南丹参药材薄层色谱研究*

李晶　王小青　陈超　虞金宝（江西省中医药研究院　南昌330046）

·中西药苑·

南丹参药材薄层色谱研究*

李晶王小青陈超虞金宝
（江西省中医药研究院南昌330046）

目的：建立南丹参药材的定性控制方法。方法：采用薄层色谱法分别检查药材中的丹参酮类和丹参酚酸类成分。结果：丹参酮类和丹参酚酸类成分分别在以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（5∶1）和甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶0.5∶2）为展开剂的条件下获得理想分离。结论：该方法简便、快速，可作为南丹参药材的定性控制方法。

南丹参；显微鉴别；薄层鉴别

1　仪器与试药

1.1仪器麦克奥迪B1显微镜，SPU-Ⅰ自动喷雾显色器（日本），PBQ-Ⅰ薄层自动铺板器（四川重庆），定量毛细管（美国Drummond公司），CQ-250超声波清洗仪（上海船舶电子设备研究所），硅胶G、GF254（薄层层析用：青岛海洋化工有限公司）。

1.2南丹参药材分别来源于江西南昌（2013051301、2013051302、2013061401、2013061402、2013081501）；江西德安（2013051303、2013052201）；江西婺源（2013051401、2013051402）；江西于都（2013060201）。

1.3试剂丹酚酸B对照品（批号：

110562-200807，中国药品生物制品检定所）、丹参酮ⅡA对照品（批号：110766-200416，中国药品生物制品检定所）、丹参对照药材（批号：120923-200610，中国药品生物制品检定所），其它试剂均为分析纯。

2　方法与结果

2.1原植物南丹参Salvia bowleyana Dunn.多年生草本。见图1。茎高约1 m，被长柔毛。叶为羽状复叶；小叶5（7）片，顶端小叶卵状披针形，长4.0～7.5 cm，下面脉上被疏柔毛，侧生小叶较小；叶柄长4～6 cm，被长柔毛。轮伞花序8至多花，苞片披针形；花萼筒状，长8～10 mm，外被具腺疏柔毛，二唇形，上唇三角形，顶端尖，下唇三角形，浅裂为2齿；花冠淡紫色至蓝紫色，长19～24 mm，花冠筒内具毛环，下唇中裂片倒心形，边缘具小齿；花丝长约4 mm，药隔长19 mm，上臂长达15 mm，下臂长约4 mm，下臂2药室不发育，且顶端联合。小坚果椭圆形，顶端有毛。生于山地、林下、水边，海拔30～960 m处。广泛分布于长江以南地区，江西作为主产区之一，分布于南昌、九江、赣州、宜春等地。

图1　南丹参原植物

2.2鉴别

2.2.1显微鉴别根横切面：木栓层为3～7列细胞。皮层较宽，有裂隙。维管束5～8个，放射状排列；韧皮部呈半月形。束间形成层较明显，木质部由导管、木纤维、木薄壁细胞组成，木纤维常成群附于导管旁。射线宽广。见图2。粉末特征：红棕色。网纹及具缘纹孔导管多见，直径11～60 μm，网纹导管末端钝尖、钝圆或锐尖，壁较厚，穿孔位于端壁或侧壁。网孔较狭而短；具缘纹孔导管粗短，具缘纹孔类圆形，排列密集，有的具网状三生增厚。石细胞多见，类圆形、类三角形、类长方形或不规则形，孔沟明显，有的胞腔内含黄棕色物。木纤维多为纤维管胞，长梭形，有的呈弯曲状，末端斜尖。见图3。

图2　南丹参根横切面

图3　南丹参粉末鉴别

2.2.2丹参酮类TLC鉴别取南丹参药材粉末5 g，置锥形瓶中，加乙酸乙酯40 ml，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1 ml含2 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述对照品溶液5 μl、供试品溶液5～10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（5∶1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。见图4。置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。见图5。

图4　丹参酮类TLC图（日光）

图5　丹参酮类TLC图（紫外光灯365 nm）

2.2.3丹酚酸B的TLC鉴别取南丹参药材粉末0.2 g，加75%甲醇25 ml，加热回流1 h，滤过，滤液浓缩至1 ml，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加75%甲醇制成每1 ml含2 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶0.5∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图6。

