肾脏去交感神经对肥胖型高血压家兔血压及相关神经体液因子的影响

王　彬， 王海昌， 薛玉生， 范博渊， 尚福军

(第四军医大学唐都医院心内科，西安　710038； *通讯作者，E-mail：shangfujun4@163.com)



肾脏去交感神经对肥胖型高血压家兔血压及相关神经体液因子的影响

王彬， 王海昌， 薛玉生， 范博渊， 尚福军*

(第四军医大学唐都医院心内科，西安710038；*通讯作者，E-mail：shangfujun4@163.com)

目的观察肾脏去交感神经支配术(renal sympathetic denervation，RSD)对肥胖型高血压家兔的血压及相关神经体液因子的影响。方法大耳白兔40 只，随机分为对照组、对照+射频组、肥胖组、肥胖+射频组，对照组和对照+射频组动物给予普通饲料饲养，肥胖组和肥胖+射频组动物给予高能饲料饲养。饲养8周后，通过经腹肾动脉外膜射频消融进行RSD，术后继续饲养8周，测定血压，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中去甲肾上腺素(NE)、精氨酸血管加压素(AVP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)的变化。结果与对照组比较，肥胖+射频组的血压无显著差异(P>0.05)；与肥胖组比较，肥胖+射频组的血压显著降低(P<0.05)。肥胖组NE、AVP、AngⅡ和Ald 较对照组明显升高(P<0.05)，RSD后肥胖+射频组NE、AVP、AngⅡ和Ald 较肥胖组明显下降(P<0.05)。结论RSD可以降低肥胖型高血压动物的血压，降低血浆NE、AVP、AngⅡ和Ald 水平。

肥胖型高血压；肾脏去交感神经支配术；神经体液因子；兔

高血压病是心脑血管事件主要危险因素之一。然而，5%-10%的高血压患者存在降压药物抵抗现象，称为顽固性高血压[1]。Krum等[2]2009年首次报道了肾脏去交感神经支配术(renal sympathetic denervation，RSD)治疗难治性高血压的方法，显示了良好的降压效果，为顽固性高血压的治疗提供了新的选择。然而，新近的研究结果显示RSD未能起到明显的降压作用，对RSD临床应用提出了质疑和挑战[3]。但对此全盘否定也为时尚早。引起高血压的原因较多，如何选择不同病因引起的顽固性高血压患者进行RSD成为研究重点。肥胖是高血压病的重要危险因素，也是导致顽固性高血压的主要原因之一，但RSD能否降低肥胖型高血压的血压水平，目前尚不明确。因此，本文以肥胖型高血压动物为研究对象，研究RSD对肥胖型高血压的影响，并探讨相关神经体液因子水平的变化及其与降压作用的关系，为RSD的临床应用提供新的实验依据。

1　材料和方法

1.1实验动物

5-6月龄大耳白兔，体质量2-3 kg，标准饲料及高能饲料均由第四军医大学动物实验中心提供。

1.2主要试剂及仪器

去甲肾上腺素(NE)、精氨酸血管加压素(AVP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)试剂盒(北京奇松生物有限公司)，戊巴比妥钠(北京百奥莱博科技有限公司)，肝素钠注射液(上海第一生化药业有限公司)。动脉压力传感器(荷兰飞利浦)，GY 6328多导电生理仪(华南医电)，射频消融仪(美国圣犹达)，射频消融导管(强生)，酶标仪(美国Bio-Tek)。

1.3肥胖型高血压兔模型的建立及分组

大耳白兔40 只，随机分为对照组、对照+射频组、肥胖组、肥胖+射频组。每组10只。参照文献[4]通过高能饮食建立肥胖型高血压模型。对照组给予普通饲料喂养8周，肥胖组给予高能饲料(苜蓿草粉31%、玉米36%、麸皮15%、豆饼12%、鱼粉3%、骨粉2%、食盐0.5%、多维0.4%和微量元素0.1%)，连续喂养8周。

1.4经腹双侧肾动脉外膜射频消融

连续喂养8周，大耳白兔称重，术前2 h给予肌注青霉素(10万U/kg)。耳缘静脉注射戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉，背外侧手术切口，暴露并分离双侧肾动脉后行腹动脉穿刺并连接多导生理记录仪测定血压，并抽取血液测定神经体液因子水平，分别围绕双侧肾动脉外膜沿轴向旋转分割的6个区域行温控射频消融(4-6 W，43-46 ℃)，每个消融部位消融2 min。术后逐层缝合腹壁，肌注青霉素(10万U/kg)。对照组+射频组和肥胖+射频组进行双侧肾动脉消融，其余两组除不进行肾动脉消融外，其他处理相同。

