红景天片提高缺氧耐受力的功能研究

罗葵，曹丽歌，高丽芳，田蜜，崔淑香

（首都医科大学医学实验与测试中心，北京100069）

红景天片提高缺氧耐受力的功能研究

罗葵，曹丽歌，高丽芳，田蜜，崔淑香*

（首都医科大学医学实验与测试中心，北京100069）

研究红景天片提高缺氧耐受力的功能。分别用0.2、0.4、1.2 g/kg·BW（分别相当于人体推荐用量的5、10、30倍）剂量的红景天片连续给小鼠灌胃30 d，检验其提高3种不同类型缺氧模型小鼠缺氧耐受力的能力。结果显示红景天片能够显著延长小鼠在常压缺氧存活时间和急性脑缺血性缺氧（断头）后张口喘气时间，对小鼠体重和小鼠在亚硝酸钠中毒后的存活时间无影响，说明红景天片具有提高缺氧耐受力的功能。

红景天片；缺氧耐受力；小鼠

红景天是景天科红景天属多年生草本或亚灌木植物，大多分布在北半球的高寒地带，生长在海拔3 500 m～5 000 m左右的高山流石或灌木丛林下，为高寒无污染地带的珍稀野生植物［1］。红景天有抗缺氧、抗衰老、抗疲劳和抗辐射等多种作用［2-4］。

红景天能在极其恶劣而多变的自然环境中生长［5］，恶劣的生存环境使红景天在遗传上具备其它其他植物所没有的特殊物质［2］。经现代分析研究，已初步从红景天植物中先后分离出40多种有活性的化合物，主要含有红景天苷、黄酮类、活性酶、多糖类、挥发油和18种氨基酸等，其中，红景天苷是红景天苷中的主要有效成分［6］。本文使用3种不同类型的缺氧模型小鼠，对以红景天苷为主要成分的红景天片是否具有提高缺氧耐受功能进行研究。

1　材料与方法

1.1材料

本实验受试物为市面购买的红景天片，主要成分为红景天苷（含量560 mg/100 g），辅料为糊精，成人（60 kg）口服推荐剂量为0.04 g/kg·BW。阳性对照物为银杏叶片（银可络），成人口服推荐剂量为0.017 5 g/kg· BW。试验前，用纯净水配制成所需浓度混悬液。

1.2试剂与仪器

亚硝酸钠（分析纯）：北京刘李店化工厂，批号为20030908；钠石灰：广东汕头西陇化工厂，批号为051027。

TE212-L型电子天平：德国Sartorius公司；1 mL注射器：上海米沙瓦医科工业有限公司；250 mL广口瓶：北京玻璃仪器厂；灌胃针；秒表。

1.3实验动物及饲养条件

本实验选用SPF级ICR雌性小鼠，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，实验动物生产许可证号为SCXK（京）2012-0001。首都医科大学实验动物科学部提供动物实验室，为屏障系统，实验动物使用许可证号：SYXK（京）2010-0020。室内温度（23±2）℃，相对湿度（50±20）%。喂饲基础饲料，由北京科澳协力饲料有限公司提供真空包装无菌饲料，生产许可证号：SCXK（京）2014-0010。

1.4方法

1.4.1实验动物分组

实验小鼠共180只，常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血性缺氧实验各使用60只。各实验的小鼠按体重随机分别分成5组，每组12只小鼠。

1.4.2常压耐缺氧实验

根据红景天片人群推荐量（0.04 g/kg·BW）的5、10、30倍设3个剂量组，即0.2、0.4、1.2 g/kg·BW，以银杏叶片人群口服用量（0.017 5 g/kg·BW）的10倍为阳性对照组，即0.175 g/kg·BW，同时设一个阴性对照组。用纯水配制受试物和阳性对照物，按照0.2 mL/10g· BW的体积灌胃，连续给予受试物和阳性对照物30 d。记录试验期间小鼠的体重增长情况。于末次灌胃后1 h，将各组小鼠分别放入盛有5 g钠石灰的250 mL磨口瓶（每瓶1只），用凡士林封瓶口，盖严，使之不漏气，立即计时，以呼吸停止为指标，观察小鼠在常压缺氧条件下的存活时间。

