HPLC对感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚的含量测定研究

许乐，王媛媛，侯娅妮西安培华学院

HPLC对感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚的含量测定研究

许乐，王媛媛，侯娅妮
西安培华学院

目的：建立测定感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚含量的方法。方法：采用高效液相色谱法，Kromasil C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇：水：冰醋酸（25:75:0.5）为流动相，检测波长：244 nm，流速：1.0 mL·min-1。结果：对乙酰氨基酚在50-200 μg·mL-1浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.9993），平均回收率为99.318%，RSD为0.21%（n=6）。结论：用高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚含量快速准确，重现性良好，适用于感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚的定量分析。

感冒灵胶囊；对乙酰氨基酚；含量；高效液相色谱

感冒灵胶囊是中西复方制剂，由三叉苦、野菊花、岗梅、金盏银盘、薄荷油等中药以及对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏等化学药组成，具有辛热解表，清热解毒的作用，主要用于治疗风热感冒，头和身体疼痛，咽喉红肿疼痛，等症状。由于感冒灵胶囊现行质量标准中对乙酰氨基酚含量测定的方法存在一些问题，如测定方法专属性较差、实验的重现性差、代表性不佳，且操作时间较长等。本研究在现行标准检的基础上，建立了一种简单、快速、准确的HPLC的检测方法。

一、仪器与试药

上海舜宇恒平高效液相色谱仪、LC1620A高压恒流泵、LC1620A紫外检测器、N2000色谱工作站(浙江大学智能信息研究所)。对乙酰氨基酚标准品（中国食品药品检定研究院，批号：100018-200408，纯度按100%计算）；感冒灵胶囊两批分别为：华润三九医药股份有限公司（批准文号：国药准字Z44021939，批号：1509008s）；广西嘉进药业有限公司（批准文号：国药准字Z20055271，批号：1512301）；甲醇为色谱纯；冰醋酸为分析纯；水为重蒸馏水。

二、实验方法与结果

1色谱条件：色谱柱为Kromasil C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇：水：冰醋酸=25：75：0.5；检测波长为244 nm；流速为1.0 mL·min-1；进样量：20 μL。

2对照品溶液的配制：将对乙酰氨基酚对照品在105℃干燥2小时至恒重，精密称定，加流动相制成浓度为80 μg·mL-1对乙酰氨基酚溶液。

3供试品溶液的配制：取感冒灵胶囊去壳研细，精密称量0.2 g，于50 mL容量瓶中，加流动相溶解，超声处理5 min，冷却后加流动相定容，混匀即得。

4阴性溶液的制备：按照处方组成，取感冒灵胶囊中除对乙酰氨基酚之外的其余成分，研细，精密称量适量，以流动相溶解，定容即得。

5线性范围的考察：精密称取经干燥恒重处理的对乙酰氨基酚对照品，用流动相溶解，配制成浓度为0.25 mg/mL的对乙酰氨基酚溶液，量取适量配制成终浓度为200、160、120、80、50 μg·mL-1的对照品溶液，分别取20 μL进样，记录色谱图，将对乙酰氨基酚的峰面积与浓度进行回归分析，绘标准曲线，得回归方程为:Y= 1614.3X-12758(r=0.9993)。结果表明对乙酰氨基酚在50-200 μg· mL-1浓度范围与吸收峰面积线性关系良好。

6系统适用性实验：分别取阴性对照溶液、对照品溶液和供试品溶液，各进样20 μL，记录色谱图，如图1所示（A：隐形对照，B:对照品，C:供试品）。结果显示：供试品中对乙酰氨基酚峰的分离度比较好，而且阴性对照溶液在相同条件下未见干扰色谱峰。

图1　对乙酰氨基酚PHLC色谱图

7精密度实验：取同一批次的感冒灵胶囊制备成供试品溶液，重复进样6次，测定峰面积，计算RSD=0.10%。

8重现性实验：分别取华润三九医药股份有限公司三九感冒灵胶囊样品6份，按2.3项下方法配制。依法测定对乙酰氨基酚的峰面积，计算RSD=0.36%。

9回收率实验：取同一批次的感冒灵胶囊样品0.1 g，精密称定，加入浓度为0.220 mg·mL-1的对乙酰氨基酚对照品溶液10 mL，置于50 mL容量瓶中，加流动相超声处理，冷却定容，摇匀后制成，测定平均回收率为99.318%，RSD=0.21%（n=6）。

10稳定性实验：取同一供试品溶液,每隔2 h测定1次,在0、2、4、6、8、10、12 h各进样20 μL，记录色谱图，计算RSD=0.59%(n=6)，结果表明对乙酰氨基酚在12 h内基本稳定。

11含量测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μl，按上述色谱条件进样测定，计算样品中对乙酰氨基酚的含量，结果显示批号为为1509008s的对乙酰氨基酚含量（标示量）为101.2%；批号为1512301的对乙酰氨基酚含量（标示量）为103.4%。

三、结论

本实验用高效液相色谱法测定感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚的含量，对其线性范围进行了考察、测定精密度实验、重现性实验、系统适用性实验、回收率实验、稳定性实验和含量测定，结果显示对乙酰氨基酚在50-200 μg·mL-1浓度范围内与吸收面积呈良好的线性关系，平均回收率99.318%，RSD为0.21%，方法快速准确，重现性良好，适用于感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚的定量分析。

[1]张黎莉.感冒灵胶囊质量标准中检测方法的研究[D].福建农林大学,2014.

[2]孙晶,薛壮.常用解热镇痛药中对乙酰氨基酚含量测定[J].科技视界,2014,No.9205:184-185.