HPV联合TCT在宫颈癌前病变筛查中的临床价值分析

罗丹霞，葛俊丽，赵丽莎，刘朵朵，陈必良

(第四军医大学西京医院 妇产科，陕西 西安 710032)

HPV联合TCT在宫颈癌前病变筛查中的临床价值分析

罗丹霞，葛俊丽，赵丽莎，刘朵朵，陈必良Δ

(第四军医大学西京医院 妇产科，陕西 西安 710032)

目的探讨联合人乳头瘤病毒(HPV)-DNA与宫颈液基薄层细胞学检测(TCT)在宫颈癌前病变筛查中应用的临床价值。方法选取2014年3月～2015年12月在第四军医大学西京医院妇产科进行宫颈癌前病变筛查的1670例患者，联合进行TCT和 HPV-DNA检测及阴道镜下活检，以病理检测结果作为金标准，对比二者的一致性。结果TCT、高危HPV-DNA及联合检测方法联合检测的阳性检出率分别是14.85%、15.03%、24.13%，联合检测优于单独检测，差异有统计学意义(P<0.05)，TCT检测筛查宫颈癌前病变的敏感度、特异度及阴性预测值分别是89.05%、91.78%、98.94%，HPV-DNA筛查宫颈癌前病变的分别是91.24%、91.78%、98.95%，TCT联合HPV-DNA的筛查宫颈癌前病变分别是99.27%，82.58%，99.92%。结论TCT联合HPV-DNA检测对于宫颈癌前病变筛查阳性检出率明显升高，并且具有较高的阴性预测值，对宫颈癌前病变的早期筛查具有较高的临床价值。

宫颈癌前病变；筛查；液基细胞学；人乳头瘤病毒

子宫颈癌前病变是妇科中常见的病变之一，其中宫颈癌是最严重的病变，其发病率是所有妇科恶性肿瘤中第2位，仅次于乳腺癌的发生率[1]。在每年全球49.5万新发的宫颈癌患者中，发展中国家占据80%，其中国约占新发病例的1/3，且其发生率还在呈逐年上升的趋势[2-3]。目前，临床上已经公认人乳头瘤状病毒(human papillomavirus,HPV)的感染与宫颈癌的发生及发展密切相关，HR-HPV的持续感染是宫颈癌发生的主要危险因素。据相关研究发现，采用细胞学检查对宫颈脱落的细胞进行检测可以尽早发现并治疗因HPV感染而引起的宫颈组织病变，可以有效预防宫颈癌[4]。在临床上超薄液基制片技术(ThinPrep Cytology Test,TCT)已广泛展开，并使阻止宫颈癌的发生成为可能。在本次研究中，旨在对HPV与TCT检测联合应用于宫颈癌前病变筛查的临床诊断价值进行探讨，为临床诊断提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年3月～2015年12月在第四军医大学西京医院妇产科接受宫颈癌前病变筛查的患者1670例作为研究对象。纳入标准：自愿接受宫颈癌前病变筛查者；存在性生活史者；未接受过HR-HPV-DNA、TCT检测以及未接受过阴道镜检查者；目前无妊娠；均签署知情同意书。排除标准：排除存在宫颈手术史及宫颈手术史者。入选患者年龄23～65岁，平均年龄(35.4±12.5)岁。

1.2 方法

1.2.1 TCT检测：向子宫颈管内插入细胞采集器并顺时针方向围绕子宫颈旋转5周，随后将细胞采集器置入装有ThinPrep细胞保存液的小瓶中，采用ThinPrep2000系统对保存液中的标本进行程序化处理，做成直径为2 cm的薄层细胞涂片，并用95%的酒精进行固定，用巴氏进行染色。细胞学诊断分级采用伯塞斯达(the Bethesda system，TBS)分级系统进行。

1.2.2 细胞学的诊断方法：应用TBS分级系统对细胞进行分级，具体方法：①鳞状上皮可分为4级：非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cell,ASC)，不能明确意义的非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cell of unknown significance,ASC-US)，不能除外的高度鳞状上皮内留边(ASC-H)；低度鳞状上皮内流变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL),其中包括HPV感染的轻度非典型增生(或)宫颈上皮内瘤Ⅰ(cervical intraepithelial neoplasia,CINⅠ)；高度鳞状上皮内瘤变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)，其中包括中度、重度非典型的增生及原位癌、CINⅡ及CINⅢ，并指出存在早期浸润癌；鳞癌；②腺细胞也概括为4级：非典型腺细胞(atypical glandular cells,AGC)；非典型腺细胞倾向于肿瘤(AGC-F)；非典型腺细胞倾向于宫颈管原位腺癌(adenocarinoma in situ,AIS)；腺癌。细胞学诊断标准为≥ASC-US或者≥AGC为阳性