1.4.3亚硝酸钠中毒存活实验

给样浓度和方法同常压耐缺氧实验。记录实验期间小鼠的体重增长情况。于末次灌胃后1 h，各组动物按0.24 g/kg·BW剂量腹腔注射亚硝酸钠（注射量为0.1 mL/10 g），立即计时，记录小鼠中毒后存活的时间。

1.4.4急性脑缺血性缺氧实验

给样浓度和方法同常压耐缺氧实验。记录实验期间小鼠的体重增长情况。于末次灌胃后1 h，各组小鼠自颈部逐只断头，立即按秒表记录小鼠断头后至张口喘气停止时间。

1.5数据统计

采用spss19.0软件对数据进行统计分析，分别以耐缺氧时间、中毒存活时间和喘气停止时间为计量数据，采用方差分析和组间比较，P＜0.05为差异有统计学意义。常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血性缺氧实验中受试样品组与对照组比较，存活时间延长，并具有统计学意义，则判定该实验结果阳性。根据《保健食品检验与评价技术规范（2003版）》，常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血性缺氧实验3项实验中任2项实验结果阳性，则判定该受试样品具有提高缺氧耐受力功能。

2　结果

2.1对小鼠体重的影响

在本研究所包含的常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血性缺氧实验中，红景天片对小鼠体重的影响分别见表1、表2和表3。

表1　红景天片对常压耐缺氧实验小鼠体重的影响（±s）Table 1Effects of Rhodiola extract tablets on atmospheric anoxia experimental mice weight（±s）

表1　红景天片对常压耐缺氧实验小鼠体重的影响（±s）Table 1Effects of Rhodiola extract tablets on atmospheric anoxia experimental mice weight（±s）

组别供试品剂量/（g/kg·BW）初体重/g终体重/g阴性对照组021.3±1.5727.9±1.90低剂量组0.221.3±1.2428.1±1.67中剂量组0.421.4±0.8927.5±1.57高剂量组1.221.4±0.9328.7±2.04阳性对照组0.17521.3±1.1029.0±3.61

表2　红景天片对亚硝酸钠中毒存活实验小鼠体重的影响（±s）Table 2Effects of Rhodiola extract tablets on subjected to NaNO2experimental mice weight（±s）

表2　红景天片对亚硝酸钠中毒存活实验小鼠体重的影响（±s）Table 2Effects of Rhodiola extract tablets on subjected to NaNO2experimental mice weight（±s）

组别供试品剂量/（g/kg·BW）初体重/g终体重/g阴性对照组019.1±1.0029.3±2.48低剂量组0.219.1±0.9328.6±2.80中剂量组0.419.1±0.8227.9±2.39高剂量组1.219.0±0.7227.8±2.23阳性对照组0.17519.1±0.7426.9±1.68

表3　红景天片对急性脑缺血性缺氧实验小鼠体重的影响（±s）Table 3Effects of Rhodiola extract tablets on acute lack of blood in brain experimental mice weight（±s）

表3　红景天片对急性脑缺血性缺氧实验小鼠体重的影响（±s）Table 3Effects of Rhodiola extract tablets on acute lack of blood in brain experimental mice weight（±s）

组别供试品剂量/（g/kg·BW）初体重/g终体重/g阴性对照组019.3±1.0227.3±1.50低剂量组0.219.5±1.0427.0±2.61中剂量组0.419.5±1.0927.3±2.21高剂量组1.219.5±1.0726.7±1.51阳性对照组0.17519.3±0.7927.5±2.16

由表1、表2和表3可见，在常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血性缺氧实验中，各组小鼠初始体重差异无显著性；经口给予ICR小鼠供试品30 d，各剂量组及阳性对照组小鼠体重与阴性对照组小鼠体重相比无显著差异，表明红景天片对小鼠体重增长无显著影响。

