腺苷脱氨酶及外周血异型淋巴细胞联合测定对小儿传染性单核细胞增多症的诊断价值

徐福胜，李林臣，张建伟，高洪芬，马显亮，刘建军

(1.河北省黄骅市人民医院检验科，河北 黄骅 061100；2.河北省张家口市第一人民医院检验科，河北 张家口 075000)



腺苷脱氨酶及外周血异型淋巴细胞联合测定对小儿传染性单核细胞增多症的诊断价值

徐福胜1，李林臣2，张建伟1，高洪芬1，马显亮1，刘建军1

(1.河北省黄骅市人民医院检验科，河北 黄骅 061100；2.河北省张家口市第一人民医院检验科，河北 张家口 075000)

目的探讨血清腺苷脱氨酶(adenosine deaminase，ADA)及外周血异型淋巴细胞联合检测在传染性单核细胞增多症(IM)患儿诊断及鉴别诊断中的临床价值。方法采用过氧化物酶法检测50例IM患儿血清ADA活性水平及外周血涂片分类100个白细胞，计数异型淋巴细胞百分比，并与50例同时期健康体检(排除EB病毒感染)对照组儿童进行比较。结果血清ADA检测对小儿IM鉴别诊断特异性为71.0%、敏感性为55.6%、准确性为69.8%；外周血异型淋巴细胞分类计数特异性为61.1%、敏感性为58.6%、准确性为63.3%；联合两项指标检测特异性为76.9%、敏感性为67.8%、准确性为79.8%。结论联合检测血清ADA及外周血异型淋巴细胞有助于小儿IM的诊断，较单一指标检测可明显提高诊断特异性、敏感性及准确性。患儿出现不规则发热，且血清ADA水平及异型淋巴细胞比例升高时，应考虑到有EB病毒感染的可能性。

腺苷脱氨酶；异型淋巴细胞；传染性单核细胞增多症；EB病毒

传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)是一种单核-巨噬细胞系统急性增生性传染病。主要临床症状包括发热、颈部淋巴结肿大、咽峡炎、肝脾肿大，其中发热、颈部淋巴结肿大和咽峡炎为IM三联征。在中国，本病多见于儿童，与西方国家发病高峰为青年不同[1]。主要由飞沫与唾液经呼吸道传播，其次经密切接触传播。主要由Epstein-Barr病毒(EB病毒)感染引起，是儿童发热的原因之一，且逐年增多[2]。因其临床表现缺乏特异性及首发症状的多样性，早期常易误诊或漏诊，给临床快速诊断带来困难[3-4]。为寻求一种快速、简便的实验室检查方法，我们对临床诊断为IM的50例患儿及同期同龄健康儿童进行血清ADA及异型淋巴细胞联合检测，现将结果报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

2013-01—2014-08月在黄骅市人民医院儿科住院IM患儿50例，均符合《实用儿科学》诊断标准[5]，其中男31例，女19例；年龄6个月～11岁，平均4.55岁。选择同期同龄健康儿童50例为对照组，其中男29例，女21例；年龄9～12岁，平均4.90岁。与IM组比较，年龄和性别差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2仪器与试剂

德国罗氏P800全自动生化分析仪，德国罗氏诊断有限公司生产的ADA检测试剂盒，瑞氏染液(珠海贝索生物公司生产)及磨砂玻片。

1.3方法

空腹采集静脉血3 mL，及时分离血清，ADA采用液体双试剂过氧化物酶法检测，2 h内完成;采集末梢血推片，瑞氏液染色，油镜下分类100个白细胞，计算异型淋巴细胞百分比。所有操作严格按照标准操作规程，以血清ADA>25 U·L-1、异型淋巴细胞百分比>10%为有临床诊断价值。

