RBM3在胃癌组织和转移淋巴结中的表达及其临床意义

张维建 方瑶 蒋飞照

RBM3在胃癌组织和转移淋巴结中的表达及其临床意义

张维建 方瑶 蒋飞照

目的 探讨RNA结合基序蛋白3（RBM3）在胃癌组织和转移淋巴结中的表达及其临床意义。方法 免疫组织化学法测定80例胃癌组织和癌旁正常组织及清扫淋巴结中RBM3表达量并予以比较。结果 RBM3在胃癌和正常胃黏膜中的阳性表达率分别为82.5%（66/80）和36.3%（29/80），两者差异有统计学意义（P＜0.01）。阳性淋巴结RBM3的表达率为78.4%（58/74），和胃癌组织的表达率差异无统计学意义（P＞0.05）。胃癌RBM3的表达与胃癌肿瘤浸润深度和肿瘤分化程度有关（P＜0.05），阳性淋巴结中RBM3的表达和原发肿瘤的分化程度有关（P＜0.05）。结论 RBM3在胃癌组织和阳性淋巴结中高表达，与肿瘤细胞分化程度和（或）肿瘤浸润深度有关，可以作为胃癌恶性度和预后的判定指标。

胃癌 RBM3 淋巴结转移 临床病理 预后

恶性肿瘤的无限制增殖导致细胞能量代谢异常和肿瘤微环境缺氧［1，2］，从而诱导肿瘤细胞某些基因和蛋白表达异常。本研究通过免疫组织化学方法检测原发胃癌组织和转移淋巴结中RNA结合基序蛋白3 （RNA-binding motif protein 3，RBM3）的表达情况，探讨是否有表达异常及其与临床病理的关系。

1 临床资料

1.1 一般资料 收集本院2014年6月至12月行胃癌根治手术并病理证实的80例胃癌患者的临床病理资料。其中男52例，女28例；年龄37～85岁，平均年龄（62.5±24.6）岁。所有患者术前均未接受放疗或化疗等抗肿瘤治疗。

1.2 实验试剂和方法 RBM3兔抗人多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，SP试剂盒和即用型二氨基联胺（DAB）显色液购自北京中杉制品有限公司。胃癌组织和癌旁3cm正常组织及清扫的淋巴结各1份新鲜获取后甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，连续4μm厚度切片。采用免疫组织化学SP试剂盒检测，严格按照试剂盒说明进行。简要步骤为常规脱蜡，枸橼酸盐缓冲液高压修复，H2O2封闭，山羊血清室温封闭，加入稀释1：100的HIF-1α抗体或RBM3抗体孵育，磷酸盐缓冲液洗涤，加酶标抗鼠/兔聚合物孵育，DAB染色，苏木精复染，常规脱水透明和封片，显微镜观察和摄照。

1.3 结果判定 RBM3主要表达于细胞核中，有棕褐色颗粒染色为阳性，表达强度按阳性细胞所占百分比进行判断，取其平均值，分为4级：阳性细胞＜1%，为1分，1%～25%为2分，26%～75%为3分，≥75% 为4分。将1～2分记为阴性，3～4分记为阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSSl3.0统计软件。计数资料比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 原发胃癌和癌旁组织及转移淋巴结中RBM3的表达 RBM3在胃癌和正常胃黏膜中的阳性表达率分别为82.5%（66/80）和36.3%（29/80），两者差异有统计学意义（P＜0.01）。80例获取淋巴结标本中，74例有淋巴结转移，阳性淋巴结RBM3的阳性表达率为78.4%（58/74），和胃癌组织的表达率差异无统计学意义（P＞0.05）。74例阳性淋巴结RBM3的表达相对原发肿瘤有所下调，但组间差异亦无统计学意义（P＞0.05）。典型病例胃癌阳性染色图见图1，淋巴结阳性染色图见图2。

图1 胃癌阳性染色图

图2 淋巴结阳性染色

2.2 胃癌组织和转移淋巴结RBM3的表达与临床病理的关系 胃癌RBM3的表达与胃癌肿瘤浸润深度和肿瘤分化程度有关（P＜0.05），与患者的性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移和有无脉管癌栓无关（P＞0.05）。阳性淋巴结转移中RBM3的表达和原发肿瘤的分化程度有关（P＜0.05），与其他临床病理指标没有相关性。见表1。