1.2.3 HR-HPV检测：应用专用于采取HPV的取样器，将取样器插入受检者的子宫颈外口，并以逆时针或者顺时针旋转5圈，然后将取样器缓慢取出，置入HPV专用的保存液小瓶中，13种HR-HPV(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)的检测采用采用第2代杂交捕获试验(hybrid captureⅡ,HC2)。当高危型病毒的量RLU/CO>1.0显示为阳性。

1.2.4 阴道镜下宫颈组织的活检:将所有纳入研究的妇女进行阴道镜检查，在阴道镜的观察下对上皮及血管进行观察，并在涂抹3%的醋酸之后的3 min对上皮血管进行观察，在阴道镜图像出现异常区及碘实验显示阴性区进行多点取活检，若是正常的转化区，则在转化区3、6、9、12点分别取活检。宫颈活检诊断标准为≥CINI显示为阳性。

1.2.5 观察指标:以宫颈活检的病例诊断结果为金标准，分别对TCT、HRHPV-DNA检测、TCT联合HRHPV-DNA检测的灵敏度、特异度及阴性预测值。其中灵敏度=100%×真阳性/(真阳性+假阴性)；特异度=100%×真阴性/(真阴性+假阳性)；阴性预测值=100%×真阴性/(真阴性+假阴性)。

1.3 统计学方法 以病理诊断结果为金标准，对比TCT、HRHPV-DNA检测、TCT联合HRHPV-DNA检测的敏感度、特异度及阴性预测值。采用SPSS17.0统计学软件，计数资料以率的形式表示，进行χ2检验，以P<0.05时差异有统计学意义。

2 结果

2.1 TCT检查 接受TCT检查的1670例妇女中，无恶性病变(NILM)或者上皮内瘤变的共1422例，占85.15%。检查出病变的患者中，ASC-US患者149例(8.92%)，LSIL患者63例，占2.77%，HSIL患者31例，占1.86%，鳞状细胞癌患者5例，占0.299%，检查结果中均无腺细胞出现异常的病例。见表1。

表1 TCT检查结果与阴道镜宫颈活检病理检查结果Tab.1 Results of TCT and colposcopic biopsy examinations

2.2 HRHPV-DNA检查结果 在进行HPV-DNA检测的1670例受检妇女中，阴性1419例，占84.97%，阳性251例，感染率为15.03%。见表2。

表2 HPV-DNA检查结果与阴道镜宫颈活检病理检查结果

2.3 TCT联合HRHPV-DNA检测结果 1670例受检的妇女中，TCT联合HPV-DNA检测为阳性的403例，占24.13%，阴性1267例，占75.87%。见表3。

表3 TCT联合HPV-DNA检测结果与阴道镜下宫颈活检检查结果Tab.3 Results of TCT combined with HPV-DNA examinations

2.4 经阴道镜下宫颈组织活检检查结果 1670例受检患者中，检出CIN Ⅰ患者97例(5.81%)，CIN Ⅱ患者17例(1.02%)，宫颈浸润癌4例(0.24%)。

2.5 TCT、HPV-DNA及TCT联合HPV-DNA检测的阳性检出率对比 TCT阳性检出率与HPV-DNA的阳性检出率对比，差异无统计学意义(χ2=0.021,P=0.884)；TCT与联合检测的阳性检出率对比，差异有统计学意义(χ2=45.839，P=0.000)；HPV-DNA与联合检测的阳性检出率对比，差异有统计学意义(χ2=43.929,P=0.000)。见表4。

表4 TCT、HPV-DNA及TCT联合HPV-DNA检测的阳性检出率对比Tab.4 Comparison of positive rates among TCT, HPV-DNA and combination examinations

2.6 TCT、HPV-DNA及TCT联合HPV-DNA检测灵敏度、特异度及阴性预测值 以病理诊断结果为金标准，计算TCT、HPV-DNA检测、TCT联合HPV-DNA检测的筛查宫颈癌前病变的敏感度、特异度及阴性预测值。见表5。

表5 3种检测方法的灵敏度、特异度及阴性预测值(%)Tab.5 The sensitivity, specificity and negative predictive value of three examinations(%)

3 讨论

在女性中宫颈癌是常见的妇科生殖系统恶性肿瘤，具有较高的发病率，对妇女的身心健康及生命安全造成了严重的危害[5]。HPV感染是引发宫颈癌的重要危险因素，所以HPV的检测对防治宫颈癌的发生至关重要。在国际上，HC-Ⅱ是目前公认的检测高危HPV-DNA的最佳方法[6]。HC-Ⅱ是一种在应用免疫技术的同时结合化学发光使基因的信号能够放大的检测方法，能够同时对HPV的13个型进行检测，在西方国家已被广泛应用于宫颈癌的筛查，据统计其检测敏感度可高达88%～100%，尤其是阴性预测值可达99%，这说明HC-Ⅱ即可预测无HPV感染[7]。一些发达国家已推荐TC联合HC-Ⅱ检测HPV对规模较大的人群进行宫颈癌前病变的筛查。

