湖南永州地区猪乙型脑炎感染情况血清学调查

廖光宇，刘　成，肖建华，陈名海，李阳玉，陈名锋（.湖南省永州市蓝山县畜牧水产局动物卫生监督所，湖南 永州 45800；.湖南省永州职业技术学院生物科学技术系，湖南 永州 45000；.湖南省永州市蓝山县楠市镇动物防疫站，湖南 永州 45800）

湖南永州地区猪乙型脑炎感染情况血清学调查

廖光宇1，刘成2，肖建华3，陈名海1，李阳玉1，陈名锋1（1.湖南省永州市蓝山县畜牧水产局动物卫生监督所，湖南 永州 425800；
2.湖南省永州职业技术学院生物科学技术系，湖南 永州 425000；
3.湖南省永州市蓝山县楠市镇动物防疫站，湖南 永州 425800）

为准确掌握湖南永州地区猪乙型脑炎（JE）（以下简称猪JE）感染情况的流行动态，笔者于2014年5月至2015 年1月从该地区11个县（区）采集的801份猪血清用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法（以下简称ELISA法）检测猪的JEV IgG抗体。结果显示，801份血清中，猪JE抗体阳性371份，猪JE抗体阳性率为46.32%，表明湖南永州地区存在普遍的猪JE感染。本地区不同区域、不同季节甚至猪不同年龄阶段，猪群JE抗体阳性率均有所不同，说明湖南永州地区猪JE感染具有一定的地域性和季节性。

乙型脑炎；血清学；调查；猪

日本乙型脑炎（Japanese encephalitis，JE）简称乙脑，是由日本乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）引起的一种重要的人兽共患传染病，是严重威胁人畜健康的一种中枢神经系统的急性传染病。日本乙型脑炎病毒（JEV）属于黄病毒科黄病毒属，最为常见的以三带嚎库蚊为主要传播媒介的病毒性脑炎，猪是乙型脑炎病毒（JEV）的重要储存宿主和扩增宿主，是乙型脑炎（JE）的主要传染源，是引起母猪繁殖障碍的主要病原之一，对猪的致死率不高，但可引起怀孕母猪流产、死胎或木乃伊胎，也可引起公猪睾丸急性炎症反应或不育，可导致怀孕母猪流产、死胎，导致公猪睾丸炎，可能引起仔猪神经症状，从而给生猪养殖业造成严重损失。

为准确掌握湖南永州地区猪乙型脑炎（JE）（以下简称猪JE）感染情况的流行动态，笔者于2014年5月至2015年1月从该地区11个县（区）采集的801份猪血清用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法（以下简称ELISA法）检测猪的JEV IgG抗体。结果显示，801份血清中，猪JE抗体阳性371份，猪JE抗体阳性率为46.32%，表明湖南永州地区存在普遍的猪JE感染。不同区域、不同季节甚至猪不同年龄阶段，猪群JE抗体阳性率均有所不同，说明了湖南永州地区猪JE感染具有一定的地域性和季节性。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1待检血清对湖南永州地区的冷水滩区、零陵区、祁阳县、东安县、双牌县、道县、江永县、江华县、宁远县、蓝山县和新田县共9县2区的32个猪场随机采集801头猪的血样，用台式高速冷冻离心机（5810R）离心血样，分离血清，血清样品清亮，无溶血，置-20℃冰箱中保存备用。

1.1.2主要仪器及器材酶标仪（MULTISKAN MK3），购自Thermo公司；台式高速冷冻离心机（5810R），购自德国Eppendorf公司。50μL、100μL、200μL精确微量移液器，一次性移液器吸头等。

1.1.3主要试剂猪乙型脑炎酶联免疫（ELISA）诊断试剂盒，由武汉科前动物生物制品有限责任公司生产，批号：140307。主要检测猪血清中乙型脑炎病毒IgG抗体。

1.2方法

1.2.1检测方法按试剂盒说明书进行，主要步骤如下：1：40稀释待检血清（195μL样品稀释液中加放5μL待检血清）、阳性对照和阴性对照（23μL样品稀释液中加放6μL对照血清），取预包被的板，每孔加100μL待检血清或对照血清，置37℃温育30min；每孔加200μL洗涤液洗板5次，每次静置3min；每孔加酶标二抗100μL，置 37℃温育30min；洗涤5次，方法同上；每孔加底物A液和B液各50μL，室温避光显色10min；每孔加终止液50μL，10min内测定结果。

1.2.2结果判定以空白空调零，在酶标仪上测各空OD630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630值大于或等于0.6；阴性对照孔平均OD630值必须小于0.2；样品OD630值大于0.42，判为阳性，OD630值在0.38～0.42之间，判为可疑，OD630值小于0.38，判为阴性。

2　结果与分析

2.1湖南永州地区不同县（区）各场猪JE血清抗体检测结果2014～2015年，在对湖南永州地区11个县（区）的801份血清进行猪JE抗体检测中，抗体阳性率为46.32%，表明湖南永州地区存在普遍的猪JE感染，其中，道县、江华县、宁远县、蓝山县、新田县5县的猪JE抗体阳性率均超过50%。检测结果见表1。