1.4统计学方法

2　结　果

2.1血清ADA及异型淋巴细胞测定值比较

IM组血清ADA值为(27.3±11.2)U·L-1、异型淋巴细胞比例(18.5±7.8)%，正常对照组血清ADA值为(15.8±6.1)U·L-1、异型淋巴细胞比例(1.7±0.8)%，组间差异有显著性(P<0.01)。IM组中ADA>25U·L-138例，阳性率76%，异性淋巴细胞比例>10%为43例，阳性率86%；对照组ADA值均<25U·L-1、异型淋巴细胞比例均<10%，无阳性病例。(表1)。

n血清ADA值(U·L-1)异型淋巴细胞比例(%)IM组5027.3±11.218.5±7.8对照组5015.8±6.11.7±0.8

2.2血清ADA与外周血异型淋巴细胞分类计数联合检测结果

联合检测小儿IM诊断及鉴别诊断的特异性、敏感性、准确性均有所提高，表明联合检测优于单个指标检测(表2)。

表2　ADA、异型淋巴细胞联合检测特异性、敏感性、准确性比较　(%)

3　讨　论

EB病毒为一种嗜淋巴细胞的DNA病毒，属于疱疹病毒科。研究表明，世界上超过90%的人有过EB病毒感染[6]。EB病毒感染时症状差异较大，有些只表现出无症状的血清学ADA阳性，有些则病情凶险，其中约半数发展为IM，IM是由EB病毒感染引起的一种累及多系统的全身性病患，表现为淋巴细胞增生，细胞体积和细胞核体积增大，形成异型淋巴细胞。

ADA属于巯基酶，使腺苷脱氨并通过一系列化学反应产生次黄嘌呤，并最终氧化次黄嘌呤形成尿酸，通过尿液排出体外。血细胞中ADA主要存在于红细胞和白细胞中，其生物活性是血清的40～70倍，且淋巴细胞含量明显高于红细胞，尤其是T淋巴细胞的含量最高[7]。但ADA活性与淋巴细胞的绝对数量无直接关系，而与淋巴细胞的分化和激活相关[8]。本研究结果表明，IM患儿血清ADA活性明显高于对照组，且阳性率达到了76%。IM患儿血清ADA活性升高可能是由于B淋巴细胞溶解释放大量ADA及免疫系统受到刺激、T淋巴细胞异常活化增殖，促使大量淋巴细胞中ADA释放入血所致[9]。因此，血清ADA检测IM患儿有较大临床价值。

异型淋巴细胞(abnormal lymphocyte)是外周血中出现的一种形态变异的非典型淋巴细胞，在显微镜下可看到其细胞浆、细胞核发生形态学上的变化。增多的原因较为复杂，主要与病毒感染及病毒引起的变态反应有关,健康人血片中一般较少[10]。IM患儿体内B淋巴细胞是EB病毒侵犯的主要细胞，病毒进入到靶细胞内后，在细胞内大量复制，最终导致B淋巴细胞溶解，逐步诱导T细胞及NK细胞生成大量活化因子[11],从而引起一系列免疫反应，其中对CD8+T淋巴细胞的作用最为重要。在EB病毒感染的急性期，全部CD8+T淋巴细胞活性及数目增加，其能够杀灭EB病毒及被EB病毒感染的成熟B淋巴细胞[12]。研究表明，IM患儿存在继发性免疫功能紊乱，尤其是T淋巴细胞免疫功能紊乱[10]。本研究结果显示，IM患儿异型淋巴细胞比例明显高于对照组，且阳性率达到了86%。IM患儿异型淋巴细胞比例升高可能是由于患儿免疫系统受到刺激使T淋巴细胞和B淋巴细胞异常活化增殖，形成了大量的异性淋巴细胞，从而使其比例增高。

