2种检测方法对不同年龄组涂阴肺结核病诊断价值的对比分析

李玉静，吴海峰，孙志平，马京华，王　亮，吕翠环*

(1.河北省胸科医院检验科，河北 石家庄 050041；2.河北中医学院护理学院,河北 石家庄 050200；3.河北省胸科医院呼吸科，河北 石家庄 050041)



·论著·

2种检测方法对不同年龄组涂阴肺结核病诊断价值的对比分析

李玉静1，吴海峰1，孙志平1，马京华2，王亮3，吕翠环1*

(1.河北省胸科医院检验科，河北 石家庄 050041；2.河北中医学院护理学院,河北 石家庄 050200；3.河北省胸科医院呼吸科，河北 石家庄 050041)

目的探讨γ干扰素释放试验(T-SPOT.TB)及结核蛋白芯片检测对不同年龄组抗酸染色涂片阴性肺结核病的诊断价值。方法分别选取已确诊的涂阴肺结核病例191例、肺炎病例91例,分为3组：青少年组(7～40岁)，中年组(>40～65岁)，老年组(>65岁)，均进行T-SPOT.TB 及结核蛋白芯片检测。结果青少年组和中年组2种检测方法敏感度差异有统计学意义(P<0.05)、特异性差异无统计学意义(P>0.05)，而老年组敏感度、特异度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论T-SPOT.TB方法对青少年及中年涂阴肺结核的诊断有一定的价值，对老年涂阴肺结核的诊断则应视具体情况选择。

结核,肺；干扰素γ释放试验；蛋白质芯片

10.3969/j.issn.1007-3205.2016.06.019

目前临床常用诊断肺结核的方法有结核菌培养、抗酸染色涂片、荧光定量PCR、结核抗体检测、 γ干扰素释放试验(T-SPOT.TB)等。改良罗氏结核菌培养是诊断肺结核的“金标准”，但培养时间长，一般为4～8周，影响结核病的及时诊断。痰涂片抗酸染色能快速检测结核菌，但对于涂片阴性的患者诊断很困难。T-SPOT.TB与结核蛋白芯片检测结核抗体是快速辅助诊断肺结核的方法。国内既往鲜见年龄对结核患者免疫机制影响[1]的报道。本研究通过对这2种检测方法进行对比分析，探讨其对不同年龄组涂阴肺结核病的诊断价值。

1　资料与方法

1.1一般资料选取河北省胸科医院2013年10月—2014年10月确诊为肺结核[2]且经痰涂片抗酸染色结果阴性的患者191例分为3组：青少年组(7～40岁)98例，男性57例，女性41例,年龄8～39岁，平均(23.78±6.01)岁；中年组(>40～65岁)67例，男性44例，女性23例，年龄41～65岁，平均年龄(53.55±7.08)岁；老年组(>65岁)26例，男性18例，女性8例，年龄61～82岁，平均(75.04±4.74)岁。选择同期住院的肺炎患者91例为对照组，同样分为3组：青少年组(7～40岁)39例，男性20例，女性19例，年龄8～38岁，平均(22.90±7.92)岁；中年组(>40～65岁)37例，男性22例，女性15例，年龄41～63岁，平均(52.76±6.59)岁；老年组(>65岁)15例，男性8例，女性7例，年龄66～87岁，平均(73.73±7.27)岁。

1.2方法对结核组和肺炎组282例患者进行T-SPOT.TB及结核蛋白芯片检测。

1.2.1T-SPOT.TB法①外周血单个核细胞的分离、收集与计数。②体外抗原刺激与孵育。③结果判定：阴性对照孔斑点数为0～5个，抗原A和抗原B检测孔任一孔计数-阴性孔计数≥6判为阳性；如果阴性对照孔斑点数≥6,检测孔斑点数≥2倍阴性孔斑点数判为阳性。操作过程严格按照说明书进行。