表1　2014～2015年湖南永州地区猪JE血清抗体检测结果

2.2湖南永州地区不同地域各场猪JE血清抗体检测结果

表2检测结果显示，猪JE具有明显的区域性，主要是湖南永州地区南6县，猪JE血清抗体阳性率达到56.36%。由于南6县地区人口密集，养猪场集中，给蚊蝇滋生及传播本病创造较好的条件。根据调查显示，该地区大部分猪场每年的 3～4月份会进行猪JE疫苗的免疫，但由于以上客观因素存在，目前还不能鉴定这么高的抗体阳性率是为自然感染所致，还是疫苗免疫产生的抗体，该部分工作还有待于继续研究。但是，根据临床发病情况的调查，发现猪JE发病率较低，一般为零星散发。

表2　不同地域猪JE血清抗体检测结果

2.32014～2015年湖南永州地区各季节猪JE血清抗体检测结果

在2014年5月至2015年1月的血清样品的猪JE抗体检测中发现5、6月份猪JE抗体阳性率较低，8月份血清抗体阳性率最高，达到55.99%，7月份紧随其后，达到47.50%见表3。在对猪进行JE免疫后，2～3周产生抗体，所以5、6月份的抗体水平还没有达到峰值，抗体阳性率较低。1～2月后抗体水平达到更高水平，抗体阳性率达到较高水平，起到更好的免疫保护效果，但由于夏季是猪JE的流行季节，再次感染几率很大，免疫保护效果仍然不能达到理想的抗体阳性率。

表3　各季节猪JE血清抗体检测结果

2.42014～2015年湖南永州地区各年龄阶段的猪JE血清抗体检测结果

在对各阶段的猪JE的血清抗体检测中，母猪的血清抗体阳性率达到76.67%，公猪的血清抗体阳性率达到75.00%，由于公母猪已多次免疫，说明免疫效果不太好；而哺乳仔猪、保育猪、育肥猪的JE血清抗体阳性率分别为36.20%、35.56%、38.89%见表4。由于哺乳仔猪、保育猪和育肥猪一般不做免疫，抗体阳性说明该阶段猪JE感染率还是比较高的，由此也可推断公母猪抗体阳性率并不全是免疫所致，也有野毒感染的原因。

表4　各年龄阶段的猪JE血清抗体检测结果

3　小结与讨论

3.1JE是一种人畜共患的自然疫源性传染病，多种动物和人感染后都可以成为本病的传染源，猪的感染最为普遍。猪感染后出现病毒血症的时间较长，血液中的病毒含量较高，媒介蚊又嗜其血，而且猪的饲养量数量大，更新快，容易通过猪—蚊—猪的循环，扩大病毒的传播。一般预防此病是在流行季节来到之前进行免疫，给动物注射疫苗，不但可以预防此病的流行，而且还可以降低动物的带毒率。所以及时而准确的血清抗体检测，对于预防和降低乙型脑炎的流行具有重大意义。为了掌握猪JE在湖南永州地区的免疫保护效果及感染流行情况，从而为防治该病作出合理的评估，在该地区11个县（区）的801份猪血清样品的JE抗体检测中，血清抗体阳性数达到371份，抗体阳性率达到46.32%，可见湖南永州地区的猪JE感染率较高，存在普遍的猪JE感染。

3.2猪JE具有明显的季节性，虫媒是传播JE的重要媒介。夏秋季节是蚊类大量孳生的季节，也是JE的高发季节。因此，JE的免疫一般在流行季节来到之前进行免疫。在2014年5月到2015年1月的血清样品的乙型脑炎抗体检测中发现5、6月份JE抗体阳性率不到40%，7、8月份阳性率达到50.00%，而后抗体阳性率下降。在对猪进行JE免疫后，2～3周产生抗体，所以5、6月份的抗体水平还没有达到峰值，抗体阳性率较低。1～2个月后抗体水平达到更高水平，抗体阳性率达到较高水平，起到更好的免疫保护效果，但由于夏季是乙型脑炎的流行季节，再次感染几率很大，应加强防控。

3.3本次调查发现各年龄猪群猪JE抗体阳性检出率有所差别，哺乳仔猪、保育猪的JE血清抗体阳性率分别为36.2%、35.56%。而永州位于湘南南部，地势西南高，东北低，严冬期短，春夏多雨，日照充足，南（山区）北（丘陵）气候差异较大，适宜于蚊虫繁殖，是湖南省JE的高发地区之一。应加强对小规模饲养场、散养户的JE监测，重点管理好幼龄动物，控制JE流行区的家畜和家禽运往非流行区，加强对动物（猪）和易感人群的预防接种、消灭传播媒介等。

［1］殷震，刘景华.动物病毒学［M］.第二版.北京：科学出版社，1997：633-641.

［2］余波，等.猪流行性乙型脑炎的血清学调查［J］.中国畜牧兽医，2010，37（4）：222-223.

［3］范行良，等.流行性乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2E基因的稳定性［J］.病毒学报，2002，18（01）：39-47.

［4］赵承保，等.永州市40年间流行性乙型脑炎流行病学分析［J］.现代预防医学，1998，25（04）：462-463.

10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.08.030

廖光宇（1958～），湖南省永州市蓝山县人，大专，兽医师，主要从事动物养殖与疫病防控和动物疫病检疫