放牧时间对羊肉多不饱和脂肪酸沉积及氧化稳定性的影响

2016-08-02 10:52金艳梅张晓庆王冲李美王燚严沁
草业学报 2016年7期
关键词:抗氧化物绵羊

金艳梅,张晓庆,王冲,李美,王燚,严沁

(1.山东大学威海海洋学院,山东 威海 264209;2.中国农业科学院草原研究所,内蒙古 呼和浩特 010010)



放牧时间对羊肉多不饱和脂肪酸沉积及氧化稳定性的影响

金艳梅1,张晓庆2*,王冲1,李美1,王燚1,严沁1

(1.山东大学威海海洋学院,山东 威海 264209;2.中国农业科学院草原研究所,内蒙古 呼和浩特 010010)

摘要:分析不同放牧时间对羊肉抗氧化性能的影响。选择40只乌珠穆沁去势公羔,按照体重和出生月份接近的同质原则随机分成5个处理组:舍饲组(0H,对照),放牧2 h组(2H)、放牧4 h组(4H)、放牧8 h组(8H)和放牧12 h组(12H)。舍饲组圈养,4个放牧组在清晨6:00出牧,依组次分别在8:00、10:00、14:00和18:00归牧。试验期102 d,预试期15 d,正式期87 d。放牧试验结束后,从各组挑选体重接近的6只屠宰,取背最长肌,测定多不饱和脂肪酸(PUFA)和抗氧化物浓度。结果表明,1)放牧时间显著影响羊肉中抗氧化物的浓度。舍饲组的丙二醛(MDA)含量显著(P<0.001)高于4个放牧组,且4个放牧组之间差异不显著。放牧4~12 h组的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)显著(P=0.020)低于舍饲组,但其超氧化物歧化酶(SOD)显著(P<0.001)高于舍饲组。总抗氧化能力(T-AOC)在各组间差异不显著。2)放牧时间与羊肉中的MDA、SOD水平呈二次曲线关系,MDA先降低,至放牧10 h后升高,SOD先升高,至放牧10 h后降低;GSH-Px水平与放牧时间呈负线性关系,放牧时间越长其值越低。3)放牧4,12 h组的PUFA和高度氧化多不饱和脂肪酸(HP-PUFA)均显著高于放牧2 h和舍饲组(P<0.01)。PUFA和HP-PUFA沉积量与抗氧化物浓度之间关系密切。绵羊每天放牧2~10 h,可以改善羊肉的氧化稳定性,防止PUFA氧化,从而延长高品质羊肉的保质期。

关键词:放牧时间;绵羊;抗氧化物;脂质稳定性;多不饱和脂肪酸

肉类氧化变质是畜产品生产加工链中特别需要关注的问题。肉产品出现气味难闻、肉色恶化后,随之会发生油脂和肌血球素氧化,最终导致劣质而废弃[1]。肉类的氧化稳定性取决于许多因素,其中最重要的是促氧化成分和抗氧化成分之间的平衡[2]。多不饱和脂肪酸(PUFA)是肌肉细胞膜脂质氧化反应启动和加速的优选底物[3],如同金属离子、血红素蛋白和活性氧一样,是一种氧化强化剂。作为肉类产品中的一种高度不饱和成分,PUFA极易受氧化攻击而损伤[4],特别是磷脂极性部分含有的PUFA,比例最高、氧化敏感性很强[5]。饮食中的PUFA对人体健康起着非常重要的作用,有防癌、抗心脑血管疾病等功能,但一旦遭受氧化破坏,不仅会引起肉产品质量下降、保存期变短,甚至产生毒素,引发消费者动脉粥样硬化、癌症等疾病[5-6]。饲粮中的外源性抗氧化分子和内源性抗氧化防御,能够通过对抗氧化反应而提高脂质氧化稳定性,从而延长肉品保存期。

采食作为动植物生产层的交界点,决定着动物从饲粮中摄入抗氧化物和脂肪酸的数量,从而影响肉产品的氧化稳定性[7-8]。放牧家畜的采食活动远比舍饲家畜丰富而复杂,这致使二者在肉品质上存在明显差异,主要体现在抗氧化物、促氧化物和脂肪酸成分的不同[2]。而且,放牧能够提高畜肉中PUFA含量[9-10]和抗氧化物水平,改善PUFA的氧化稳定性[11-12]。研究发现,放牧提高了牛肉中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)水平和总抗氧化能力(T-AOC)[13],提高了牛奶的脂肪稳定性和GSH-Px、SOD活性[14]。放牧畜产品的这些优势可能来源于长时间的放牧采食活动。作为一种新兴放牧方式,限时放牧有显著提高羊肉中PUFA的作用[15-16]。这种作用是否与羊肉的抗氧化性能有关?与放牧时间又有什么关系?为了回答这些问题,本试验以乌珠穆沁羔羊为研究对象,通过分时段放牧,研究不同时长放牧对羔羊肉抗氧化性能的影响,并揭示PUFA含量与抗氧化物水平之间的伴随关系。试验结果可以为提高高品质羊肉的氧化稳定性及延长保质期,提供方法指导。