2.2常压耐缺氧实验

在该实验中，红景天片对小鼠常压缺氧存活时间的影响见表4。

由表4可见，经口给予小鼠供试品30 d后，低剂量组、中剂量组及阳性对照组小鼠与阴性对照组小鼠相比，常压缺氧存活时间有显著差异（P＜0.05），其中，中剂量组小鼠与阴性对照组小鼠相比，常压缺氧存活时间有非常显著差异（P＜0.01）。实验结果表明饲喂中剂量的红景天片能提高小鼠常压缺氧耐受力。

表4　红景天片对小鼠常压缺氧存活时间的影响（±s）Table 4Effects of Rhodiola extract tablets on mice atmospheric anoxia survival time（±s）

表4　红景天片对小鼠常压缺氧存活时间的影响（±s）Table 4Effects of Rhodiola extract tablets on mice atmospheric anoxia survival time（±s）

注：*与阴性对照组比较，P＜0.05，表示有显著差异；**与阴性对照组比较，P＜0.01，表示有非常显著差异。

组别供试品剂量/（g/kg·BW）常压缺氧死亡时间/min阴性对照组028.76±3.18低剂量组0.235.31±9.58*中剂量组0.438.32±8.15**高剂量组1.233.25±5.34阳性对照组0.17535.53±6.47*

2.3亚硝酸钠中毒存活实验

在该实验中，红景天片对小鼠亚硝酸钠中毒存活时间的影响见表5。

表5　红景天片对小鼠亚硝酸钠中毒存活时间的影响（±s）Table 5Effects of Rhodiola extract tablets on the survival time of mice subjected to NaNO2（±s）

表5　红景天片对小鼠亚硝酸钠中毒存活时间的影响（±s）Table 5Effects of Rhodiola extract tablets on the survival time of mice subjected to NaNO2（±s）

组别供试品剂量/（g/kg·BW）亚硝酸钠中毒存活时/min阴性对照组021.00±4.41低剂量组0.219.66±7.23中剂量组0.421.68±5.65高剂量组1.220.02±2.82阳性对照组0.17522.46±10.58

由表5可见，经口给予ICR小鼠供试品30 d，各剂量组及阳性对照组与阴性对照组相比，亚硝酸钠中毒存活时间无显著差异。表明红景天片不能提高小鼠亚硝酸钠中毒存活能力。

2.4急性脑缺血性缺氧实验

在该实验中，红景天片对小鼠急性脑缺血性缺氧张口喘气时间的影响见表6。

表6　红景天片对小鼠张口喘气时间的影响（±s）Table 6Effects of Rhodiola extract tablets on mouth breathing time after acute lack of blood in brain（±s）

表6　红景天片对小鼠张口喘气时间的影响（±s）Table 6Effects of Rhodiola extract tablets on mouth breathing time after acute lack of blood in brain（±s）

注：*表示与阴性对照组比较P＜0.05。

组别供试品剂量/（g/kg·BW）张口喘气时间/min阴性对照组014.42±1.56低剂量组0.215.00±1.48中剂量组0.415.85±1.68*高剂量组1.216.54±1.51*阳性对照组0.17515.58±1.44

由表6可见，经口给予小鼠供试品30 d后，低剂量组及中剂量组小鼠与阴性对照组小鼠相比，急性脑缺血性缺氧张口喘气时间有显著差异（P＜0.05）。表明饲喂中剂量的红景天片能提高小鼠急性脑缺血性缺氧耐受力。

2.5结论

在本研究条件下，红景天片0.4 g/kg·BW剂量能显著延长常压耐缺氧时间和急性脑缺血性缺氧耐受时间，表明红景天片具有提高缺氧耐受力的功能。

3　讨论

缺氧是指因组织的氧气供应不足或用氧障碍，而导致组织的代谢、功能和形态结构发生异常变化的病理过程。有研究表明，红景天提取液不仅对常压缺氧和组织缺氧小鼠有保护作用，而且对特异性增加心脏耗氧的小鼠能明显延长其生存时间，说明能改善心肌氧的供求［7］。红景天苷是红景天中的主要有效成分，龙怡［8］等研究表明红景天苷等成分能提高心肌细胞活力，对抗心肌缺氧损伤，保护心肌细胞。

