谷氨酸钠测定的探讨



谷氨酸钠测定的探讨

赖谷氨酸钠的国家检测标准为GB/T8967-2007，所采用的方法是价格昂贵的非水滴定法。由于这种非水滴定法系采用冰乙酸为介质、高氯酸作标准滴定液、α-萘酚苯基甲醇作为指示剂，不但价格昂贵具有强烈的腐蚀性，而且终点颜色变化不明显，影响观察与终点判定，从而影响检测结果。笔者根据长期实践，探索出用凯氏定氮法及加入甲醛进行滴定的方法来检测赖氨酸。

原理 凯氏定氮法：L-谷氨酸钠分子式为C5H18NNaO4•H2O，分子量为187.13。与蛋白质相比，它是一种比较容易被分解而且非常容易溶解的的有机物，在高温的浓硫酸溶液中，容易定量转化生成（NH4）2SO4，然后用盐酸标准溶液进行滴定。

把样品加入水中，然后加入5%的硫酸铜溶液并加热蛋白质沉淀出来。然后把它易溶解性赖氨酸通过水溶解进行分离，然后慢性滤纸进行过滤，滤液也同样硫酸钾、硫酸钾、硫酸进行消化，冷却定容，吸取试液加入浓氢氧化钠溶液进行蒸馏，冷却后用硼酸溶液吸收用盐酸标液进行滴定，从而得出样品非谷氨酸钠的含量。

甲醛加入滴定法：从2.1的谷氨酸钠结构可以看出，由于其氨基酸具有酸碱两种性质，可以将其溶解之后用氢氧化钠标准溶液滴定到PH8.2之后加入甲醛以固定氨基，使溶液显示酸性，用氢氧化钠标准溶液滴定就可以测定谷氨酸钠的含量。

凯氏定氮法检测步骤 谷氨酸钠检测步骤：准确称取试样0.5g～1g，放人250mL凯氏烧瓶中，放入两粒玻璃珠，硫酸钾0.5g硫酸铜0.1g混匀，再加入10mL硫酸于500mL凯氏长颈烧瓶中放入两粒玻璃珠，轻摇后加入小漏斗，将瓶以45°角放入有通风毒气橱并有石棉网的电炉上，小心加热。等瓶内容物澄清之后加大火力继续消化1h，冷却，分三至四次转移至250mL容量瓶中，冷却，摇匀，定容。吸取50mL试液从上面的小玻璃杯于凯氏定氮蒸馏仪反应室，加入15mL 400g/L氢氧化钠溶液，再用蒸馏水10mL清洗小玻璃杯，用可调节式电炉进行加热蒸馏，冷却液体用装有20g/L的硼酸吸收液的烧杯溶解吸收，待吸收液体变色后蒸馏5min后使冷却管尖端再继续蒸馏1min，并用蒸馏水清洗冷凝管下端口于，用0.1mol/L的盐酸标准溶液进行用玻棒搅拌滴定，待吸收液变成暗红色后为终点，记录其消耗体积记录其体积为V2。

3.2 谷氨酸钠结果计算

式中，X1—样品中谷氨酸钠的含量，%； a1—样品试液的稀释倍数；

V1—样品吸收液消耗盐酸标液体积，mL； m1—样品质量，g；

V0—样品空白消耗盐酸标液体积，mL； C1—盐酸标液深度，mol/L。

6.52—氮换算成谷氨酸钠的系数；

甲醛加入滴定法检测步骤 在空调与除湿机控制温度20±2℃环境的实验室里，根据样品氨基酸含称取已经粉碎的样品5～50g（精确至0.0002g），加水100mL，开动磁力搅拌器搅拌30min之后转移至250.0mL容量瓶之中，定容至刻度，过滤于烧杯之中等待检测。

在空调与除湿机控制温度20±2℃环境的实验室里，吸取滤液（4.1）50mL，开动磁力搅拌器，用氢氧化钠标准溶液［c（NaOH）=0.05mol/L］滴定至酸度计指示pH=8.2记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（（0.05mol/L）的毫升数，可计算样品总酸含量〕。加入10.0mL甲醛溶液，混匀。再用氢氧化钠标准滴定溶液（0.05mol/L）继续滴定至pH=9.2，记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（0.05mol/ L）的毫升数V1。同时取80mL水，先用氢氧化钠溶液（0.05mol/L）调节pH为8.2，再加入10.0mL甲醛溶液，用氢氧化钠标准滴定溶液（0.05mol/L）滴定至pH=9.2，同时做试剂空白试验V0。

式中，X—样品中氨基酸含量（以氮计），%；

V2—样品消耗的氢氧化钠标准溶液的体积，mL；V0—空白消耗的氢氧化钠标准溶液的体积，mL；

0.014-1.00mL氢氧化钠标准滴定溶液［c（NaOH）=1.000mol/L］相当于氮的质量，g；

C2—氢氧化钠标准滴定溶液浓度，mol/L；

6.52—氮换算成谷氨酸钠的系数； m1—样品质量，g。

□ 重庆市永川食品药品检验所赵壮志 陈娜 揭定华 吴修亮 马力 王震