抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体在类风湿关节炎诊断中的应用价值

夏秋风，张　慧，邹晓月，张龙峰

(江苏大学附属医院检验科，江苏镇江 212001)



抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体在类风湿关节炎诊断中的应用价值

夏秋风，张慧，邹晓月，张龙峰

(江苏大学附属医院检验科，江苏镇江 212001)

摘要:目的了解抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体在类风湿关节炎(RA)诊断中的意义，并比较抗MCV抗体与类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)、抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体的相关性。方法对90例RA患者(RA组)、56例非RA患者(非RA组)和85例健康体检人员(对照组)，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的抗MCV抗体，同时检测87例RA患者类风湿因子(RF)、ESR、CCP抗体指标，用统计学方法分析抗MCV抗体的诊断价值。结果抗MCV抗体对RA诊断的敏感性为78%，特异性为69%，阳性预测值为73%，阴性预测值为76%。抗MCV抗体的平均浓度依次为(459±441)U/mL(RA组)、(42±136)U/mL(非RA组)、(46±152)U/mL(对照组)，RA组的平均抗体浓度较高。RA组活动期[(600±420)U/mL]比慢性期[(70±202)U/mL]抗MCV抗体的平均浓度显著增高。抗MCV抗体与抗CCP抗体(r=0.602,P=0.000)的相关性较与RF(r=0.237,P<0.05)的相关性强，与ESR无相关性(P=0.53)。结论抗MCV抗体在RA中具有较高的敏感性和特异性，与抗CCP抗体、RF有正相关性，联合抗CCP抗体、RF检测可提高RA的诊断效率。动态监测抗MCV抗体的浓度可用于判断RA的病情活动程度。

关键词:类风湿关节炎；突变型瓜氨酸波形蛋白；类风湿因子；红细胞沉降率；环瓜氨酸多肽；抗体

类风湿关节炎(RA)是一种高发的致畸性自身免疫性疾病。早期诊断并及时治疗可以减少骨关节破坏并改善预后。近年来有多种针对RA的自身抗体已用于临床检测。类风湿因子(RF)和抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体等是辅助诊断RA的常用检测指标。有报道显示抗CCP抗体较RF的敏感性差，但特异性高，单独检测某个指标，容易引起RA的漏诊[1-2]。目前多个血清学检测指标联合检测更能提高RA的诊断效率，寻找RA免疫学诊断的新检测指标已成为研究热点。抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)是新兴的辅助诊断RA的免疫学检测指标之一。抗MCV抗体因抗原MCV系天然蛋白来源和具多个潜在抗原决定簇结构特点比抗CCP抗体具有更高的特异性和敏感性[3]。

本研究应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗MCV抗体，分析其在RA诊断中是否比抗CCP抗体或RF具有更高的敏感性和特异性，并比较它与RF、抗CCP抗体、红细胞沉降率(ESR)的相关关系，为RA的早期诊断及判断疾病活动程度提供有价值的帮助。

1资料与方法

1.1一般资料选取2014年3月至2015年12月到本院就诊的RA患者90例作为测试组,年龄26～78岁，平均(60±11)岁，其中RA活动期66例，慢性期24例，均符合1987年美国风湿病协会(ARA)的诊断标准。56例非RA组(其他自身免疫性疾病，主要为强直性脊柱炎、结缔组织病、系统性红斑狼疮、干燥综合征和皮肌炎)作为自身免疫性疾病比较组，年龄15～77岁，平均(51±14)岁。85例健康体检人员(排除自身免疫性疾病)的血清作为对照组，年龄21～91岁，平均(61±15)岁。RA组和对照组年龄差异无统计学意义(t=-1.028，P=0.306)，男女性别分布均匀，排除年龄、性别因素干扰。

1.2方法(1)抗CCP抗体测定采用ELISA法，试剂由德国欧蒙公司提供，严格按试剂盒说明书进行操作。本实验中抗CCP抗体浓度超过800 U/mL，均按800 U/mL计算。阳性判断标准：抗CCP抗体>25 U/mL。(2)RF定量测定采用美国贝克曼库尔特公司Immage特种蛋白分析仪，试剂为专用试剂。阳性判断标准：RF>20 U/mL。(3)抗MCV抗体测定采用ELISA法，检测试剂盒购自德国Orgentee公司，严格按照说明书进行操作。Orgentec公司所推荐的20 U/mL为正常值界限，所能测定的浓度范围为0～1 000 U/mL。本实验中抗MCV抗体浓度超过1 000 U/mL，均按1 000 U/mL计算。阳性判断标准：抗MCV抗体>20 U/mL。(4)红细胞沉降率(ESR)测试采用魏氏法。阳性判断标准：ESR>20 mm/h。

