血清AFP、AFU、GP73及SF联合检测在原发性肝癌早期诊断中应用价值分析

宫英博，李立文

（1.中国医科大学，辽宁沈阳110000；2.华北理工大学附属医院，河北唐山063015）

血清AFP、AFU、GP73及SF联合检测在原发性肝癌早期诊断中应用价值分析

宫英博1，李立文2

（1.中国医科大学，辽宁沈阳110000；2.华北理工大学附属医院，河北唐山063015）

目的 探讨血清甲胎蛋白（AFP）、α-L-岩藻糖苷酶（AFU）、高尔基体蛋白73（GP73）及铁蛋白（SF）四者联合检测在原发性肝癌（PHC）早期诊断中的应用价值。方法 选取2014年10月至2015年10月华北理工大学附属医院收治的60例PHC患者作为观察组，并选取同一时期我院收治的40例肝炎肝硬化患者作为疾病对照组，及40例健康志愿者作为健康对照组，采用酶联免疫法（ELISA）分别检测三组入选者血清AFP、AFU、GP73及SF水平。结果 观察组患者血清AFP、AFU、GP73及SF水平均显著高于疾病对照组与健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组患者AFP、AFU、GP73、SF及四者联合检测的阳性率均显著高于疾病对照组与健康对照组的检测阳性率，差异有统计学意义（P＜0.05）；在PHC的诊断中，AFP、AFU、GP73及SF四者联合检测的灵敏度为95.0%，显著高于四者单独检测的灵敏度65.0%、73.3%、78.3%、61.7%，同时上述四指标联合检测的特异度为67.5%，显著低于四者单独检测的灵敏度76.3%、77.5%、78.8%、83.8%，差异均有统计学意义（P＜0.05）；而四指标联合检测的准确度略高于单独检测，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 血清AFP、AFU、GP73及SF检测对原发性肝癌的诊断均具有较好的临床价值，而AFP、AFU、GP73及SF四者联合检测能够显著提高检测的灵敏度，对PHC的早期诊断具有重要的临床意义。

甲胎蛋白； α-L-岩藻糖苷酶； 高尔基体蛋白73； 铁蛋白； 原发性肝癌

原发性肝癌（PHC）是一种在世界范围内常见的恶性肿瘤之一，又称肝癌，具有恶性程度高、侵袭力强、死亡率高及严重影响患者生存质量等特点，其病死率居全球恶性肿瘤死亡率的第三位，而在我国更是高居第二位，仅次于肺癌［1-2］。此外，我国肝癌患者人数约占全球肝癌患者的55%，并且其病死率正逐年上升［3］。同时由于B超、CT、MRI及血管造影等常规临床检测不能有效检出肝癌的早期病灶，绝大多数患者在确诊时已属肝癌中晚期，失去了最佳的手术治疗时间，导致其临床疗效差，死亡率居高不下［4］。因此寻找一种有效的 PHC早期诊断手段成为提高临床疗效及延长患者生存期的有效手段之一，随着免疫学技术及分子生物学的不断进展，肿瘤标志物检测在PHC早期诊断方面的研究发展十分迅速，单项指标检测及多项指标联合检测在临床上较为常用，但因单项指标检测的局限性，众多研究者更倾向于多项肿瘤标记物的联合检测，以达到及早发现、及早治疗的目的。本研究通过检测PHC患者、良性肝病患者与健康志愿者血清AFP、AFU、GP73及SF表达水平，探讨 AFP、AFU、GP73及SF四者联合检测在PHC早期诊断中的价值。

材料和方法

1 一般资料

入选2014年10月至2015年10月华北理工大学附属医院（实习）收治的PHC患者60例作为观察组，其中男41例，女19例，年龄31～76岁，平均年龄49.5±4.3岁；肝炎肝硬化患者40例作为疾病对照组，其中男27例，女13例，年龄30～74岁，平均年龄47.8±4.2岁；另选同时期于我院进行体检的健康志愿者40例作为健康对照组，其中男26例，女14例，年龄29～77岁，平均年龄48.6±4.5岁。所有入选的原发性肝癌及肝炎肝硬化患者均符合《原发性肝癌诊疗规范》［5］与《慢性乙型肝炎防治指南》［6］中的相关诊断标准，同时排除其他严重心肝肾疾病及其他恶性肿瘤者；所有入选的健康志愿者均经健康检查，显示其心肝肾等重要器官均正常，且排除甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒感染。以上三组一般资料组间比较差异无统计学意义（P＞0.05），组间可比。