图6　丹酚酸TLC图

3　讨论

因南丹参药材与丹参药材在植物形态上较为相近，为了能明确区分开该两个品种，我们同步对比了丹参药材原植物，发现南丹参的小叶为卵形或卵状披针形，先端渐尖或尾状渐尖，丹参小叶为卵园形或宽卵园形，先端钝尖；南丹参的花冠多为紫红色或淡紫色，而丹参的花冠多为蓝紫色；南丹参根茎下少数主根，根呈纺锤形，粗而短，而丹参根茎下着生多数细长的根，根呈圆柱形；南丹参小坚果4，菱形（椭圆形），而丹参小坚果4，长圆形或椭圆形。

本次研究中，我们对南丹参药材在我省的资源分布情况进行了调查研究，发现南昌、九江（德安）、上饶（婺源）、赣州、宜春（宜丰）等地均有散在的野生，与文献［5］中南丹参在中国的潜在分布区预测结果较为接近。根据我们采挖发现以婺源的野生资源较集中，有局部成片生长，其次为南昌梅岭、九江（德安）、赣州、宜春（宜丰）的几个采挖点均较零散。根据样本采集的生境调查结果显示，南丹参药材多生于半山坡以下及相应的路边、溪边。喜微碱性的石灰岩土壤，喜温暖光照，空气湿润。

现有文献资料中未见有关南丹参的薄层鉴别研究，仅报道称其含与丹参相同的丹参酮类和丹参酚酸类两大类成分有10余种［3～4］。经薄层色谱研究证实，南丹参药材中含有与丹参相同的丹参酮ⅡA和丹酚酸B，同时实验中通过与丹参药材和对照药材的对比研究发现，南丹参药材中检出独有的蓝色荧光斑点，目前该成分尚未可知，此后将对其进行进一步分析研究。实验建立的薄层色谱鉴别方法稳定、重现性好、灵敏度高，可作为南丹参药材的鉴别方法。

［1］卫生部药政管理局.中药材手册［M］.北京:人民卫生出版社，1990.54

［2］国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草（上册）［M］.上海:上海科学技术出版社，1999.1652

［3］刘丹，余良忠，文萍.HPLC法测定南丹参中丹酚酸B的含量［J］.辽宁中医杂志，2011，38（9）:1872-1873

［4］沈建芳，王强，汪红.南丹参化学成分研究［J］.中国野生植物资源，2006，25（2）:55-58

［5］何淑婷，白碧玉，但佳惠，等.基于MaxEnt的南丹参在中国的潜在分布区预测及适生性分析［J］.安徽农业科学，2014，42（8）:2311-2314

The TLC Research of Salvia Bowleyana Dunn

LI Jing，WANG Xiao-qing，CHEN Chao，YU Jin-bao
（Jiangxi Institution of Tradional Chinese Medical and Pharmaceutical Sciences，Nanchang330046）

Objective:Establish the qua litative control method of Salvia bowleyana Dunn.Methods:Used the thin layer chromatography method to detect the tanshinones and salvia phenolic acids.Results:Tanshinones and salvia phenolic acids were seperated very well by the petroleum ether（60～90℃）-ethyl acetate（5∶1）、toluene-Chloroform-ethyl acetate-methanol-formic acid（2∶3∶4∶0.5∶2）.Conclusions:This method is simple，quick，and is applicable to the quality control of Salvia bowleyana Dunn.

Salvia bowleyana Dunn；Microscopic identification；TLC

R284

Bdoi:10.13638/j.issn.1671-4040.2016.07.042南丹参为唇形科植物南丹参Salvia bowleyana Dunn.的干燥根及根茎。功能为祛瘀止痛、活血通经、清心除烦，用于月经不调、经痛闭经、症瘕积聚、胸腹刺痛、疮疡肿痛、心烦不眠、肝脾肿大。南丹参在江西、浙江亦作丹参入药，含丹参酮ⅡA、隐丹参酮、β-谷甾醇、咖啡酸及丹酚酸A、B、C等成分［1～4］。现代药理研究表明，南丹参水溶性注射液具有抗凝血和抗心肌缺血作用［2］。目前已知南丹参中水溶性成分主要为丹酚酸类和丹参素类，因此，本次实验分别对其原植物、显微及薄层鉴别进行研究，为南丹参药材的质量控制提供依据。

2016-05-18）

江西省自然科学青年基金项目（编号：20142BAB215065）