26株猪链球菌对抗菌药物的敏感性分析

龚团莲

（内蒙古民族大学动物科技学院，内蒙古 通辽 028042）

26株猪链球菌对抗菌药物的敏感性分析

龚团莲

（内蒙古民族大学动物科技学院，内蒙古 通辽 028042）

采用纸片扩散法对兽医临床分离的26株猪链球菌进行了常用抗菌药物的敏感性分析，结果表明，猪链球菌对头孢噻肟及氨苄西林/舒巴坦敏感性最高，敏感菌株均占73.0%；其次是丁胺卡那霉素和盐酸多西环素，敏感菌株分别占57.7%和50.0%；分离菌对四环素、庆大霉素、磺胺二甲氧嘧啶表现出较强的耐药性，耐药率分别为92.3%、69.2%、69.2%；此外，分离菌对氯霉素、头孢他啶、克林霉素、磺胺嘧啶钠、复方新诺明也表现出一定的耐药性，耐药率均为57.7%。分离的猪链球菌对部分兽医临床常用抗菌药物产生了较为严重的耐药性，应引起重视。

猪链球菌；耐药性；监测

引起猪链球菌病的链球菌种类包括猪链球菌、马链球菌兽疫亚种（旧称兽疫链球菌)和类猪链球菌等。近年来，由猪链球菌2型引起的猪败血性链球菌病较为流行［1-3］。猪链球菌属于链球菌科链球菌属成员，为革兰阳性球形或卵圆形细菌，不形成芽胞，亦无鞭毛，有的可形成荚膜，呈长短不一的链状排列，需氧或兼性厌氧。在培养基中加入血液、血清及腹水等可促进其生长。在加入上述营养成分的培养基中37℃培养24 h，可形成无色露珠状细小菌落［4］。猪链球菌的致病力取决于其产生毒素和酶的能力。该菌对高温及一般消毒药抵抗力不强，但组织或脓汁中的菌体，在干燥条件下可存活数周［5］。猪链球菌病是由链球菌C、D、E及L、R、S等群引起的多种疾病的总称，根据荚膜多糖抗原的差异，可将其分为 35个血清型，即 1～34以及 1/2型［6］。猪链球菌病在世界各地均有发生，因血清型众多、抗原结构复杂，用疫苗预防该病具有一定局限性。在实际生产中，常采用抗菌药物进行预防和控制。随着抗菌药物的广泛应用，在药物的选择压力下，猪链球菌对抗菌药物产生了严重的耐药性［7-10］。

目前，不论兽医临床还是人医临床，病原菌的耐药现象已经十分严重，并且有逐年上升的趋势。为此，该研究对分离自兽医临床的26株猪链球菌进行了常用抗菌药物的敏感性试验，以期为兽医临床制定合理用药方案提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 菌株：质控菌株：猪链球菌ATCC 700794，购自美国微生物菌种保藏中心。临床菌株：26株猪链球菌，由东北农业大学药学专业教研室提供。

1.1.2 试剂与培养基：PPLO固体培养基、PPLO液体培养基购自杭州天和微生物试剂有限公司。灭菌生理盐水自行配制。

1.1.3 药敏纸片：购自上海伊华医学科技有限公司，纸片直径（6.35±0.05）mm。 药品种类及相应的CLSI药敏试验结果判定标准见表1。

1.2 试验方法

1.2.1 菌液制备：取鉴定后的纯培养物接种于5 mL营养肉汤中，37℃培养16 h。

表1 药敏纸片含药量及药敏试验结果判定标准

1.2.2 药敏试验：按照CLSI推荐的纸片扩散法（KB）法进行。将上述液体纯培养物制成悬液，用灭菌生理盐水将菌悬液浓度调整至0.5麦氏单位（含活菌数为 1×106～1×107CFU/mL）。 取稀释好的菌液0.1 mL均匀涂布在PPLO固体培养基上，盖好平皿，待干燥后，用镊子夹取药敏纸片贴在PPLO固体培养基上。37℃培养16 h，用游标卡尺测定抑菌圈直径，每次试验以ATCC 700794作为质控菌。根据CLSI推荐的药敏试验结果判定标准，即敏感、中介、耐药3种形式判断猪链球菌对抗菌药物的敏感性。

