CYP2C19基因多态性与云南汉族人群冠心病的相关性研究

张立国，喻　卓



CYP2C19基因多态性与云南汉族人群冠心病的相关性研究

张立国1，喻卓2

目的研究细胞色素P450 (CYP)2C19基因多态性与云南汉族人群冠心病的相关性。方法随机选取2012年9月—2013年12月在昆明医科大学第一附属医院心内科住院且无血缘关系的云南汉族人群127例作为研究对象，采用基因芯片法检测所选血液样本DNA中 CYP2C19 基因序列单核苷酸多态性位点CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3 的基因型，分析63例冠心病组和64例对照组的基因多态性，从而分析基因多态性与冠心病的相关性。结果Logistic回归分析结果：除了年龄、性别、高血压、糖尿病、高胆固醇血症等传统危险因素之后，CYP2C19 *1/*2基因突变者患病风险明显增加[OR=5.24，95% CI (2.00～13.72)]，CYP2C19 *1/*3基因突变者患病风险亦明显增加[OR=4.54，95% CI(0.55～37.08)]。结论CYP2C19基因多态性是云南汉族人群冠心病发生的重要危险因素。 CYP2C19基因多态性可以增加云南汉族人群患冠心病的发生风险。

冠心病；细胞色素P450 2C19；基因多态性；云南汉族人群

近年来，西南边陲云南汉族人群的冠心病发病人数逐年增多，因此，对云南汉族人群冠心病发病机制的研究是目前的一个重要课题。目前研究证实，花生四烯酸在内源性细胞色素P450(Cytochrome P450，CYP450)作用下的产物，如环氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids，EETs)[1]、20-羟基二十碳四烯酸(hydroxyeicosatetraenoic acids，HETEs)及前列环素(PGI2)等，在动脉粥样硬化、高血压、心力衰竭等疾病的发生发展中起着重要作用[2]。EETs还可以抑制血小板聚集、抑制活化的白细胞黏附及减少血管细胞黏附分子的表达而抑制血栓形成[3]。CYP2C19是CYP家族中的重要成员，是EETs生成和代谢的关键酶，目前已经有研究证实其基因多态性和动脉粥样硬化[4]及氯吡格雷代谢[5-6]有关。本研究采用基因芯片法检测所选血液样本DNA中 CYP2C19 基因序列单核苷酸多态性位点 CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3 的基因型，探索云南地区汉族人群 CYP2C19 基因多态性与冠心病的相关性。

1　资料与方法

1.1研究对象2012年9月—2013年12月在昆明医科大学第一附属医院心内科住院的云南汉族无血缘关系的病人，病人及其父辈均在云南出生并长期居住，共入选127例，冠心病组63例，年龄(50.26±6.65)岁；对照组64例，年龄(46.57±3.86)岁。入选标准：冠心病组符合世界卫生组织(WHO)关于冠心病的命名和诊断标准，且经冠状动脉造影证实有一支或多支血管狭窄，狭窄程度大于50%，对照组为冠脉造影证实无冠脉病变或冠脉粥样硬化者。排除标准：对阿司匹林或氯吡格雷过敏或不能耐受者；半年内有卒中或内脏出血性疾病病史者；严重肝脏疾患和(或)凝血功能异常者；具有抗血小板治疗禁忌证或近期拟行外科手术者；心脏瓣膜病、心肌病、心肌炎、周围血管病、感染性心内膜炎；晚期肾功能不全、肿瘤及慢性心力衰竭等严重影响近期预后的疾病史。

1.2研究方法对入选病人采用基因芯片法检测所选血液样本DNA中 CYP2C19 基因序列单核苷酸多态性位点CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3 的基因型，了解本地区 CYP2C19 基因多态性分布情况。入选病人常规行冠脉造影术，分析冠心病组与对照组的等位基因与基因型，从而分析其基因多态性与冠心病的相关性。

2　结　果

2.1冠心病组与对照组一般资料比较冠心病组吸烟人数、高血压病人明显多于对照组，血肌酐(Scr)、总胆固醇(TC)、血糖水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；两组三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血尿素氮(BUN)等指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

表1　两组临床资料比较

2.2CYP2C19基因多态性与云南汉族人群冠心病的相关性研究

2.2.1Hardy-Weinberg平衡检验127例云南地区汉族的昆明医科大学第一附属医院心内科住院病人(男61例，女66例)，经询问、记录入选病人均无血缘关系。所选样本针对CYP2C19 等位基因(*1、*2、*3)的6种基因型*1/*1、*1/*2、*1/*3、*2/*2、*2/*3、*3/*3进行检测，基因型分布冠心病组χ2=2.91，P=0.71，对照组χ2=1.55，P=0.91。两组P>0.05，符合 Hardy-Weinberg 遗传平衡，说明样本来自于随机分配平衡状态的群体，具有一定代表性。详见表2、表3。

表2　冠心病组CYP2C19基因型Hardy-Weinberg 平衡检验 　例

表3　对照组CYP2C19基因型Hardy-Weinberg 平衡检验　例

2.2.2CYP2C19等位基因和基因型在两组样本中的分布频率比较冠心病组CYP2C19*2等位基因明显高于对照组，冠心病组和对照组等位基因的频率分布有统计学意义(χ2=17.31， P=0.004)，基因型频率比较差异有统计学意义(χ2=12.65， P=0.002)。详见表4。

