泪道引流功能的动物模型*

2016-09-27 05:50苏文成樊莲莲张培雯邓峰美
成都医学院学报 2016年4期
关键词:小点泪道粘膜

苏文成,樊莲莲,黄 亚,钱 灿,张培雯,陈 宏,邓峰美

1、德阳市人民医院(德阳 618000);2、成都医学院 病理学与病理生理学教研室(成都 610500)



泪道引流功能的动物模型*

苏文成1,樊莲莲1,黄亚1,钱灿1,张培雯1,陈宏1,邓峰美2△

1、德阳市人民医院(德阳618000);2、成都医学院 病理学与病理生理学教研室(成都610500)

目的利用不同种属的动物寻找和建立可能用于泪道功能研究的动物模型。方法比较和分析猫和大鼠泪道系统的大体解剖结构,并通过泪小管组织光镜切片和电镜切片观察显微解剖结构,从大体解剖和微观两方面比较猫和大鼠泪道结构的异同。结果猫和大鼠泪道大体解剖结构与人十分相似,但泪道粘膜显微结构存在差异。结论猫和大鼠可作为研究泪道功能的动物模型。

泪道引流功能;动物模型;泪道结构

正常的泪道引流系统是维持眼表功能正常的前提。泪道系统最重要要的功能之一就是引流泪液,关于泪道功能的研究目前还很少。关于泪液引流机制,目前得到认同的有泪泵和虹吸机制[1-3]。但在临床工作中发现,患者在使用眼药后即便闭上眼睛,数分钟后咽喉部还是有苦味。因此,在闭眼状态下,仍然存在液体在鼻泪道内流动的现象,而瞬目-泪泵-虹吸机制似乎不能解释这一现象。因此,进一步建立动物模型来研究泪液引流十分重要。由于兔的泪道组织结构与人十分相似,因此,关于泪道阻塞性疾病的研究主要以兔为模型[4-5]。但兔的泪道解剖结构与人有很大区别,因此,兔损伤模型不适用于泪道引流功能及泪液流体动力研究。本实验通过研究猫和大鼠泪道的大体及显微结构,力求建立一种适合于研究泪道功能且更加接近于人的解剖结构的动物模型。

1 材料与方法

1.1试剂

卡波姆940P(Lubrizol Advanced Materials Europe B.V.B.A,批号:0101616771);吸入用七氟烷(250 ml/瓶)(上海恒瑞医药有限公司,批号14021931,国药准字H20070172);盐酸丙美卡因滴眼液(0.5%,2 mg/支)(南京瑞年百思特药业有限公司,批号151125,国药准字H20103352);荧光素钠注射液(0.6 g/支)(广西梧州制药集团股份有限公司,批号160101,国药准字H45021477)。

1.2实验动物

大鼠20只(四川省医学科学院·四川省人民医院实验动物研究所提供),雌性,体质量约0.2 kg。小猫10只,雌雄兼用,体质量0.4~0.6 kg,市售。

1.3标本采集与检测

实验动物常规饲养1 w,异氟烷吸入麻醉。麻醉成功后,显微镜下观察眼睑及泪小点开口等大体解剖结构;分别从上、下泪小点插入冲洗针头进行泪道冲洗;观察泪道结构的传统方法是泪道造影[6]。为观察是否存在泪总管结构,采用了一种新方法:在前期泪道冲洗的基础上行泪道探子扩张泪点及下泪小管,医用泪道冲洗针头将卡波姆凝胶自上泪小点注入泪道填充,记录凝胶形成状态。解剖实验动物,截取泪小管0.5~1.0 cm,用生理盐水稍冲洗后以10%福尔马林固定保存;最后将组织切片行光镜和电镜观察。

2 结果

2.1泪道解剖

2.1.1大体解剖观察猫的泪道有上、下2个泪小点分别开口于鼻侧眦角的上、下睑缘处,泪小点紧贴眼球;上、下泪小点连线与鼻中线平行;大鼠泪道大体结构与猫类似。泪道冲洗:分别自上、下泪小点冲洗,猫和大鼠均可见鼻腔内生理盐水流出,说明泪管通畅且泪液均能引流入鼻腔。

2.1.2泪道凝胶填充凝胶自上泪小点注入后自下泪小点和鼻腔内溢出(图1和图2),所有纳入实验的猫和大鼠均观察到该现象,证明在猫和大鼠的泪道结构中存在泪总管结构。

图1大鼠泪道凝胶填充图

2.2泪道显微结构

2.2.1光镜结果猫的泪道表面被覆复层柱状上皮,极性规整,可见杯状细胞,上皮下纤维结缔组织排列紧密(图3)。大鼠泪道被覆复层扁平上皮,细胞排列极向规整,上皮下纤维结缔组织排列较疏松(图4)。