在中国IM多发生在学龄前及学龄儿童，尤其是4～6岁的儿童，发达国家则是以青春期和成人居多，年龄多在10～30岁之间[13]。造成这种差异的原因可能与卫生医疗条件及生活习惯有关。ADA与外周血异型淋巴细胞分类计数联合检测对小儿IM诊断及鉴别的特异性、敏感性和准确性均有所提高，提示二者联合检测优于单个指标检测。当患儿有发热、咽峡炎或淋巴结炎，且伴有血清ADA活性增高、外周血涂片异型淋巴细胞增多时，应想到发生IM的可能，可进一步检测相关EB病毒VCA-IgM抗体、EB病毒DNA、嗜异性抗体等确诊。治疗IM应以抗病毒对症治疗为主，防止发生并发症，避免临床滥用抗菌药物。

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[2]吕洁，金莲花，孙景辉，等.儿童传染性单核细胞增多症临床特点与发病年龄的关系[J].临床儿科杂志，2011,29(6)：518-521.

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[6]徐雪美,李武.Epstein-Barr病毒感染相关肝损伤的研究进展[J].中华临床医师杂志:电子版,2015,6:1011-1015.

[7]刘艳梅.脑脊液腺苷脱氨酶测定在结核性脑膜炎诊断中的应用价值[J].疾病监测与控制，2013,7(5)：297-298.

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[9]刘朝宙，王伟，周远大，等.传染性单核细胞增多症患儿血清TNF-α和IL-18水平的动态变化[J].细胞与分子免疫学杂志，2010,26(5)：480-481.

[10]马倩.两种方法检测异型淋巴细胞结果比较[J].检验医学与临床，2011，8(15)：1896-1899.

[11]Long H M,Haigh T A,Gudgeon N H,et al.CD4+T cell responses to Epstein-Barr virus(EBV)latent cycle antigens and the recognition of EBV transformed lymphoblast cell lines[J].J Virol,2009,79(8):4896-4907.

[12]李敏.传染性单核细胞增多症患儿的T细胞免疫改变[J].现代预防医学，2007,34(14)：2637-2638.

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[责任编辑：李蓟龙英文编辑：刘彦哲]

Diagnostic Value of Combined Detection of Serum Adenosine Deaminase and Abnormal Peripheral Lymphocytes in Children Infectious Mononucleosis

XU Fu-sheng1,LI Lin-chen2，ZHANG Jian-wei1，et al

(Department of Clinical Laboratory,The People’s Hospital of Huanghua City,Huanghua,Hebei 061100,China)

ObjectiveTo study the clinical value of diagnosis and differential diagnosis of combined detection serum adenosine deaminase(ADA)and abnormal peripheral lymphocytes in children infectious mononucleosis(IM).MethodsThe serum adenosine deaminase activity level was detected in 50 cases of infectious mononuclear cells increased patients by peroxidase and 100 white blood cells of outside blood were classified with smears,and the percentage of abnormal lymphocytes was worked out.And then a comparison was made with 50 cases of healthy physical examination(excluding EB infection)children in the control group.ResultsThe specificity,sensitivity and accuracy of differential diagnosis of serum adenosine deaminase in children with infectious mononucleosis were 71.0%,55.6%,and 69.8,respectively.The specificity,sensitivity and accuracy of peripheral blood lymphocyte classification were 72.1%,58.6%,and 70.3%,respectively.The specificity,sensitivity and accuracy of the combined indicators were 76.9%,67.8%,and 79.8%,respectively.ConclusionThe combined detection of serum ADA and peripheral blood lymphocytes is more helpful for the diagnostic of infectious mononucleosis in children.Compared with the single index detection,the diagnosis specificity,sensitivity and accuracy can be improved significantly.So when there is irregular fever in children with the increased serum ADA level and the proportion of abnormal lymphocytes,the possibility of EB infection should be considered.

adenosine deaminase;abnormal lymphocytes;infectious mononucleosis;EB virus

河北省卫生厅重点科技研究计划(No.ZD20140065)

徐福胜(1981-)，男，河北黄骅人，主管检验师，主要研究方向：临床微生物学。

R 725.1

A

10.3969/j.issn.1673-1492.2016.06.003

来稿日期：2016-03-31