1.2.2结核蛋白芯片法严格按照南京大渊结核分枝杆菌IgG抗体检测试剂盒(蛋白芯片)说明书进行操作，检测脂阿拉伯甘露聚糖抗体、38 000抗体、16 000抗体。结果用南京大渊生物技术公司生产的PBT-X2型生物识别仪自动判读。一种抗体阳性，则判断该患者结核分枝杆菌抗体阳性。

1.3统计学方法应用SPSS 17.0对所得数据进行统计学分析，计数资料比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　　果

青少年组和中年组T-SPOT.TB法与结核蛋白芯片法检测敏感度差异有统计学意义(P<0.05)、特异度差异无统计学意义(P>0.05)，而老年组敏感度、特异度差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1～3。

表1　青少年组敏感度及特异度比较

表2　中年组敏感度及特异度比较

表3　老年组敏感性度特异度比较

3　讨　　论

痰涂片抗酸染色是检测结核菌的快速方法，患者可以快速取得检验结果，痰涂片抗酸染色阳性患者则可快速诊断和治疗，但其敏感度低[3]；而对涂阴患者的诊断则相对困难。T-SPOT.TB及结核蛋白芯片法是近几年发展起来的快速结核病实验诊断的新技术，可以快速检测结核菌[4-7]。本研究收集涂阴肺结核191例,按国家年龄划分标准分为3组,分别进行T-SPOT.TB及结核蛋白芯片检测，并进行对比分析。

T-SPOT.TB原理是结核分枝杆菌感染机体后使其产生记忆性T细胞，结核分枝杆菌特异性抗原再次刺激机体时使其释放γ干扰素，可以在体外对释放的γ干扰素水平或能有效释放γ干扰素的T细胞进行定量，从而判断机体是否是结核分枝杆菌的感染者。结核蛋白芯片以微孔滤膜为载体，利用微阵列技术将纯化的脂阿拉伯甘露聚糖、经基因工程重组DNA技术生产纯化的结核菌16 000和38 000特异性抗原固定在特制的载体上，利用微孔滤膜的渗滤、浓缩、凝集作用，捕捉被检样品中特异性抗体,使抗原抗体反应在固相膜上快速进行，复合物再与胶体金标记的兔抗人IgG作用,在膜上形成紫红色的斑点。然后通过芯片识别系统进行结果分析。结核蛋白芯片法可分别检测结核菌的特异性细胞壁脂阿拉伯甘露聚糖抗体、16 000抗体和38 000抗体，以快速诊断结核菌感染情况。

本研究结果显示，青少年组、中年组及老年组T-SPOT.TB检测的敏感度分别为85.7%、77.6%和76.9%，结核蛋白芯片检测的敏感度分别为67.3%、58.2%和57.7%，青少年组及中年组T-SPOT.TB检测敏感度明显高于结核蛋白芯片检测，差异有统计学意义(P<0.05)，而老年组2种检测方法差异无统计学意义。本研究T-SPOT.TB检测的敏感度高于Yan等[8]的研究结果，而Yan等的研究未对所选病例进行痰菌抗酸染色检测结果分类，且病例来源为肺结核与肺外结核；与Dai等[9]和刘艳等[10]的分析结果基本相符，但其均未对患者进行年龄分组。本研究结核蛋白芯片检测的敏感度与吴友根等[11]和杨群等[12]相符。

本研究结果还显示，青少年组、中年组及老年组T-SPOT.TB检测的特异度分别为89.7%、70.3%和80.0%，结核蛋白芯片检测的特异度分别为74.4%、73%和86.7%，2种检测方法差异无统计学意义。本研究T-SPOT.TB检测的特异度低于刘艳等[10]的报道，原因可能与年龄和样本例数有关。

本研究青少年组及中年组T-SPOT.TB检测的敏感度明显高于结核蛋白芯片检测；而老年组2种检测方法的敏感度差异无统计学意义，可能与研究本年龄组样本量偏少及老年人的免疫功能低下有关。2种检测方法在3个年龄组中的特异度差异均无统计学意义。笔者认为临床在选择诊断涂阴肺结核检测方法时，对于青少年及中年人应优选T-SPOT.TB检测，老年人应根据具体情况而定。

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[3]Christensen AS,Andersen AB,Thomsen VO,et al. Tuberculous meningitis in Denmark: a review of 50 cases[J]. BMC Infect Dis,2011,22(11):47.

