H PLC测定和胃化滞丸中黄芩苷的含量

林超史敏王永和（济南市食品药品检验检测中心，山东济南500；章丘市中医医院，章丘5000）

H PLC测定和胃化滞丸中黄芩苷的含量

林超1史敏1王永和2
（1济南市食品药品检验检测中心，山东济南250102；2章丘市中医医院，章丘250200）

【摘要】目的：建立测定和胃化滞丸中黄芩苷含量的高效液相色谱法。方法：采用Thermo C18色谱柱（100 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2），流速为1.0 mL/min，检测波长为280 nm，柱温为36℃。结果：黄芩苷对照品溶液在12～96 μg/mL（r=0.999 4）浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为98.8%，RSD=0.59% （n=6）。结论：该法可用于和胃化滞丸中黄芩苷的含量测定。

【关键词】和胃化滞丸；黄芩苷；高效液相色谱法

和胃化滞丸是由黄芩、木香、沉香、焦山楂、清半夏等多味中药组成的医院中药制剂，具有行气导滞、和胃消痞、通络止痛的功效，用于脘腹痞闷、胀痛嗳气、食欲不振、大便不畅症状者。黄芩苷是方中黄芩的主要有效成分［1］，为了有效控制和胃化滞丸的质量，本试验采用高效液相色谱法（HPLC）测定方中黄芩中黄芩苷的含量，为建立该制剂的质量控制标准提供依据。

1　仪器与材料

Waters 2695高效液相色谱仪（美国Waters公司）；AE-240电子天平（梅特勒–托利多仪器公司）；黄芩苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110715-201318，含量93.3%）；和胃化滞丸（批号：20140123，20140124，20140125，20140126，20140603，20140604，20140605，20140927，20140928，20140929）；甲醇为色谱纯，水为纯化水，其余试剂为分析纯。

2　方法与结果

2.1色谱条件［2-3］

色谱柱：Thermo C18色谱柱（100 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）；检测波长为280 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：36℃；进样量：10 μL。结果见图1。

图1　和胃化滞丸HPLC图

2.2对照品溶液的制备

精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成1 mL含黄芩苷0.12 mg的溶液，作为对照品储备液。

2.3供试品溶液的制备

取本品 10 g，剪碎，精密称定，加 70%乙醇40 mL，加热回流3 h，放冷，滤过，滤液置100 mL量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀。精密量取 1 mL，置 10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.4阴性样品溶液的制备

按处方工艺制备不含黄芩的阴性样品，然后按供试品溶液制备方法制备阴性样品溶液。

2.5干扰试验

取阴性样品溶液10 μL进样，与供试品溶液和对照品溶液色谱图对照，阴性样品溶液在黄芩苷出峰处无干扰。

2.6方法学考察

线性关系：分别精密量取对照品储备液适量，用甲醇稀释得不同浓度的标准溶液，精密量取10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积Y为纵坐标，以浓度X为横坐标，进行线性回归，绘制标准曲线，得黄芩苷的回归方程为：

结果表明黄芩苷对照品溶液在12～96 μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。

精密度试验：取对照品溶液（60 μg/mL），按“2.1”项下色谱条件重复进样6次。结果黄芩苷的峰面积RSD为0.78%。

重复性试验：按上述测定方法，对同一批号样品分别进行6次测定，结果黄芩苷含量平均值为1.37 mg/g，RSD为0.86%，表明方法重复性良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0，2，4，8，12，24 h依法测定，结果黄芩苷峰面积RSD为0.22%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

回收率试验：取已知含量的和胃化滞丸6份，每份约5 g，剪碎，精密称定，分别加入黄芩苷对照品溶液100 mL（用70%乙醇制备，浓度0.7 mg/mL），按“2.3”项下方法制备，并按“2.1”项下色谱条件进行测定，计算回收率，平均回收率为98.8%，RSD= 0.59%。

2.7样品含量测定

取和胃化滞丸按“2.3”项下方法制备供试品溶液，并按“2.1”项下色谱条件进行测定，计算黄芩苷含量，结果见表1。

表1　样品含量测定结果

3　讨论

黄芩作为和胃化滞丸的主要组分，发挥着必不可少的作用，本文针对和胃化滞丸质量标准中含量测定项的空白，建立了HPLC测定和胃化滞丸中黄芩的指标性有效成分黄芩苷的方法，为和胃化滞丸的质量控制提供了科学依据。在供试品溶液的制备中，考察了甲醇、乙醇、70%乙醇为溶剂，超声处理及加热回流等提取条件，结果表明以70%乙醇为溶剂，加热回流，待测成分可提取完全，且此方法简单易行，成本低。

