检测外周血循环血管内皮祖细胞和血清血管内皮生长因子，并进行心功能评价。

采用抗凝管空腹取静脉血3 mL，采用流式细胞仪检查患者外周血循环血管内皮祖细胞［8］。循环血管内皮祖细胞的判断标准为CD34+/KDR+双阳性。将20 μL CD45抗体（武汉华美生物工程有限公司提供）加入到含100 μL外周血的离心管中；依次将20 μL FITC鼠抗人单克隆CD34+抗体（武汉华美生物工程有限公司提供），20 μL PE-KDR/VEGFR-2鼠抗人单克隆抗体（武汉华美生物工程有限公司提供）加入并混匀；避光室温孵育20 min；加入1 000 μL专用红细胞溶解液，避光室温孵育20 min；以2 000 r/min离心5 min，弃去上清液后加入500μL生理盐水。后以流式细胞仪（美国BD）进行检测分析。以CD34+/KDR+双阳性标记细胞的千分比代表循环血管内皮祖细胞的数量。

采用抗凝管空腹取静脉血3 mL，取血后迅速3 000 r/min离心20 min，取血清，-70℃冰箱保存。入组完成后统一采用酶联免疫吸附法检测血管内皮生长因子的表达水平［9］。试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司，试验严格按试剂说明书操作。

1.3统计学处理

采用SPSS 19.0软件进行分析。相关性分析采用Spearman等级相关检验；计数资料以%表示，行χ2检验；计量资料以±s表示，行t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1血管内皮祖细胞与血管内皮生长因子的关系

血管内皮祖细胞与血管内皮生长因子相关性Pearson分析结果表明，血管内皮祖细胞与血管内皮生长因子表达水平呈正相关（r=0.006 8，P=0.001）。病程12～24 h患者循环血管内皮祖细胞与血管内皮生长因子显著高于病程＜12 h患者，差异有统计学意义（P＜0.05）；病程24～48 h患者循环血管内皮祖细胞与血管内皮生长因子显著高于病程14～24 h组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

2.2血管内皮祖细与内皮生长因子和心功能的关系

按Killip心功能分级，不同ST段抬高性急性心肌梗死患者循环血管内皮祖细胞与血管内皮生长因子从低到高依次为Ⅳ级＜Ⅰ级＜Ⅲ级＜Ⅱ级，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2　患者外周血循环血管内皮祖细胞和血清血管内皮生长因子水平及与心功能的关系分析（±s）

表2　患者外周血循环血管内皮祖细胞和血清血管内皮生长因子水平及与心功能的关系分析（±s）

注：与病程＜12 h患者比较， P＜0.05。

项目病程＜1 2 h（n = 7 2）1 2～2 4 h（n = 4 6）2 4～4 8 h（n = 3 2）心功能Ⅰ级（n = 2 6）Ⅱ级（n = 6 3）Ⅲ级（n = 3 5）Ⅳ级（n = 2 6）血管内皮祖细胞（‰）0 . 3 5 ± 0 . 0 8 0 . 5 6 ± 0 . 1 3 0 . 6 6 ± 0 . 1 6 0 . 3 1 ± 0 . 0 9 0 . 6 7 ± 0 . 1 5 0 . 5 1 ± 0 . 1 4 0 . 2 1 ± 0 . 0 6血管内皮生长因子（ g / L）7 6 . 5 ± 1 0 . 3 1 0 4 . 8 ± 1 3 . 7 1 1 4 . 9 ± 1 4 . 1 7 8 . 1 ± 1 1 . 2 1 1 2 . 7 ± 1 4 . 3 9 0 . 4 ± 1 1 . 7 6 7 . 4 ± 8 . 1

3　讨论

ST段抬高性心肌梗死患者除冠脉病变外，还存在因纤维蛋白血栓导致的冠脉急性完全闭塞现象，因此，ST段抬高性心肌梗死患者心肌损害程度标志物变化明显［2］。急性心肌梗死患者冠状动脉闭塞后，心肌细胞即有少量坏死，2 h后绝大部分心肌呈凝固性坏死，充血水肿并伴炎症细胞浸润，心室壁梗死面积超过20%时，即可发生心脏功能下降甚至心力衰竭［10］。

循环血管内皮祖细胞中血管内皮生长因子表达不断增加，被认为是血管内皮细胞的前体细胞［11］。血管内皮生长因子是特异性最强的促血管生长因子。冠心病不仅可诱导内皮损伤及功能障碍，促进动脉粥样斑块的形成，而且能干扰阻碍循环血管内皮祖细胞的信号通路，诱发循环血管内皮祖细胞过度凋亡［12］。研究证实，冠心病患者外周血血管内皮生长因子表达可促进循环血管内皮祖细胞数量的增加，通过循环血管内皮祖细胞表面的血管内皮生长因子受体与循环血管内皮祖细胞进行信号转导，且外周血血管内皮祖细胞与血管内皮生长因子水平呈正相关［13］。因此，本研究中通过流式细胞仪检测患者循环血管内皮祖细胞，以酶联免疫吸附法检测血管内皮生长因子的表达水平，探讨ST段抬高性急性心肌梗死患者外周血循环血管内皮祖细胞和血清血管内皮生长因子水平与心功能不同分级的关系。