[4]Yu SN,Jung J,Kim YK,et al. Diagnostic Usefulness of IFN-Gamma Releasing Assays Compared With Conventional Tests in Patients With Disseminated Tuberculosis[J]. Medicine (Baltimore),2015,94(28):e1094.

[5]Zhang LF,Liu XQ,Zhang Y,et al. A prospective longitudinal study evaluating a T-cell-based assay for latent tuberculosis infection in health-care workers in a general hospital in Beijing[J]. Chin Med J(Engl),2013,126(11):2039-2043.

[6]吴友根,杨兴萍,王军,等.结核蛋白芯片检测诊断结核病的价值[J].中华感染与化疗杂志,2014，14(3):196-198.

[7]吴海露，张振玉，袁捷，等.结核感染T细胞斑点试验在结核性腹膜炎诊断中的临床应用[J].临床荟萃,2012,27(23):2046-2049.

[8]Yan L,Xiao H,Han M,et al. Diagnostic value of T-SPOT.TB interferon-γ release assays for active tuberculosis[J]. Exp Ther Med,2015,10(1):345-351.

[9]Dai Y,Feng Y,Xu R,et al. Evaluation of interferon-gamma release assays for the diagnosis of tuberculosis: an updated meta-analysis[J]. Eur J Clin Microbiol Infect Dis,2012,31(11):3127-3137.

[10]刘艳，浦永兰，王杰.T-SPOT.TB在菌阴肺结核中的诊断价值[J].中国医学创新,2013,10(31):125-126.

[11]吴友根，刘红兵，杨兴萍，等.结核蛋白芯片对肺结核及肺外结核的诊断价值[J].实验与检验医学,2014,14(5):503-504.

[12]杨群，江晓静. 结核蛋白芯片对肺结核及肺外结核的诊断价值[J].西安交通大学学报:医学版,2012,33(1):130.

(本文编辑：刘斯静)

Comparative analysis of the diagnostic value of smear negative pulmonary tuberculosis in different age groups by two methods

LI Yu-jing1, WU Hai-feng1, SUN Zhi-ping1, MA Jing-hua2, WANG Liang3, LV Cui-huan1*

(1.Depertment of Clinical Laboratory, the Chest Hospital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041, China;2.Nursing college of Hebei Traditional Chinese Medical College, Shijiazhuang 050200, China;3.Depertment of Respiratory, the Chest Hospital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041, China)

ObjectiveTo evaluate the diagnostic value of T-SPOT.TB and tuberculosis protein chip test for difference age patients with smear-negative pulmonary tuberculosis. MethodsOne hundred and ninety-one tuberculosis patients(smear-negative pulmonary tuberculosis) and 91 pneumonia patients were enrolled in our test. They were divided into three groups: the teenage group(7～40 years old), the middle-aged group(>40～65 years old) and the gerontism group(more than >65 years old). The three groups were examined with T-SPOT.TB and tuberculosis protein chip test. ResultsThe sensitivity of T-SPOT.TB and tuberculosis protein chip test in teenage group and middle-aged group were significant difference between the two methods(P<0.05)， but the specificity of two methods was no significant difference(P>0.05). The sensitivity and specificity in gerontism group were no significant difference(P>0.05). ConclusionT-SPOT.TB was important in the diagnosis for teenage and middle-aged patients with smear-negative pulmonary tuberculosis. The diagnosis of smear negative pulmonary tuberculosis in the elder patients should be selected according to the specific status.

tuberculosis, pulmonary； interferon-gamma release tests； protein chip

2015-08-17；

2015-09-02

河北省科学技术研究与发展指导计划(132777269)

李玉静(1982-),女,河北新乐人,河北省胸科医院主管技师,医学学士,从事临床检验学研究。

R446.9

A

1007-3205(2016)06-0690-03