在临床上目前应用于宫颈组织细胞学的检查方法主要有：液基薄层细胞学检查法(TCT)、巴氏涂片法、人乳头瘤病毒检查及阴道镜宫颈活检检查法[8]。其中常规的巴氏涂片法具有较高的假阴性率，及涂片过差，或者过多的血液、粘液及炎症细胞，或者出现上皮细胞过多而导致异常细胞被覆盖。而液基薄层细胞学检查法改变了常规巴氏涂片的操作方法，标本在取出后将立即放入细胞保存液中，将保存液中的细胞经程序换的处理，进行随机取样做成均匀的薄层涂片，与传统的巴氏涂片相比，TCT是一种准确、高效的宫颈癌前病变筛查手段，其制片均匀、易于阅片、细胞结构清晰、不易于漏诊，并且其应用TBS对细胞进行分级，能够更准确的反映宫颈细胞的变化情况，显著降低了假阴性率[9]。TCT检测阳性检出率为14.85%(248/1670)，HRHPV-DNA检测阳性检出率为15.03%(251/1670)；TCT联合HPV-DNA检测阳性检出率为24.13%(403/1670)；显著高于一种检测方法的阳性检出率，与相关文献报道一致[10]。TCT检测筛查宫颈癌前病变的敏感度、特异度及阴性预测值分别是89.05%、91.78%、98.94%，HPV-DNA筛查宫颈癌前病变的分别是91.24%、91.78%、98.95%，TCT联合HPV-DNA的筛查宫颈癌前病变分别是99.27%、82.58%、99.92%，其中联合检测的阴性预测值显著高于一种检测方法的阴性检测值，这主要是因为TCT与HPV-DNA检测联合应用，2者可以互相补充，弥补不足，大大提高了阳性检出率及阴性预测值，有效降低了临床漏诊率。

综上所述，TCT联合高危型HPV-DNA检测应用于宫颈癌前病变筛查阳性检出率升高，并且具有较高的阴性预测值，对宫颈癌前病变的早期筛查具有较高的临床价值。

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[7] 赵文霞,茅彩英,朱向宇,等.HPV 与TCT 联合作为宫颈癌初筛的临床意义[J].中国妇幼保健,2014,29(2):187-189.

[8] 陈颢研.两种细胞学检查联合HPV 检测筛查宫颈癌及癌前病变的临床对比分析[J].中国妇幼保健,2012,27(16):2558-2560.

[9] 宗晓亮,申艳霞,贾治霞,等.液基细胞学联合HPV 基因分型检测在宫颈癌前病变筛查中的应用分析[J].现代诊断与治疗,2013,29(12):2743-2744.

[10] 钟文芳,王洁,李萍,等.HPV检测、TCT及宫颈刮片应用于宫颈癌和癌前病变筛查中的价值分析[J].现代诊断与治疗,2015,26(10):2180-2182.

(编校：王俨俨)

ClinicalvalueofHPVcombinedwithTCTinthescreeningofcervicalprecancerouslesions

LUO Dan-xia, GE Jun-li, ZHAO Li-sha, LIU Duo-duo, CHEN Bi-liangΔ
(Department of Obstetrics and Gyneocology, Xijing Hospital of Forth Military Medical University, Xi’an 710032, China)

ObjectiveTo explore the clinical value of liquid based cytology test (TCT) -DNA combined with cervical liquid based cytology test (HPV) in the diagnosis of cervical precancerous lesions.MethodsFrom March 2014 to December 2015 in our hospital accepted 1670 cases cervical precancerous lesion screening patients, simultaneously TCT and HPV DNA testing and colposcopy biopsy, pathological examination results as diagnostic standard, and compared the consistency.ResultsThe positive detection rate of TCT, and high-risk HPV-DNA and combination methods respectively was 14.85%, 15.03%, 24.13%, the combination methods was better than each single method,the difference was statistically significant(P<0.05).The sensitivity, specific degrees and negative predictive values of thinprep cytologic test in screening of cervical cancer precursor lesions were 89.05%，91.78%, 98.94%, HPV DNA screening for cervical precancerous lesions were 91.24%，91.78%，98.95%, TCT and HPV DNA of cervical cancer screening before lesions were 99.27%,82.58%,99.92%.ConclusionTCT combined with HPV-DNA detection was applied to the positive detection rate of cervical precancerous lesions, and has a high negative predictive value.It has a high clinical value for early screening of cervical precancerous lesions.

precancerous lesion of cervix; liquid based cytology; human papillomavirus

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.10.042

罗丹霞，女，硕士，主治医师，研究方向：妇科肿瘤，E-mail: 1181916010@qq.com；陈必良，通信作者，男，硕士，主任医师，研究方向：妇科肿瘤，E-mail：3448250964@qq.com。

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