1.5血压测定

继续饲养8周后，大耳白兔称重，戊巴比妥钠(30 mg/kg)耳缘静脉注射麻醉，颈外侧切开，分离颈总动脉，插入鞘管，连接多导生理记录仪的压力转换器，测定血压。

1.6血液神经体液因子的测定

采用ELISA方法测定兔血浆NE、AVP、AngⅡ和Ald浓度。血管鞘内抽取动脉血，室温静止3 min 后，1 000×g离心，取上清液，ELISA方法测定各组神经体液因子浓度。

1.7统计学分析

2　结果

2.1动物一般状况

整个实验过程中无动物死亡，4只家兔RSD后出现食欲不振和活动量减少，但均不严重，3 d内恢复正常。

2.2实验后实验兔的体重、心率及血压情况

实验前各组实验兔体重无明显差异，实验后，分别与对照组及对照+射频组比较，肥胖组和肥胖+射频组的体质量均明显增加(P<0.05)； 4组兔子的心率无显著差异(P>0.05)。与对照组和对照+射频组比较，肥胖+射频组的血压无显著差异(P>0.05)；与肥胖组比较，肥胖+射频组的血压显著降低(P<0.05，见表1)。

表1实验后各组实验兔体重、心率及血压的比较

Table 1Comparison of rabbit body weight，heart rate and blood pressure among four groups

组别体质量(kg)心率(次/min)收缩压(mmHg)对照组3.36±0.31228±3194±7对照+射频组3.12±0.28231±3392±6肥胖组4.64±0.37*241±36133±9肥胖+射频组4.52±0.33#238±35105±7△

与对照组比较，*P<0.05；与对照+射频组比较，#P<0.05；与肥胖组比较，△P<0.05

2.3各组血浆神经体液因子浓度比较

肥胖组兔的血浆NE、AVP、AngⅡ和ALD浓度均较对照组显著升高，差异有统计学意义(均P<0.05)；与肥胖组比较，肥胖+射频组兔的血浆NE、AVP、AngⅡ和ALD浓度均显著下降，差异有统计学意义(均P<0.05，见表2)。

3　讨论

肥胖型高血压发病率极高，是导致顽固性高血压的主要原因之一，这类人群有较高的患病率和死亡率，包括冠心病、充血性心力衰竭、心源性猝死、慢性肾病、肾终末期疾病和中风[5]。交感神经系统激活在高血压病发展过程中起着重要作用，近年来，多项临床研究证实肾脏去交感神经支配术作为一种新的手段治疗顽固性高血压，可明显降低难治性高血压患者的血压，为难治性高血压的治疗提供了新的希望[2,6,7]。

表2消融对各组实验兔的神经体液因子的影响(ng/L)

Table 2Effects of RSD on neurohormonal factors in experimental rabbits(ng/L)

组别NEAVPAngⅡAld对照组122.3±16.28.3±1.527.6±7.89.8±1.6对照+射频组113.6±14.37.6±1.323.4±8.09.3±1.4肥胖组180.3±25.6#19.8±2.1#53.8±9.8#27.3±5.0#肥胖+射频组145.9±22.3*11.9±1.7*32.1±8.7*14.5±2.8*

与肥胖组比较，*P<0.05；与对照组比较，#P<0.05

肥胖型高血压发病机制复杂多样，交感神经活性异常增高可能是其发病的关键因素之一[8]。肾交感神经激活可以通过以下机制影响血压:①肾素的分泌，激活肾素-血管紧张素-醛固酮；②肾交感神经的传入；③容量性负荷的增加；④其他，如内分泌紊乱、肾动脉的管壁增厚等[9,10]。本实验通过高能饲料喂养建立肥胖型高血压模型，为了得到客观的实验结果，同时设立了对照组、对照+射频组，通过进行双侧肾交感神经射频消融观察其对血压的影响，实验结果显示：肥胖+射频组实验兔的血压较肥胖组显著下降，证实了RSD可降低肥胖型高血压的血压水平，其降压机制可能是通过降低肾动脉交感神经节传入纤维活性，达到降低血压的治疗效果。

高血压患者由于交感神经过度激活可引起相关神经体液因子进一步升高，包括血浆中NE、AVP、AngⅡ和Ald等，在过度激活的交感神经及神经体液因子的共同作用下，传至中枢系统，进一步激活交感神经系统，最终导致血压异常升高[11]。为了进一步探讨RSD降压和改善心脏重构的机制，本研究测定了血浆中NE、AVP、AngⅡ和Ald的变化，实验结果显示：双侧肾交感神经射频消融后实验兔血浆中NE、AVP、AngⅡ和Ald 水平也显著下降，这与其他相关研究的实验结果一致[7，12，13]，表明RSD可降低肥胖型高血压的血压水平，并可降低血浆中NE、AVP、AngⅡ和Ald水平，进一步说明RDS可通过降低交感神经活性及调节神经体液因子水平，最终达到降压效果。