2 结果与分析

采用纸片扩散法测定了临床分离的26株猪链球菌对兽医临床常用抗菌药物的敏感性，结果见表2。由表2可知，分离菌对头孢噻肟及氨苄西林/舒巴坦最为敏感，敏感菌株均占73.1%，其次是丁胺卡那霉素和盐酸多西环素，敏感菌株分别占57.7%和50.0%。分离菌对四环素、庆大霉素、磺胺二甲氧嘧啶表现出较强的耐药性，耐药率分别为92.3%、69.2%、69.2%。此外，分离菌对氯霉素、头孢他啶、克林霉素、磺胺嘧啶钠、复方新诺明也表现出一定的耐药性，耐药率均为57.7%。试验结果表明，临床分离的猪链球菌对兽医临床常用的抗菌药物产生了不同程度的耐药性。

表2 药敏试验结果

3 讨论

分析临床分离的猪源链球菌耐药性产生的原因，除与抗菌药物长期应用导致的选择性压力和抗菌药物不合理使用有关外，耐药基因在菌株中的广泛传播也十分重要。研究表明，细菌通过携带可转移的遗传因子，包括质粒、转座子等使耐药性扩散传播，其中整合子潜在的基因捕获及整合表达能力，对于细菌耐药性的传播具有重要的促进作用。

［1］夏艳勋，王涛，赵传璧.33株猪源链球菌药敏试验分析［J］.河南农业科学，2003（12）：56-57.

［2］王丽平，陆承平，唐家琪.32种抗菌药物对临床分离猪源链球菌的体外抗菌活性 ［J］.微生物学报，2004，44（6）：794-798.

［3］WEISBLUM B.Erythromycin resistance by ribosome modification ［J］.Antimicrob Agents Chemother，1995（39）：577-585.

［4］AARESTRUP F M，RASMUSSEN S R，ARTURSSON K.Trends in the resistance to antimicrobial agents of Streptococcus suis isolates from Denmark and Sweden［J］.Vet Microbiol，1998，63（1）：71-80.

［5］MARTEL A，BAELE M，DEVIESE L A，et al.Prevalence and mechanism of resistance against macrolides and lincosamidesin Streptococcussuisisolates ［J］.Vet Microbiol，2001，83（3）：287-297.

［6］STAATS J J，PLATTNER B L，NIETFELD J，et al.Use of ribotyping and hemolysin activity to identify highly virulent Streptococcus suis type 2 isolates ［J］.J Clin Microbiol，1998，36（1）：15-19.

［7］张之文，王红宁.整合子结构及在细菌耐药性扩散中的作用［J］.国外医药：抗生素分册，2003，24（4）：150-153.

［8］张洪，邵世和.基因盒—整合子系统与细菌的耐药性［J］.江苏大学学报：医学版，2005（6）：86-89.

［9］李艳华，蔡雪辉，刘永刚，等.合理选择抗菌药治疗细菌性猪呼吸道疾病的原则 ［J］.中国畜牧兽医，2004，31（11）：47-48.

［10］杨霞，卢中华，张红英，等.猪链球菌病病原的生化分群鉴定和药敏试验［J］.中国畜牧兽医，2004，31（4）：32-33.

Antimicrobial Resistance of 26 Strains of Streptococcus suis Isolated from Veterinary Clinical Specimens

GONG Tuan-lian
（College of Animal Science and Technology，Inner Mongolia University for Nationalities，Tongliao 028042，China）

In present study,the antimicrobial resistance of 26 strains of Streptococcus suis isolated from veterinary clinical specimens was investigated by K-B method recommended by CLSI.The results showed that most(73.0%)of the isolates were sensitive to cefotaxime and ampicillin/sulbactam.Furthermore,57.7%and 50.0%of the isolates were sensitive to amikacin and doxycycline hydrochloride,respectively.The high rate of resistance to tetracycline (92.3%),gentamicin (69.2%)and sulfadimethoxine (69.2%)was observed,and 57.7%of the isolates exhibited resistance to chloramphenicol,ceftazidime,clindamycin,sulfadiazine sodium,and trimethoprim-sulfamethoxazole.The Streptococcus suis isolates have been found resistant to the antimicrobial agents commonly used in veterinary clinic,which should be paid more attention.

Streptococcus suis；antimicrobial resistance；surveillance

S858.285.11；S859.79

A文章顺序编号：1672-5190（2016）01-0016-02

2016-01-02

龚团莲（1967—），女，高级实验师，主要从事临床兽医学实验教学工作。

（责任编辑：赵俊利）