1材料与方法

1.1试验地点

试验于2011年6-9月,在内蒙古锡林郭勒盟毛登牧场进行。毛登牧场距离锡林浩特市东36 km(115°13′-116°30′ E,43°02′-44°49′ N)。属温带大陆性季风气候,年平均温度2.0 ℃,年平均降水量300~360 mm,主要集中在6-8月份。草原类型属于克氏针茅(Stipakrylovii)典型草原,其中,克氏针茅和糙隐子草(Cleistogenessquarrosa)分别占56%和26%,羊草(Leymuschinensis)、寸草苔(Carexduriuscula)、野韭(Alliumramosum)等其他物种占18%[17]。土壤类型主要是栗钙土。草地畜牧业是当地的主导产业,主要放牧生产牛和羊。常见的绵羊品种有乌珠穆沁羊,属脂尾肉用粗毛羊,具有肉质鲜美、羔羊生长发育快的特征。

1.2试验动物与分组

将40只断奶、健康的乌珠穆沁去势公羔按照同质原则[3~3.5月龄,(21.9±0.4) kg]随机分成5个处理组,每组重复8只:舍饲组为0H(对照),放牧2,4,8,12 h组分别为2H,4H,8H,12H。舍饲组圈养,4个放牧组单独分群放牧在约30 hm2草地。所有羔羊的补饲饲料均由全价精料和谷草干草组成(干物质中蛋白质和代谢能分别为18.7%,5.9%和12.3,8.7 MJ/kg),补饲量参照我国和NRC推荐的日增重200 g绵羔羊的营养需要量设置。各处理组的总干物质采食量(DMI)、放牧采食量及营养物质摄入量,见表1。试验期102 d,预试期15 d,正式期87 d。

表1 各处理组饲料采食量及营养物质摄入量Table 1 Feed and nutrient intakes of lambs

1.3饲养管理

试验开始前,所有参试羔羊免疫、驱虫。从预试期开始,舍饲组每天12:00、18:00分两次饲喂精料。4个放牧组每天6:00同时出牧,依组次分别在8:00,10:00,14:00,18:00结束放牧。归牧后2H、4H组饲喂精料的时间与舍饲组相同,8H、12H组仅在18:00饲喂1次。5个处理组精料投喂量分别为464,393,267,229,122 g/d。谷草干草从早8:00到晚9:00随时添加,晚9:00后禁饲。所有羔羊自由饮水,自由舔舐盐砖。预试期结束,转入正式期,各处理组饲养制度不变。放牧试验结束后,从每组挑选体重相近的6只屠宰。屠宰前24 h禁食,宰前2 h禁水。

1.4样品采集与制备

宰后45 min取背最长肌,在-20 ℃冰箱冷冰保存。运回实验室后,切取鲜样约40 g,装入铝盒,用LABCONCO(Freezone 6,美国)冻干机冷冻干燥(冻干机工作环境:-53 ℃,0.52 mBar)。冻干样品用100 g高速粉碎机粉碎,混合均匀,装入锡纸袋,待测丙二醛(MDA)、GSH-Px、SOD、T-AOC和多不饱和脂肪酸含量。

1.5测定指标与方法

MDA、GSH-Px、SOD和T-AOC用试剂盒测定(购自南京建成生物工程研究所)。多不饱和脂肪酸含量用GB/T 22223-2008气相色谱法测定[18],色谱条件:毛细管色谱柱(60 m×250 μm×0.25 μm),进样温度260 ℃(初始温度130 ℃,持续1 min;后每min升温4.0~6.5 ℃;230 ℃保持3 min),检测器温度270 ℃,分流比20∶1,进样量1.0 μL。每个样品测定2次。

1.6数据统计与分析

试验数据用SAS V8.2软件进行单因素方差分析。方差差异显著时用邓肯氏法做多重比较,结果用Mean±SD表示,当P≤0.05时视为差异显著。放牧时间与MDA、GSH-Px、SOD和T-AOC之间的关系用简单线性回归模型分析,PUFA、高度氧化脂肪酸(HP-PUFA)与MDA、GSH-Px、SOD之间的数量关系用多元线性回归模型分析。

2结果与分析

2.1抗氧化性能在各处理组间的差异

除了T-AOC外,放牧时间对各处理组的抗氧化指标均有显著影响(表2)。舍饲组的MDA含量最高(7.67;P<0.001),12H组最低(3.33),而2H、4H、8H组之间差异不显著;舍饲组的GSH-Px显著(P=0.020)高于4H、8H和12H组,后三者之间无显著差异;舍饲组的SOD最低(72.86;P<0.001),2H组次之,4H、8H、12H组最高,且三者间无显著差异;T-AOC在各组间差异不显著。

表2 各处理组羔羊背最长肌的抗氧化性能Table 2 Antioxidant capacity of M. longissimus dorsi muscle of lambs

同行数据有相同字母或无字母者表示差异不显著(P>0.05),下同。In the same row, values with same or no letters are not significantly different (P>0.05). The same below.