2 方法

分别抽取三组待测者的清晨空腹静脉血，分离获得其血清，分别通过相应的ELISA试剂盒检测三组的血清AFP、AFU、GP73及SF水平，其中APF、AFU、GP73及SFELISA试剂盒分别购自上海拜力生物科技有限公司、南京森贝伽生物科技有限公司、上海润裕生物科技有限公司及上海信裕生物科技有限公司，上述试验操作均严格按照试剂盒及相关仪器说明书进行。其中分别以AFP＞20μg/L，AFU＞40U/L，GP73＞150μg/L，SF男＞240μg/L、女＞150μg/L为阳性计算其阳性率。

3 统计学处理

研究数据均采用SPSS19.0软件进行分析，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，不符合正态分布的计量资料则采用中位数表示，采用t检验或Fisher’s精确检验；计数资料以率表示，采用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 三组血清AFP、AFU、GP73及SF表达水平

观察组患者血清AFP、AFU、GP73及SF水平均显著高于疾病对照组与健康对照组，且疾病对照组AFP、GP73水平显著高于健康对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；而疾病对照组和健康对照组AFU、SF表达水平组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

2 三组各标志物单独及联合检测阳性率

观察组患者AFP、AFU、GP73及SF检测的阳性率，疾病对照组上述各指标检测的阳性率，健康对照组阳性率，观察组、疾病对照组及健康对照组上述四指标联合检测的阳性率分别见表2。观察组患者AFP、AFU、GP73、SF及四者联合检测的阳性率显著高于疾病对照组与健康对照组上检测的阳性率，差异均有统计学意义（P＜0.05）。

表2 三组血清标志物AFP、AFU、GP73、SF单独及联合检测阳性率比较［n（%）］

3 各血清标志物对PHC的诊断价值分析

在PHC的诊断中，AFP检测的灵敏度、特异度及准确度分别为65.0%（39/60）、76.3%（61/80）、71.4%（100/140）；AFU检测的灵敏度、特异度及准确度分别为73.3%、77.5%、75.7%；GP73检测的灵敏度、特异度及准确度分别为78.3%、78.8%、78.6%；SF检测的灵敏度、特异度及准确度分别为61.7%、83.8%、74.3%；上述四种血清标志物联合检测的灵敏度、特异度及准确度分别为95.0%、67.5%、79.3%。相比单独检测来说，四者联合检测的灵敏度有所提升，而特性度有所下降，差异均有统计学意义（P＜0.05）；而准确度稍微提升，但差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

表3 各血清标志物单独与联合检测的灵敏度、特异度及准确度比较（%）

讨 论

PHC作为一种病死率位居我国恶性肿瘤死亡率第二的恶性肿瘤，由于其早期无明显的临床症状及缺乏有效的诊断方法，大多数患者在确诊时已为癌症中晚期，丧失了最佳的手术治疗时期。因此，寻找一种有效的PHC早期诊断日益成为广大医务人员关注的重点，其中血清肿瘤标志物的检测由于其操作简便、结果反映及时准确越来越受到大家的重视，同时多肿瘤标志物的联合检测能够有效提高检测的灵敏度，成为广大研究者关注的焦点［7-8］。

甲胎蛋白（AFP）作为一种在胚胎时期由肝脏细胞及卵黄囊细胞合成的糖原蛋白，其会在机体肝脏受损时合成分泌增多，目前普遍认为AFP是一种原发性肝癌诊断中最常用的肿瘤标志物，但其检测的灵敏度仅为40%～65%，仍存在着约为30%左右的假阴性和假阳性问题［9］。α-L-岩藻糖苷酶（AFU）则是一种广泛存在于哺乳动物细胞及体液中的溶酶体酸性水解酶，在肝肾组织中的活性最高，主要参与分解含岩藻糖基的蛋白、糖脂等多种生物活性大分子，其在PHC患者血清中的含量明显升高，虽然出现此现象的机理尚未研究透彻，但绝大多数的研究结果基本一致，因此AFU可作为PHC早期诊断的检测指标之一［10-11］。而高尔基体蛋白73（GP73）作为一种高尔基体跨膜蛋白，在疾病状态下会分泌至细胞表面及细胞内，国内外的相关研究证实在PHC患者血清中的GP73水平显著上升［12-13］，因此其可作为一种PHC诊断的可靠标志物，有研究［14］表明，其诊断的灵敏性及特异性均要高于AFP。血清铁蛋白（SF）作为一种含铁离子水溶性蛋白，是机体内含铁量最丰富的蛋白之一，主要分布于机体的肝脏、脾脏、骨髓等部位，对 PHC患者血清中的 SF水平进行测定，发现在PHC患者中血清SF的水平较正常组明显升高。此外，肝炎及肝硬化患者由于其肝脏细胞受到一定程度的损伤，部分肝细胞死亡裂解，同时机体产生相应的应激反应，致使部分胞内物质及应激反应分泌产物释放入血，使得肝炎及肝硬化患者的血清AFP、AFU、GP73及SF水平也有所升高。本研究采用通过检查PHC患者、肝炎肝硬化患者与健康志愿者血清标志物AFP、AFU、GP73及SF水平，来探讨其单独及联合检测在PHC早期诊断中的价值。

