漆酶在石油污染土壤中生物修复的研究

关婧竹（铁岭市林业局，辽宁铁岭 112000）



漆酶在石油污染土壤中生物修复的研究

关婧竹
（铁岭市林业局，辽宁铁岭 112000）

摘 要：文章通过研究不同油浓度污染土壤，经过生物修复后土壤中的漆酶活性变化。结果表明：随着油浓度的增加，土壤中漆酶的活性下降，土壤漆酶活性变化受油浓度影响显著，不同浓度油污染土壤的修复，对漆酶都是呈上升趋势。

关键词：漆酶 土壤酶活性 生物修复 石油 污染土壤

土壤是人类赖以生存的自然资源，土壤环境一旦受到污染，其治理和恢复比大气及水困难得多。生物修复是利用生物技术治理污染土壤的一种新方法。近年来，国际上对生物修复的研究十分活跃，有些国家已将此技术用于污染土壤的实际修复，并取得了显著的成果［1］。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试品：20#重柴油。

供试土壤：试验田0～20 cm表层草甸棕壤（表1、2）。

供试植物：草木樨状黄耆，多年生草本。

1.2 试验方法

试验用Ф15 cm×20 cm陶瓷盆，每盆3 kg土。水分25%（80 ml水），细菌按60%的水分，称重。周期125 d。进行预试验，选择水土比，温度，pH值，反应的时间最佳的试验条件。

表1 土壤理化性质测定结果

表2 土壤理化性质测定结果 　　（mg/100 g）

表3 不同油浓度污染土壤实施方案

表4 在不同油浓度下每个周期漆酶的活性

表5 漆酶活性与油浓度的相关分析

步骤1.取10 g土样，加入25 ml蒸馏水，空气震荡浴150转/min，25℃振荡24 h取出。

步骤2.将混合溶液置于离心机中，8000转/min离心5 min。

步骤3.将上清液过中速滤纸。

步骤4.取3 ml用0.2 mmol的醋酸-醋酸钠缓冲溶液配置的0.05 mmol的ABTS。

步骤5.将步骤3液体置于30℃水浴10 min，取3 ml该液体与3 mlABTS在旋涡混匀器中混匀5秒钟，倒入比色杯中，置于420 nm的分光光度计中，记录：初始吸光度值、1分钟、2分钟、3分钟吸光度值。

2 结果与分析

由表4可知，在没有修复前，各个油浓度的土壤漆酶活性普遍不高，只有2 g/kg油浓度时，漆酶活性较高；修复的第1个周期，漆酶在低油浓度有活性，在20 g/kg和50 g/kg漆酶无活性；第2个周期，各油浓度漆酶都有一定的活性；第3个周期，各油浓度漆酶活性都有提高，只有5 g/kg因其他因素测不到漆酶活性。

在未污染土壤中，3个周期漆酶活性变化不大；在2 g/kg油浓度本底值较高在第1周期下降，第2、第3周期有明显上升；在5 g/kg油浓度漆酶活性变化不大，在10 g/kg、30 g/kg、50 g/kg漆酶活性，都是后一个比前一个周期有明显提高，从整体看，低油浓度的土壤比高油浓度的土壤漆酶活性高。

由表5可知，土壤中漆酶活性变化很大，最大均值达到6.42，其中2 k/kg油浓度时，活性达到36.85，而最小的时候，测不到酶活。双因素方差分析表明，漆酶活性变化受油浓度影响显著。

3 结论

在植物修复前，随着土壤中污染物油浓度的增加，土壤中漆酶活性下降。经过生物修复后，土壤中的漆酶活性在第2周期要比第1周期高。土壤漆酶活性变化，受油浓度影响显著，但不同浓度油污染土壤的漆酶活性是呈上升趋势的。

参考文献

［1］ 吕桂芬，赵吉，赵利，廖仰南.应用土壤酶活性评价草原石油污染的初步研究.内蒙古大学学报（自然科学版），1997，28（05）：687～691

［2］ 康从宝，刘巧，李清心，曲音波，高培基.中国生物化学与分子.生物学报，200 2，18（05）：638～642

［3］ 何为，詹怀宇，王习文，伍红.一种改进的漆酶酶活检测方法.华南理工大学学报（自然科学版），2003，（12）：46～49