2.2抗氧化性能与放牧时间之间的关系

简单回归分析结果显示,羊肉中的MDA与放牧时长呈二次曲线关系(R2=0.551,P<0.001),随着放牧时间的延长,MDA先降低,至放牧10 h时升高(图1A)。GSH-Px与放牧时长呈负线性关系(R2=0.782,P=0.046),放牧时间越长,GSH-Px含量越低(图1B)。SOD与放牧时长存在二次曲线关系(R2=0.710,P<0.001),随着放牧时间的延长,SOD含量先升高,至放牧10 h时反而降低(图1C)。T-AOC与放牧时长之间不存在线性或二次回归关系(R2=0.010,P=0.870)(图1D)。

图1 放牧时间与羔羊背最长肌中MDA(A)、GSH-Px(B)、SOD(C)、T-AOC(D)之间的关系Fig.1 Relationships between grazing time and MDA (A), GSH-Px (B), SOD (C) and T-AOC (D) of M. longissimus dorsi muscle of lambs

2.3PUFA和HP-PUFA在各处理组间的差异

放牧时间对各处理组PUFA组分均有显著影响(P<0.01),除C20:3外,4H、8H、12H组的C18:2、C18:3、C20:4和C20:5均显著高于舍饲组,而在4H、8H、12H组间无显著差异;2H、4H、8H组的C22:6显著高于12H组和舍饲组。放牧时间对各处理组总PUFA和HP-PUFA也有显著影响(P<0.001,P=0.006),二者都为舍饲组最低(5.69%,2.14%),2H组次之,4H、8H、12H组最高,且在后3组间差异不显著(表3)。

表3 各处理组羔羊背最长肌脂肪酸含量和HP-PUFATable 3 Fatty acid composition of M. longissimus dorsi muscle of lambs %

C18:2: 亚油酸Linoleic acid;C18:3: 亚麻酸Linolenic acid;C20:3: 二十碳三烯酸Eicosatrienoic acid;C20:4: 花生四烯酸Arachidonic acid;C20:5: 二十碳五烯酸Eicosapentaenoic acid;C22:6: 二十二碳六烯酸Docosahexenoic acid. PUFA: Polyunsaturated fatty acids. HP-PUFA: 高度氧化多不饱和脂肪酸是有3个或者更多不饱和键的脂肪酸的总和。Highly peroxidizable polyunsaturated fatty acids; it calculated as the sum of PUFA with three or more unsaturated bonds.

2.4抗氧化物与PUFA和HP-PUFA之间的数量关系

多元回归分析结果显示(图2),羊肉中的抗氧化物含量与PUFA、HP-PUFA沉积量之间存在线性关系,决定系数R2分别为0.586(P<0.001)和0.602(P<0.001)。其中,MDA和GSH-Px对多元回归方程的贡献为负增长,而SOD为正增加。

图2 羔羊背最长肌中PUFA和HP-PUFA与MDA、GSH-Px和SOD之间的关系Fig.2 Relationships between PUFA and highly peroxidizable PUFA (HP-PUFA) and MDA, GSH-Px, and SOD of M. longissimus dorsi muscle of lambs

