维吾尔族晚期非小细胞肺癌患者EGFR、KRAS基因突变状态及其与TKI靶向治疗效果的关系

马玲，张琰，单莉，韩志刚

(新疆医科大学附属肿瘤医院，乌鲁木齐830011)



维吾尔族晚期非小细胞肺癌患者EGFR、KRAS基因突变状态及其与TKI靶向治疗效果的关系

马玲，张琰，单莉，韩志刚

(新疆医科大学附属肿瘤医院，乌鲁木齐830011)

目的观察维吾尔族晚期非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体(EGFR)及KRAS基因突变状态，并探讨其与酪氨酸激酶抑制剂(TKI)靶向治疗疗效的关系。方法 维吾尔族晚期非小细胞肺癌患者50例，留取肿瘤组织标本，应用探针扩增阻滞突变系统检测EGFR基因第18、19、20、21外显子及KRAS基因第12、13密码子上热点体细胞突变情况。分析EGFR、KRAS基因突变情况与非小细胞肺癌临床病理参数及TKI治疗效果的关系。结果 50例患者中，共检出EGFR基因突变7例(7/50)，其中EGFR第19外显子缺失突变5例，第21外显子L858R点突变1例，第21外显子861Q和L858R同时突变1例；共检出KRAS基因突变5例(5/50)，突变位点均为第12密码子Gly12Ala突变；无发生EGFR、KRAS基因同时突变者。50例患者中，腺癌患者EGFR基因突变率高于非腺癌患者(P<0.05)；吸烟患者KRAS基因突变率高于非吸烟患者(P<0.05)。末次随访时间为2015年6月，患者服药持续时间为1～9.5个月，中位PFS为4.1个月。EGFR基因突变型患者的中位PFS长于EGFR野生型患者(分别为6.3、2.9个月，P=0.014)。EGFR基因突变型患者疾病控制率高于野生型患者(分别为6/7、12/43，P=0.004)。KRAS基因野生型患者与突变型患者疾病控制率相比，P>0.05。结论 维吾尔族晚期非小细胞肺癌患者EGFR基因突变以第19外显子缺失突变为主，KRAS基因突变以第12密码子Gly12Ala突变为主。EGFR基因突变型患者TKI治疗效果优于EGFR野生型患者，而KRAS基因突变情况与TKI治疗效果无明显关系。

非小细胞肺癌；表皮生长因子受体；KRAS；基因突变；酪氨酸激酶抑制剂；维吾尔族

肺癌的发病率及病死率逐年增高，就诊时80%的患者失去了手术机会，五年生存率不足20%[1]。目前为止，手术、化疗、放疗等治疗手段效果不太理想[2]，肺癌治疗的相关研究热点主要集中在分子水平上[3]。研究比较成熟的有表皮生长因子受体(EGFR)及KRAS。针对EGFR的药物代表主要有吉非替尼、厄洛替尼。KRAS可介导EGFR信号通路下游信号活化，KRAS突变被认为是预后不良的标志[4]。多项研究结果显示，EGFR突变率在亚裔人群高达50%，但欧美人群仅为10%，EGFR、KRAS突变与酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的敏感性有关[5]，因此检测EGFR、KRAS基因突变状态对肺癌治疗方案的选择有积极意义。我们既往观察到维吾尔族人群非小细胞肺癌的发病率也逐年提高，但肺癌常规治疗效果与汉族有所差异。为此，本研究观察了维吾尔族晚期非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体(EGFR)及KRAS基因突变状态，并探讨其与TKI靶向治疗效果的关系。

1　资料与方法

1.1临床资料收集2012～2015年经我院组织病理检查证实的维吾尔族晚期非小细胞肺癌患者50例，其中男29例、女21例，年龄38～78岁，组织学类型为腺癌23例(细支气管肺泡癌归入腺癌中)、鳞癌24例、大细胞癌3例，临床分期Ⅲb期15例，Ⅳ期35例。所有患者均为行为状态评分差、无法耐受化疗或患者本人拒绝化疗而将TKI药物作为一线治疗，其中行为状态差无法耐受化疗选择靶向治疗26例，因本人意愿拒绝化疗要求靶向治疗16例，根据NCCN肺癌指南推荐采用TKI药物治疗8例。所有患者均行影像学检查排除间质性肺疾病可能，血常规及心、肝、肾功能基本正常。50例患者均获得肿瘤组织学标本，标本经过4%甲醛液固定，经由石蜡包埋，常规HE染色，最终筛选出肿瘤细胞百分比大于80%的组织块进行切片处理。

1.2EGFR、KRAS基因突变观察采用探针扩增阻滞突变系统(ARMS)检测EGFR基因18、19、20、21外显子突变情况以及KRAS基因第12、13密码子上的7种体细胞突变。

1.3TKI治疗方法及疗效判定患者均口服厄洛替尼片，150 mg/d，餐前1 h或餐后2 h服用，服药直至疾病进展或出现严重不良反应无法耐受时停止，截止2015年6月，服药持续时间范围为1～9.5个月，中位PFS为4.1个月。疗效评价分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)、进展(PD)。客观有效率(RR)=(CR+PR)/总例数×100%，疾病控制率(DCR)=(CR+PR+SD)/总例数×100%。

1.4统计学方法采用SPSS17.0软件进行统计学处理。计数资料比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1晚期非小细胞肺癌患者EGFR、KRAS基因突变情况50例患者中，共检出EGFR基因突变7例(7/50)，其中EGFR第19外显子缺失突变5例，第21外显子L858R点突变1例，第21外显子861Q和L858R同时突变1例；共检出KRAS基因突变5例(5/50)，突变位点均为第12密码子Gly12Ala突变；无发生EGFR、KRAS基因同时突变者。