表4　两组样本间等位基因和基因型比较

2.2.3CYP2C19基因多态性和冠心病的关系Logistic回归分析将冠心病作为应变量，性别、吸烟史、高血压病、血糖、TG、TC、年龄和CYP2C19基因多态性作为自变量，同时将CYP2C19 基因多态性纳入方程，行多因素非条件Logistic回归分析，在a=0.05的水平上，拟合主效应模型，入选主效应模型的变量有吸烟史、高血压、血糖及CYP2C19 基因多态性。CYP2C19 *1/*2基因突变者患病风险明显增加[OR=5.24，95% CI(2.00～13.72)]，CYP2C19 *1/*3基因突变者患病风险亦明显增加[OR=4.54，95% CI(0.55～37.08)]。详见表5。

表5　多因素非条件Logistic回归分析结果

3　讨　论

基因多态性是指在一个生物群体中，同时并经常存在两种或多种不连续的变异基因型或等位基因。近年来，对花生四烯酸代谢途径上的CYP家族基因进行多态性分析发现，CYP8B1[7]、CYP3A5[8]、CYP4F2[9]、CYP2J2[10]、CYP2C9[11]、CYP2C19[12]等基因的多态性和冠心病、高血压等疾病的发生具有关联性。目前报道的CYP2C19突变型均属于单个碱基突变，即单核苷酸多态性。众所周知，聚集于动脉管壁部位的氧化型低密度脂蛋白是动脉粥样硬化斑块形成的关键因素。目前认为CYP 酶主要参与细胞氧化应激及低密度脂蛋白被活性氧族(reactive oxygen species，ROS)氧化的过程[13]。Ercan等[12]研究显示：CYP作为调节环氧二十碳三烯酸基因家族中的表氧化酶，在调节血管中发挥重要作用。检测了108例冠脉狭窄病人和90名健康对照个体，利用PCR检测CYP2C9/19*2和CYP2C9/19*3，发现病例组和对照组CYP2C9*2/*3等位基因分布差异无统计学意义，CYP2C9*2杂合子吸烟病人动脉粥样硬化患病风险增加3.7倍。病例组CYP2C19*3杂合子等位基因出现频率较对照组高(分别为10.2%，5.6%)，患病风险为对照组3倍[OR=3.75，95%CI(0.75～18.65)]，CYP2C9等位基因突变携带者CYP2C9代谢能力下降，从而导致内皮源性超极化因子(EDHF)合成减少，动脉粥样硬化患病风险增加。

本研究对127例云南地区无血缘关系的汉族人群 CYP2C19 的基因多态性进行统计，对两个最常见代谢缺陷基因CYP2C19*2、CYP2C19*3 进了检测。本研究显示：在云南汉族人群中，冠心病组和对照组之间基因型和等位基因的分布差异有统计学意义。冠心病组中杂合子出现频率明显高于对照组，并且两组在等位基因分布差异有统计学意义，冠心病组CYP2C19*2等位基因频率明显高于对照组。实验结果与理论分析相一致。冠心病除了遗传因素的作用，高血压、高血脂、糖尿病、年龄、性别、吸烟等因素也与冠心病的发生、发展密切相关。本研究结果显示：入选主效应模型的变量有吸烟史、高血压、血糖及CYP2C19 基因多态性。CYP2C19 *1/*2基因突变者患病风险明显增加[OR=5.24，95%CI(2.00～13.72)]，CYP2C19 *1/*3基因突变者患病风险亦明显增加[OR=4.54，95%CI(0.55～37.08)]。CYP2C19 基因多态性使冠心病的发生风险明显增加。在调整了其他危险因素的干扰之后，发现CYP2C19 基因多态性是云南汉族人群冠心病发生的重要危险因素。

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(本文编辑郭怀印)

Correlation between CYP2C19 Gene Polymorphism and Coronary Heart Disease in Yunnan Han Population

Zhang Liguo，Yu Zhuo

Tai’an Hospital of Traditional Chinese Medicine，Tai’an 271000，Shandong，China Corresponding Author：Yu Zhuo(First Affiliated Hospital of Kunming Medical University，Kunming 650032，Yunnan，China)

ObjectiveTo investigate the correlation between gene polymorphism of cytochrome P450 (CYP) 2C19 and coronary heart disease (CHD) in Yunnan Han population.MethodsOne hundred and twenty-seven Yunnan Han population were randomly selected from September 2012 to December 2013.Using gene chip assay，the genotypes were detected in the selected blood sample with genotype CYP2C19 gene sequence of single nucleotide polymorphisms CYP2C19 * 1，CYP2C19 * 2，CYP2C19 * 3 genotype.The gene polymorphisms were analyzed in CHD group (n=63)and control group(n=64).The correlation of gene polymorphism and CHD were analyzed.ResultsLogistic regression analysis showed that in addition to age，sex，hypertension，diabetes，hypercholesterolemia and other traditional risk factors，CYP2C19*1/*2 gene mutation significantly increased risk of CHD[OR=5.24，95% CI (2.00 to 13.72)]，CYP2C19*1/ *3 gene mutation was also significantly increased the risk [OR = 4.54，95% CI (0.55 to 37.08)].CYP2C19 gene polymorphism was an important risk factor for coronary heart disease in Yunnan Han population.Conclusion CYP2C19 gene polymorphism may increase the risk of coronary heart disease in Yunnan Han population.

coronary heart disease；cytochrome P450 (CYP) 2C19；gene polymorphism；Yunnan Han population

1.山东省泰安市中医医院(山东泰安 271000)；2.昆明医科大学第一附属医院

喻卓，E-mail：dr_yuzhuo@163.com

R541.4R256.2

Adoi：10．3969/j．issn．1672-1349．2016．14．010

1672-1349(2016)14-1597-04

2015-10-26)