对供试品溶液在190～ 400 nm进行了扫描，最后确定无杂质干扰的 280 nm作为测定波长。应用此方法测定了10批和胃化滞丸的黄芩苷含量，结果表明不同批次样品中黄芩苷的含量存在差异，本文又核对了这10批制剂投料的黄芩饮片的留样，证实黄芩苷的含量与投料黄芩饮片的质量相关，投料饮片的质量直接决定着制剂的质量，由此可见黄芩苷的定量分析对和胃化滞丸的质量控制有着不可替代的作用。

与我院和胃化滞丸制剂的情况类似，我国其他很多医疗机构的中药制剂需求量都很大，但大多数质量标准都远远落后于市售成药的质量标准［4］，建议医院在保证满足临床用药需求，成本合理的条件下，结合现有的分析技术，提高医院自制制剂的质量标准，严格控制制剂的质量，确保其临床有效性和安全性。

参考文献：

［1］郑永凤，王佳婧，傅超美，等.黄芩的化学成分与药理作用研究进展［J］.中成药，2016，38（1）：141-145.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典（2010年版）一部［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：22-283.

［3］何玲玲，韦国兵，胡奇军.高效液相色谱法测定银黄口服液中黄芩苷含量及不确定度分析［J］.中国现代医学杂志，2015，25 （34）：15-18.

［4］谢强；王志梅；乌伟魁.温阳通痹丸质量标准研究［J］.中国执业药师，2015，12（5）：28-31.

◆医药快讯◆

美国限制氟喹诺酮适应证并警告致残风险

2016年5月12日美国食品药品监督管理局（FDA）提示急性鼻窦炎、急性支气管炎和单纯性尿路感染的患者在有其他治疗选择的情况下，使用氟喹诺酮类抗菌药品治疗引发相关严重不良反应的风险通常大于效益。针对上述疾病，氟喹诺酮类药品应该仅用于那些没有其他方案可供选择的患者。

FDA安全性审查发现，氟喹诺酮类药品（包括片剂、胶囊和注射液）全身用药时，致残性和潜在的永久性严重不良反应可同时发生，这些不良反应累及肌腱、肌肉、关节、神经和中枢神经系统。

因此，FDA要求更新所有氟喹诺酮类药品标签和用药指南以反映最新安全信息。

如果患者在使用氟喹诺酮类药品期间有任何问题或发生任何严重副作用，应立即与医务人员沟通，部分严重副作用的体征和症状包括肌腱、关节和肌肉疼痛、针刺感或刺痛感、意识模糊和幻觉。医务人员在患者发生严重不良反应时，应立即停止全身性氟喹诺酮类药品治疗，并改用其他非氟喹诺酮类抗菌药品以完成患者的疗程。

目前FDA批准的全身性治疗用的氟喹诺酮类药品

（来源：http://www.sda.gov.cn）

doi：10.3969/j.issn.1672-5433.2016.08.007

收稿日期：（2016-03-04）

作者简介：林超，男，主管药师。研究方向：中药质量分析和标准研究。通讯作者E-mail：kongk1@163.com

Determination of Baicalin Content in Hewei Huazhi Pills by HPLC

Lin Chao1，Shi Min1，Wang Yonghe2（1 Jinan Center for Food and Drug Control，Shandong Jinan 250102，China；2 Zhangqiu Municipal Hospital of Traditional Chinese Medicine，Zhangqiu 250200）

ABSTRACTObjective：To develop a method for determination of baicalin conteint in hewei huazhi pills.Methods：A Thermo Cl8column（100 mm×4.6 mm，5 μm）was adopted，using methanol-water-phosphoric acid（47∶53∶0.2）as the mobile phase，at a flow rate of 1.0 mL/min，a detection wavelength of 280 nm and a temperature of 36℃.Results：Baicalin at a concentration of 12～96 μg/mL showed good linear relationship to the peak area.The average recovery was 98.8%，with a RSD of 0.59%（n=6）.Conclusion：The method may be used for the determination of baicalin content in hewei huazhi pills.

KEY WORDSHewei Huazhi Pills；Baicalin；HPLC