2.2EGFR、KRAS基因突变情况与晚期非小细胞肺癌临床病理参数的关系50例患者中，腺癌患者EGFR基因突变率高于非腺癌患者(P<0.05)；吸烟患者KRAS基因突变率高于非吸烟患者(P<0.05)。详见表1。

表1　EGFR、KRAS基因突变情况与晚期非小细胞肺癌临床病理参数的关系(例)

注：与腺癌患者相比，*P<0.05；与吸烟患者相比，#P<0.05。

2.3EGFR、KRAS基因突变情况与TKI治疗效果的关系末次随访时间为2015年6月，患者服药持续时间1～9.5个月，中位PFS为4.1个月。EGFR基因突变型患者的中位PFS长于EGFR野生型患者(分别为6.3、2.9个月，P=0.014)。EGFR基因突变型患者疾病控制率高于野生型患者(分别为6/7、12/43，P=0.004)。KRAS基因野生型患者与突变型患者疾病控制率差异无统计学意义。详见表2。

表2　EGFR、KRAS基因突变情况与TKI治疗效果的关系(例)

3　讨论

晚期非小细胞肺癌的常用治疗方法包括为化疗、放疗和靶向治疗[6]。TKI是肺癌靶向治疗的常用药物，其疗效和敏感性与EGFR、KRAS基因突变状态有关，因此，EGFR基因检测联合KRAS基因检测能够为TKI药物的个体化治疗提供更为精确的依据。

EGFR基因位于人类第7号染色体短臂上[7]，目前证实有临床意义的突变位点主要集中在第18～21号外显子上[8]，这些位点的突变改变了EGFR胞内ATP结合区的结构，提高了EGFR对TKI药物的结合能力[9，10]。目前最受关注的EGFR基因突变主要是第19外显子缺失及第21外显子L858R点突变。这两个位点的突变可提高TKI药物的疗效，而第20号外显子T790M突变被证实与TKI耐药相关[11]。研究[12]显示，EGFR突变率在亚洲人群中为30%～40%，在欧美人群中约为10%。本研究发现维吾尔族患者EGFR基因突变率为14%，明显低于亚洲人群水平，接近于欧美人群水平，原因可能与维吾尔族为多民族融合有关[13]。本组中腺癌患者EGFR基因突变率高于非腺癌患者，但吸烟史、性别与EGFR基因突变无关，与相关文献报道的EGFR基因突变与吸烟史、性别有关的结论不一致，考虑可能与本组样本量小且两组样本数量分布不平衡有关。一项西班牙临床研究[14]显示，EGFR突变中第19外显子突变率为62.2%，第21外显子L858R突变率约为37.8%，本组结果分别为5/7、1/7，与文献报道基本一致，提示维吾尔族非小细胞肺癌患者的EGFR突变也主要以第19外显子缺失突变为主。

在非小细胞肺癌中，90%的RAS突变均为KRAS突变[15]，突变后的KRAS基因能够获得调节细胞分化和增殖的能力，导致KRAS信号处于长期持续激活状态，从而引起细胞恶变[16]。KRAS基因突变位点多发生在N端第12、13密码子[17]。本组50例患者中，KRAS基因突变率为10%(5/50)，其中腺癌患者突变率为17.4%(4/23)，非腺癌患者突变率为3.7%(1/27)，差异无统计学意义，与文献报道不符，考虑可能与本组样本量少有关。我们发现吸烟患者KRAS基因突变率高于非吸烟患者，符合KRAS基因突变多见于吸烟患者这一结论。另外，本组结果显示维吾尔族患者KRAS基因突变率明显高于亚洲人群(分别为10%、3.8%)，但低于欧美人群(分别为10%、20%～40%)，考虑可能也与维吾尔族人群特点有关。

研究[18]报道TKI一线治疗晚期EGFR突变型非小细胞肺癌客观有效率近40%，疾病控制率约70%，PFS 9个月以上[19]。本组50例患者中EGFR基因突变率为14%(7/50)，EGFR基因突变患者TKI治疗有效率和疾病控制率均高于EGFR野生型患者，提示进行EGFR基因检测对指导非小细胞肺癌患者的治疗十分必要。若不进行检测，仍按照传统的所谓“优势人群”(亚裔、女性、腺癌、不吸烟)的条件来判断或经验用药，就会使大量EGFR野生型患者进行无效的TKI治疗，从而延误病情。研究结果已证实，KRAS突变型患者服用TKI药物疗效差，是预后不良因素。本组中，1例KRAS突变患者服用TKI药物疗效评价为稳定，其余4例患者病情均进展，这1例患者的治疗结果与KRAS突变和疗效呈负相关这一结论相悖。此患者肺内病灶缓慢增长，但增长程度尚未超过20%，因此理论上属于缓慢进展。本组中有1例KRAS野生型患者疗效为PR，患者EGFR为突变型，这也解释了EGFR与KRAS突变在同一病例中不会同时出现。

我们认为，对于晚期非小细胞肺癌患者需要进行EGFR、KRAS基因检测，有望为个体化治疗方案的制定提供依据[20]，也避免了医疗资源的浪费，减轻了患者的经济负担。然而，本研究纳入患者较少，结果可能存在一定偏倚，仍需要进一步扩大样本量进行研究。

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乌鲁木齐市科学技术计划项目(Y111310025)。

韩志刚(E-mail: 1378213986@qq.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.31.021

R734.2

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1002-266X(2016)31-0066-03

2016-04-27)