2结果

2.1抗MCV抗体含量比较，RA组比非RA组和对照组均显著增高，差异有统计学意义(P<0.05)，而后两组间差异无统计学意义(P=0.998)；RA患者活动期比慢性期抗MCV抗体水平显著增高，差异有统计学意义(P<0.05)。抗MCV抗体阳性率比较，RA组比非RA组和对照组均高，差异有统计学意义(P<0.05)，而后两组阳性率差异无统计学意义(P=0.798)；RA患者活动期比慢性期阳性率显著增高，差异有统计学意义(P<0.05)。抗MCV抗体对RA诊断的敏感性为78%，特异性为69%，阳性预测值为73%，阴性预测值为76%,见表1。

表1　　抗MCV抗体对RA诊断的敏感性和特异性

注：与RA组比较，*P<0.05；与RA组活动期比较，**P<0.05。

2.2RA组抗MCV抗体与抗CCP抗体、RF及ESR的相关系数(r)分别为0.602、0.237、0.069，P分别为0.000、0.029、0.530，抗MCV抗体与抗CCP抗体、RF呈正相关，与ESR无相关性。

3讨论

有研究报道，抗CCP抗体阴性的RA患者血清中可检测出抗MCV抗体[4-5]。因此，在对RA的诊断中有必要联合检测多个免疫学指标。本研究以抗MCV抗体>20 U/mL为阳性判断标准，得出抗MCV抗体对RA诊断的敏感性为78%，特异性为69%，这与国外曾报道的抗MCV抗体在RA患者的敏感性(48.4%～85.0%)和特异性(80.0%～97.0%)稍有差别。赵华明等[6]指出提高抗MCV抗体的阳性阈值，可提高其诊断RA的特异性，相应降低敏感性，但目前并没有一个统一的阳性阈值可作为RA的临床诊断依据。同样，抗MCV抗体需联合其他自身抗体如抗CCP抗体、RF、抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA)等进行检测，可进一步提高对RA早期诊断的特异性，也避免单一抗MCV抗体检测引起的RA漏诊。

比较抗MCV抗体浓度时发现，RA组的平均抗体浓度比非RA组和对照组均高，后两组差异无统计学意义，提示抗MCV抗体在非RA的其他自身免疫性疾病患者中或很少表达，进一步说明抗MCV抗体在RA的诊断中有较好的特异性。RA组活动期比慢性期的抗MCV抗体的平均浓度显著增高，提示抗MCV抗体的浓度变化与RA的活动程度有正相关关系，这与Derganowa等[7]报道的抗MCV抗体与疾病活动性相关(r=0.404)一致，而与赵华明等[6]报道的有所差别。

衡量RA病情活动的实验室指标包括ESR、CRP、抗CCP抗体和RF等。有报道指出抗CCP抗体和RF的滴度[8-9]及ESR[10]均与RA的病情活动程度呈正相关。抗CCP抗体较RF的特异性高[1]，RF增高可见于其他一些自身免疫性疾病。动态监测ESR可用于评估RA的病情活动程度，但没有特异性。因此这3个指标的特异性顺序为：抗CCP抗体>RF>ESR。用偏相关分析比较抗MCV抗体与这3个指标的相关关系，得出相关性顺序为：抗CCP抗体>RF，抗MCV抗体与ESR无相关性，这正好与上述3个指标的特异性顺序相一致，进一步验证了抗MCV抗体对RA的诊断具有高特异性，而联合抗CCP抗体、RA及ESR能提高RA诊断和判别病情活动程度的特异性。在本研究中RA组存在个别抗MCV抗体低滴度乃至阴性，而抗CCP抗体、RF滴度很高的RA患者，这可能与个体的抗MCV抗体基因表达差异有关。

综上所述，抗MCV抗体对RA临床诊断具有较高的敏感性和特异性，与抗CCP抗体、RF联合检测可进一步提高对RA诊断的特异性。本实验以抗MCV抗体>20 U/mL作为诊断RA的阳性阈值时，虽然有较高的敏感性，但特异性相对较差，为了确定一个合适的抗MCV抗体阳性阈值，还需要做大规模的临床研究。

参考文献

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.042

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)14-2001-03

(收稿日期：2016-01-12修回日期：2016-03-19)