综上所述，本实验证明RSD可降低肥胖型高血压模型动物的血压水平，其可能是通过降低交感神经活性及调节神经体液因子水平发挥降压作用，血浆中的NE、AVP、AngⅡ和Ald浓度可作为RSD治疗效果的预测指标。然而，顽固性高血压成因复杂，不同类型的高血压发病机制不尽相同，需要进一步研究顽固性高血压的病因，并进行相关治疗方案研究，以及RSD在不同类型高血压中的治疗作用。

[1]ESH/ESC Task Force for the Management of Arterial Hypertension.2013 Practice guidelines for the management of arterial hypertension of the European Society of Hypertension(ESH)/the European Society of Cardiology(ESC):ESH/ESC Task Force the Management of Arterial Hypertension(ESC):ESH/ESC Task Force the Management of Arterial Hypertension[J].J Hypertension,2013,31(10):1925-1938.

[2]Krum H,Schlaich M,Whitbourn R,etal.Catheter-based renal sympathetic denervation for resistant hypertension:a multicentre safety and proof-of-principle cohort study[J].Lancet,2009,373(9671):1275-1281.

[3]Bhatt DL,Kandzari DE,O’Neill WW,etal.A controlled trial of renal denervation for resistant hypertension[J].N Engl J Med,2014,370(15):1393-1340.

[4]马利芹，耿光瑞，孙秀梅．大黄减肥复方对家兔脂肪代谢的影响[J].黑龙江畜牧兽医，2009，(3):107-108．

[5]Vongpatanasin W.Resistant hypertension:a review of diagnosis and management[J].JAMA,2014,311(21):2216-2224.

[6]Papademetriou V,Tsioufis CP,Sinhal A,etal.Catheter-based renal denervation for Resistant hypertension:12-month results of the enlightn Ⅰfirst-in-human study using a multielectrode ablation system[J].Hypertension,2014,64(3):565-572.

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[12]尚福军，王捷频，于亮，等.肾脏去交感神经对肾性高血压的影响及预测指标的筛选[J].岭南心血管病杂志，2015，21(6):858-861.

[13]Streitparth F,Walter A,Stolzenburg N,etal.MR-guided periarterial ethanol injection for renal sympathetic denervation:a feasibility study in pigs[J].Cardiovasc Intervent Radiol,2013,36(3):791-796．

Effects of renal sympathetic denervation on obesity-associated hypertension and related neurohormonal factors in rabbits

WANG Bin, WANG Haichang, XUE Yusheng, FAN Boyuan,SHANG Fujun*

(DepartmentofCardiology,TangduHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi’an710038,China;*Correspondingauthor,E-mail:shangfujun4@163.com)

ObjectiveTo investigate the effects of renal sympathetic denervation on obesity-associated hypertension and related neurohormonal factors in rabbits.MethodsForty rabbits were randomly divided into four groups: control group, control+ablation group, obesity group and obesity+ablation group. Rabbits in control group and control+ablation group were fed by common diet, and rabbits in obesity group and obesity+ablation group were fed by high energy diet. After feeding for eight weeks, RSD was carried out by transabdominal radiofrequency ablation of renal arterial adventitia. Then rabbits were continuously fed for eight weeks, and then blood pressure was measured. Plasma concentrations of norepinephrine(NE), arginine vasopressin(AVP), angiotensin Ⅱ(Ang Ⅱ) and aldosterone(ALD) were determined by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).ResultsCompared with control group, the systolic blood pressure(SBP) showed no significant change in obesity+ablation group(P>0.05).After RSD,the SBP in obesity+ablation group was significantly lower than in obesity group(P<0.05). Compared with control group, plasma concentrations of NE, AVP, Ang II and Ald were significantly decreased in obesity group(P<0.05). Compared with obesity group, plasma concentrations of NE, AVP, Ang II and Ald in obesity+ablation group were declined significantly after RSD(P<0.05).ConclusionRSD can reduce the blood pressure of obesity-associated hypertension, and reduce the levels of NE, Ang II, AVP and Ald.

obesity-associated hypertension;renal sympathetic denervation;neurohormonal factor;rabbits

陕西省卫生厅科研基金项目资助(2012D72)

王彬，男，1981-05生，硕士，主治医师，E-mail:binwang800@163.com

2016-04-25

R544.1

A

1007-6611(2016)08-0703-03

10.13753/j.issn.1007-6611.2016.08.006