血管内皮祖细胞作为血管内皮细胞的前体，参与血管形成，在病理状态下也能被动员，增加血管重建。在缺血、血管损伤等刺激下血管内皮祖细胞向外周血迁移，分化内皮细胞，形成新生血管，以达到缓解缺血和修复血管的作用［14-15］。本研究结果发现，ST段抬高性急性心肌梗死患者就诊时外周血循环血管内皮祖细胞数量与心功能有关系。病程12～24 h患者循环血管内皮祖细胞数量高于病程＜12 h患者，病程24～48 h患者循环血管内皮祖细胞数量高于病程14～24 h组。ST段抬高性急性心肌梗死患者循环血管内皮祖细胞数量小到大依次为KillipⅣ级＜Ⅰ级＜Ⅲ级＜Ⅱ级。在生理条件下，周细胞、血管内皮细胞、胶质细胞、视网膜色素上皮细胞和神经节细胞等均可表达低水血管内皮生长因子。缺血和缺氧等刺激时，血清中血管内皮生长因子水平升高，可促进血管新生和侧支循环形成［16］。

本研究结果显示，随着就诊时间延长，外周血循环血管内皮祖细胞数量与血清中血管内皮生长因子表达水平不再继续升高，说明缺血缺氧刺激在较短时间内就可促进血管内皮生长因子分泌和血管内皮祖细胞活化。随着就诊时间的延长，血管内皮祖细胞数量与血清中血管内皮生长因子表达水平增加变缓，说明持续的缺血缺氧刺激，可导致血管内皮生长因子分泌和血管内皮祖细胞活化。其可能机制为发病后心肌循环缺血缺氧程度发生改变，内皮细胞能够大量分泌释放血管内皮生长因子，进而促进内皮细胞增殖。

综上所述，循环血管内皮祖细胞与血清血管内皮生长均与ST段抬高性急性心肌梗死发病呈正相关，心功能不全会减少循环血管内皮祖细胞与血清血管内皮生长的分泌与激活。

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Relationship between Circulating Vascular Endothelial Progenitor Cells with Vascular Endothelial Growth Factor and Cardiac Function in Patients with ST Segment Elevation of Acute M yocardialInfarction

Cao Zhiwei
（Department of Cardiology，Tangshan City Luanxian people′s Hospital，Tangshan，Hebei，China067000）

ObjectiveTo investigate the relationship between circulating vascular endothelial progenitor cells with vascular endothelial growth factor and cardiac function in patients with ST segment elevation of acute myocardial infarction.M ethods150 cases of patients with ST segment elevation of acute myocardial infarction in April 2012 to October 2014 in heart internal medicine department of the hospital were seleceted to collect the clinical data，and the vascular endothelial progenitor cells were detected using flow cytometry，vascular endothelial growth factor expression level was detected using enzyme-linked immunosorbent adsorption method，and its relationship with heart function was analyzed using Pearson correlation.ResultsPearson correlation analysis showed that peripheral blood circulation vascular endothelial progenitor cells and serum VEGF levels were positively correlated with cardiac function（r=0.006 8，P=0.001）. Circulating vascular endothelial progenitor cells and vascular endothelial growth factor in duration of 12 to 24 h were significantly higher than that of course of＜12 h patients and difference was significantly significant difference（P＜0.05）；Vascular endothelial progenitor cells and vascular endothelial growth factor in course 24-48 h was significantly higher than that of course 14-24 h，the difference was significant（P＜0.05）.According to Killip classification，ST segment elevation acute myocardial infarction patients vascular endothelial progenitor cells and vascular endothelial growth factor level from low to high were as follows：gradeⅣ＜gradeⅠ＜gradeⅢ＜gradeⅡ，the differences were statistically significant difference（P＜0.05）.ConclusionCirculating endothelial progenitor cells and serum vascular endothelial growth were positively correlated with ST segment elevation of acute myocardial infarction，cardiac insufficiency can reduce circulating endothelial progenitor cells and serum vascular endothelial growth of secretion and activation.

coronary heart disease；acute myocardial infarction；ST segment elevation；circulating vascular endothelial progenitor cells；vascular endothelial growth factor

R363；R542.2+2

A

1006-4931（2016）17-0093-03

曹志伟（1980-），男，河北唐山人，大学本科，主治医师，主要从事临床心内科工作，（电子信箱）15373529618@163.com。

（2016-04-13；

2016-05-03）