本研究结果显示，观察组患者血清AFP、AFU、GP73及SF水平均显著高于疾病对照组与健康对照组，且疾病对照组AFP、GP73水平显著高于健康对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；观察组患者AFP、AFU、GP73、SF及四者联合检测的阳性率均显著高于疾病对照组与健康对照组的检测阳性率，差异有统计学意义（P＜0.05）。并在PHC诊断中，AFP、AFU、GP73及SF四者联合检测的灵敏度为95.0%显著高于四者单独检测的灵敏度65.0%、73.3%、78.3%、61.7%，同时上述四指标联合检测的特异度为67.5%显著低于四者单独检测的灵敏度76.3%、77.5%、78.8%、83.8%，差异均有统计学意义（P＜0.05）；而四指标联合检测的准确度略高于单独检测，差异无统计学意义（P＞0.05）。此外，甲胎蛋白异质体3（AFP-L3）、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）等血清肿瘤标志物指标在PHC诊断中也具有重要意义。有研究显示，血清AFP、AFP-L3、GP73及GPC-3四者联合检测的灵敏度为86.0%，低于本研究的95.0%，而其联合检测的特异度为72.5%，略高于本研究的67.5%［15］。上述结果说明，PHC患者的血清AFP、AFU、GP73及SF水平均显著高于肝炎肝硬化患者与健康人群，同时肝炎肝硬化患者AFP、GP73水平显著高于健康人群，而AFU、SF水平无明显差异，即说明，原发性肝癌的发生会导致患者血清AFP、AFU、GP73及 SF水平显著上升。因此上述四种血清标志物检测在PHC早期诊断中具有一定的价值，同时四指标联合检测能够有效提高检测的灵敏度，并且其检测的准确度也稍有提高，相比于已有研究，本研究的联合检测指标更为灵敏，虽说特异性有所下降，但四者联合检测在PHC诊断中的具有更高的临床价值。

综上所述，血清AFP、AFU、GP73及SF检测对原发性肝癌的诊断均具有较好的临床价值，而AFP、AFU、GP73及SF四者联合检测能够显著提高检测的灵敏度，且检测的准确度也稍有提升，联合检测对PHC的早期诊断具有重要的临床意义。

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（潘子昂编辑）

Diagnostic Value of Serum AFP，AFU，GP73 and SF in Patientswith Primary Hepatocellular Carcinoma

GONG Ying-bo，LILi-wen
（China Medical University，Shenyang 110000，China）

Objective To explore the diagnostic value of serum AFP，AFU，GP73 and SF in patients with primary hepatocellular carcinoma（PHC）.Methods A total of 60 cases of PHC who were treated in Affiliated Hospital of North China University during October2014 to October2015 were selected as observation group，40 cases of liver cirrhosiswho were treated in the same period was selected asdisease control group，and 40 normal volunteerswere selected ashealthy control group.ELISA method was used to detect serum AFP，AFU，GP73 and SF.Results Serum AFP，AFU，GP73 and SF in observation group were significantly higher than that of disease control group and healthy control group（P＜0.05）.The positive rate of individual AFP，AFU，GP73，SF and 4-panel testwere significantly higherin observation group than that of disease control group and health control group（P＜0.05）.In terms of diagnosis of PHC，the sensitivity of 4-panel ofAFP，AFU，GP73 and SF was 95.0%，which was significantly higher than that of individural detection（65.0%，73.3%，78.3%，61.7%，respectively，P＜0.05）.And the specificity of 4-panel test was 67.5%，which was significantly lower than that of individual detection（76.3%，77.5%，78.8%，83.8%，respectively，P＜0.05）.But the accuracy of 4-panel test just slightly higher than that of individural detection（P＞0.05）.Conclusion Serum FP，AFU，GP73 and SF are valuable in diagnosis of PHC.4-panel test of serum FP，AFU，GP73 and SF can significantly increase the sensitivity of detection，whichisworthy of further clinical application.

AFP； AFU； GP73； SF； PHC

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.06.016

2016-02-25；

2016-03-14

李立文，副主任医师。