图2猫泪道凝胶填充图

图3猫泪道光镜结构(HE ×400)

图4大鼠泪道光镜结构(HE ×400)

2.2.2电镜结果猫和大鼠的正常泪道上皮细胞排列整齐、细胞间连接紧密,细胞表面有丰富的微绒毛,微绒毛密度均匀,且长短一致,大量微绒毛凸向管腔。猫和大鼠泪道上皮细胞的形态结构类似(图5和图6)。

图5猫泪道粘膜表层上皮

图6大鼠泪道粘膜表层上皮

3 讨论

本研究结果表明,猫和大鼠的泪小点均开口于鼻侧眦角的睑缘处,有上、下泪小管、泪总管等结构,与人泪道的解剖结构相似。泪道组织光镜结果发现,猫的泪小管粘膜被覆的是柱状上皮,大鼠为复层扁平上皮。兔的泪道粘膜上皮为柱状上皮且富含杯状细胞,与人的泪道粘膜结构相似且有强大的吸收功能[7-9],而复层上皮似乎并不具备吸收功能[10]。电镜结果表明,猫和大鼠的泪道粘膜表层上皮均具有丰富的微绒毛,这与兔及人的泪道粘膜上皮结构相似,从以上研究结果,我们不难发现猫和大鼠的泪道系统解剖结构与人有诸多相似之处,但显微结构又存在一定差异。

关于泪道系统疾病的研究主要集中在泪道阻塞再通、损伤狭窄等方面,几乎都以兔作为动物模型,据文献[5]报道,以兔作为经典泪道阻塞疾病模型的主要原因是兔泪道粘膜组织学结构与人十分相似。文献[11-13]报道,兔的解剖结构与人不同,兔只有一个泪小点,且开口于鼻侧眦角的近穹隆部结膜上,口径宽大;泪小管为一个直径宽、长度短的小管,与泪囊相连。这种结构使得泪液完全可以借助重力因素形成引流;因此兔泪道系统可能根本不存在类似泪泵、泪小管虹吸等功能。人的泪道之所以存在泪泵、泪小管虹吸等泪液引流机制,是因为其具备有眶周肌肉及泪道系统等特殊解剖结构[14]。

本研究显示,猫和大鼠有着和人极其相似的大体解剖结构,我们推测猫和大鼠也具备了某些人类泪液引流动力学特征,除了大体解剖外,发现猫、大鼠、人[15]和家兔[7]的泪道上皮均存在丰富的微绒毛,不同之处:大鼠粘膜上皮为复层扁平上皮,而人、兔和猫均为柱状上皮。在泪液动力学研究中,发现兔泪道粘膜结构和人相似,这种高柱状上皮和丰富的杯状细胞对泪液有着很好的吸收功能[1],而复层柱状上皮并不具有这种吸收功能。猫、大鼠与人的泪道粘膜的差异提示,猫和大鼠的泪道粘膜上皮微绒毛可能参与了泪液引流。

综上所述,猫和大鼠的解剖结构与人的泪道解剖结构相似,可作为研究泪道功能的动物。

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Animal Models for the Drainage Function of Lacrimal System

SuWencheng1,FanLianlian1,HuangYa1,QianCan1,ZhangPeiwen1,ChenHong1,DengFengmei2△.

1.People′sHospitalofDeyang,Deyang618000,China; 2.DepartmentofPathologyandPathophysiology,ChengduMedicalCollege,Chengdu610500,China

ObjectiveTo establish the animal model for the lacrimal drainage function in different animal species. MethodsThe gross anatomy structure and microanatomy structure of nasolacrimal systems in cats and rats were investigated and compared by light microscope and electron microscope to find out the structural differences of the lacrimal drainage system between cats and rats from the perspectives of the gross structure and the microstructure respectively. ResultsThe lacrimal drainage system of cats and rats and that of human beings are similar in the gross anatomy structure but different in the microanatomy structure. ConclusionCats and rats can be used as the animal models for studying the drainage function of the lacrimal system.

Drainage function of lacrimal system; Animal model ; Structure of lacrimal system

10.3969/j.issn.1674-2257.2016.04.006

四川大学德阳校市科技合作专项资金(No:HZYF 201406)

邓峰美,E-mail:dengfm2004@163.com

R77

A

网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1705.R.20160613.1052.014.html

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