银杏叶（Ginkgo biloba leaves）是银杏科植物银杏（Ginkgo biloba L.）的干燥叶。银杏叶提取物中主要生物活性成分为银杏黄酮糖苷和银杏萜内酯。李晓莉［9］等研究表明银杏叶提取物可以显著延长小鼠在常压缺氧条件下的存活时间。

本研究结果表明，以红景天苷为主要成分的红景天片具有提高缺氧耐受力功能。在常压耐缺氧试验中，低剂量组、中剂量组和阳性对照组小鼠常压缺氧存活时间较阴性对照组有显著延长（P＜0.05）。在急性脑缺血性缺氧实验中，中剂量组小鼠断头喘气时间较阴性对照组有显著延长（P＜0.05）。综合上所述，中剂量红景天片能提高小鼠的缺氧耐受力。虽然阳性对照组只在常压耐缺氧试验中较阴性对照组有显著差异，而在亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血性实验中较阴性对照组没有明显差异，这可能与阳性对照物的剂量有关。本研究结果为红景天的开发利用提供科学参考。

［1］德吉，周生灵，郭小芳，等.红景天的研究进展［J］.西藏科技，2012（8）：70-71

［2］马根顺，罗丁.红景天药理作用研究进展［J］.中国实用医药，2009，4（28）：227-228

［3］刘明成，张得钧.红景天药理作用研究进展［J］.亚太传统医药，2013，9（6）：65-69

［4］熊云珍，胡艳红，熊新刚，等.红景天药理作用研究进展［J］.湖北中医杂志，2013，35（8）：78-81

［5］李昱柳，苏巧娟，李灵芝.红景天苷药理活性研究进展［J］.武警医学院学报，2007，16（1）：98-100

［6］李丹红，孟玉彩，赵文.红景天植物生物活性研究进展［J］.毒理学杂志，2008，22（4）：320-323

［7］吴万征，李朝晖，梁球.西藏红景天提取物抗缺氧作用的实验研究［J］.中药材，2005，28（1）：41-42

［8］龙怡，李佳川，孟宪丽.红景天有效成分对缺氧缺糖心肌细胞损伤的保护作用研究［J］.中药药理与临床，2010，26（1）：24-25

［9］李晓莉，王斌，苏喜生，等.银杏叶提取物对小鼠耐缺氧作用的影响［J］.卫生研究，2000，29（3）：190-191

Experimental Study on the Effects of Rhodiola Extract Tablets in Enhancing Anoxia Endurance

LUO Kui，CAO Li-ge，GAO Li-fang，TIAN Mi，CUI Shu-xiang*
（Medical Experiments and Testing Center，Capital Medical University，Beijing 100069，China）

To study on the function of Rhodiola extract tablets in enhancing anoxia endurance，the mice of experimental groups were orally given Rhodiola extract tablets for 30 days at the dosages of 0.2，0.4，1.2 g/kg·BW（Equivalent to 5，10，30 times of the recommended amount ofhuman body）respectively.The anoxia endurance ofthetabletswereexaminedonthreedifferenttypesofanoxiamodelmice.Theresultwasthatasfollowed，Rhodiola extract tablets could significantly increase in mice atmospheric anoxia survival time and mouth breathing time after acute lack of blood in brain.No significant effects of Rhodiola extract tablets on the growth of mice and the survival time of mice subjected to NaNO2was observed.The results indicated that Rhodiola extract tablets could enhance anoxia endurance of mice.

Rhodiola extract tablets；anoxia endurance；mice

10.3969/j.issn.1005-6521.2016.17.039

2015-10-14

罗葵（1983—），女（汉），主管技师，硕士，研究方向：食品药品安全评价。

崔淑香（1963—），教授，研究方向：卫生毒理学。