表1 胃癌组织和转移淋巴结RBM3的表达与肿瘤临床病理的关系

3 讨论

研究发现RBM3参与基因的稳定性和表达调节，促进肿瘤调节蛋白的表达，参与肿瘤的发生发展［3，4］。RBM3在多种恶性肿瘤中表达上调，并且与肿瘤病理和预后有相关性［5，6］。在肿瘤发展过程中，RBM3的表达与细胞增殖程度呈正相关，随着肿瘤增值活跃表达量显著增加，在静止或终末分化肿瘤细胞中低表达。Liv Jonsson等［7］研究发现伴有胃黏膜小肠化生的胃癌中RBM3的表达明显高于无上皮化生的胃癌，同时发现RBM3的过表达和Ki-67表达有关，而Ki-67是细胞增殖标志物，因此说明RBM3参与胃上皮细胞增值，可能和胃癌肿瘤细胞的发生发展有关。本研究发现胃癌肿瘤组织相对正常组织RBM3的阳性表达率明显升高，且高中分化胃癌的RBM3表达与低或未分化的肿瘤的表达差异明显，说明RBM3参与胃癌肿瘤细胞的增值和发展。研究发现在直肠癌、前列腺癌和乳腺癌等恶性肿瘤中，低RBM3表达量意味着肿瘤恶性程度高，预后差［5，6］。本研究结果发现RBM3的表达与肿瘤浸润深度和肿瘤分化程度有关，而后两者是衡量肿瘤恶性程度的指标，因此RBM3也是胃癌恶性程度的参考因素之一。同时低RBM3表达的胃癌，肿瘤浸润深度增加，肿瘤分化程度偏低，临床病理分期相对较晚，与国内外研究［7］结果相同，因此测定胃癌组织中RBM3表达量可以作为预后的判断因素之一，同时RBM3低表达是胃癌预后差的独立危险因数［8］。但本研究暂无法统计术后生存率，有待于进一步论证。

有报道［9］前列腺癌转移灶的RBM3表达相对原发灶明显下调，但本研究中，74例转移淋巴结中，有58例RBM3表达阳性，阳性率为78.4%，和原发胃癌的阳性率相近，同时转移淋巴结的RBM3表达量有所下调，但两组差异无统计学意义（P＞0.05）。本组患者均未出现除淋巴结转移外的其他转移病灶，因此不能评估肝脏或腹腔转移肿瘤的RBM3表达情况。阳性淋巴结RBM3表达和肿瘤细胞分化程度有关，与肿瘤浸润深度、肿瘤大小、有无淋巴结转移和脉管癌栓无关，和原发肿瘤RBM3表达的相关因素有所不同，可能原因在于肿瘤浸润深度是淋巴结转移的相关因素，具体原因有待进一步验证。

总之，RBM3作为细胞增殖和恶性肿瘤相关的分子，在胃癌和转移淋巴结中表达增加，与肿瘤分化程度和（或）肿瘤浸润深度有关，其低表达意味着肿瘤的预后较差，因此可以作为肿瘤恶性程度和预后的指标之一。

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7 Liv Jonsson，Char1otta Hedner，A1exander Gaber，et a1.High expression of RNA-binding motif protein 3 in esophagea1 and gastric adenocarcinoma corre1ates with intestina1 metap1asia-associated tumors and independent1y predicts a reduced risk of recurrence and death. Biomark Ress，2014，21（1）：1～11.

8 刘磊，潘志坚，韩亮.RNA结合基序蛋白3在胃癌组织的表达及临床意义.中华实验外科杂志，2015，32（6）：1410～1412.

9 Jonsson L，Gaber A，U1mert D，et a1.High RBM3 expression in prostate cancer independent1y predicts a reduced risk of biochemica1 recurrence and disease progression.Diagn Patho1，2011，6（1）：50～57.

Objective To explore the expressions of RNA-binding motif protein 3（RBM3）in gastric carcinoma and their clinical signifi cances. Method The expression of RBM3 were detected by immunohistochemical staining in 80 patients with gastric carcinoma. Results The positive expression rate of RBM3 in gastric carcinoma（82.5%）was signifi cantly higher than that in normal tissue（36.3%）. The positive expression rate of RBM3 in metastatic lymph node（78.4%）had no different with that in primary gastric carcinoma. The positive expression of RBM3 in gastric carcinoma was signifi cantly associated with the depth of invasion and tumor differentiation，The positive expression of RBM3 in metastatic lymph node was signifi cantly associated with tumor differentiation. Conclusion The expressions of RBM3 were higher in gastric carcinoma and metastatic lymph node than in normal tissue. They were correlated to tumor differentiation or tumor-infi ltrating，the detection of RBM3 can be used as biomarkers to predict tumor malignancy and prognosis of those patients.

Gastric carcinoma RNA-binding motif protein 3 Lymph node metastasis Clinicopathology Prognosis

浙江省温州市科技计划项目（Y20140369）

325000 温州医科大学附属第一医院