3讨论与结论

3.1放牧时间对羊肉抗氧化性能的影响

动物在生命过程中不可避免地产生氧自由基,危害机体功能。SOD和GSH-Px可以清除氧自由基,防止细胞膜脂质过氧化。它们的活性水平可反映机体清除氧自由基的能力。而MDA是脂质参与氧化反应的终产物,其活性水平反映了机体细胞受自由基攻击的严重程度。对于家畜而言,放牧对氧自由基的清除效果优于舍饲,因而放牧畜产品具有更好的氧化稳定性。一方面,这与放牧家畜的自由采食特性有关。因为天然草原牧草种类丰富多样,能为放牧家畜提供如维生素E、类胡萝卜素等高水平抗氧化物,并通过采食进入体组织,从而提高肉品质[2]。这也是本试验4个放牧组SOD浓度显著高于舍饲组,而MDA浓度显著低于后者的主要原因。另一方面,放牧家畜的氧化稳定性较优还可能与长期放牧运动有关。顾丽燕等[19]通过不同持续时间和运动频率的游泳锻炼,分析了运动量对大鼠血清抗氧化指标的影响,结果表明,高频率、长时间运动(每周6次、每次2 h)显著(P<0.001)提高了大鼠血清中的SOD/MDA和T-AOC浓度,而显著(P<0.001)降低了MDA浓度。Jenkins[20]和Oh-ishi等[21]也得到了类似结果。本试验中,放牧4~12 h羔羊肉的抗氧化能力较强,主要是由于这三组羔羊的放牧采食时间较长[22],随之产生的放牧运动量也比较大。但是,这种运动量并不是越大越好,而是以2~10 h为最好。这一点可以从MDA、SOD和T-AOC的二次曲线图(图1A,C和D)得以印证(虽然关系不紧密,但趋势明显)。

本试验4个放牧组的肌蛋白GSH-Px浓度显著低于舍饲组(表2),但蒙诚志[23]在比较舍饲与放牧绒山羊抗氧化功能的试验中却得到了相反的结果。这种差异与放牧区牧草硒含量有关,因为GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸。本试验放牧草场硒水平较低(0.10 mg/kg[24]),即使全天12 h放牧,羔羊从牧草中摄取的硒仅为0.13 mg/d(放牧采食量见表1),低于育肥羊(体重25~35 kg)对硒需要量的下限(0.16~0.23 mg/d,内蒙古饲养标准)[25],故而在本试验区放牧时间越长,羊肉中GSH-Px的活性就越低。由此可见,对于放牧羊,每天放牧运动的时间不可多于10 h。

3.2PUFA沉积与羊肉抗氧化性能的关系

对于肉类的脂质氧化,PUFA起着非常重要的作用,因为它们是氧化反应的优选底物。而脂肪酸对氧化反应的易感性是随其不饱和度的增加而增加的,例如,亚油酸(LA, C18:2 cis-9, cis-12)的抗过氧化作用是亚麻酸(LNA, C18:3 cis-9, cis-12, cis-15)的2倍多[26]。正是由于这个原因,虽然HP-PUFA在肌肉组织中含量甚微,但其浓度变化很小,足以维持肉类的氧化稳定性[27]。现已公认,精料舍饲会破坏家畜胴体PUFA的沉积,从而导致其含量下降[13,28]。本试验也得到一致结果。而且,本试验将每天8~12 h放牧转变为每天4 h放牧,可以获得等同的PUFA沉积效果。如前所述,每天放牧4 h组高水平抗氧化性能可阻止肉中PUFA的氧化降解,从而保持了较高的PUFA沉积量。Luciano[28]试验结果表明,尽管采食量较低,但下午放牧4 h组羔羊肉中仍然沉积了足够的抗氧化物来防止脂质过氧化,从而使其PUFA和HP-PUFA浓度较高,氧化稳定性较好。肉类产品中的PUFA之所以容易被氧化降解是因为它们具有很高的磷脂亲和力,会引发脂质氧化反应,并迅速降解。本试验多元线性回归分析结果(图2)进一步肯定,羊肉中的PUFA和HP-PUFA沉积量与抗氧化物MDA、GSH-Px和SOD水平密切相关,可以通过降低肌肉组织中MDA水平和提高SOD水平的方式,提高机体PUFA和HP-PUFA的沉积量。而这些抗氧化物水平的高低又由放牧时间决定。虽然有关放牧时间与畜体组织PUFA及抗氧化性能关系方面的研究报道很少,但以上结果很明显,放牧时间或者放牧运动量对二者的强化和富集均有显著的作用。因此,对于现代放牧管理制度来讲,缩短放牧时间是很有必要的,不仅是为了保护放牧畜产品的优势,更是为了草原保护。因为当下草地资源正在逐步短缺,传统的草地畜牧业生产已经很难满足生态保护和经济增收的双重要求[29]。变革传统放牧制度虽然增加了饲料投入,但同时也增加了羊肉产出。据张晓庆[16]分析,折合投入与产出,放牧2~10 h所获得的利润(5.0~5.2元/kg羊肉)略优于舍饲(4.9元/kg羊肉)。综合以上所述,绵羊每天放牧2~10 h对提高羊肉氧化稳定性非常有益,可以保护PUFA免遭氧化降解而变质,从而延长高品质羊肉的保质期。

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DOI:10.11686/cyxb2015448

*收稿日期:2015-09-23;改回日期:2015-11-16

基金项目:国家自然科学基金项目(31402119)和中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610332015014)资助。

作者简介:金艳梅(1978-),女,甘肃金塔人,讲师,博士。E-mail: jinym2001@sohu.com *通信作者Corresponding author. E-mail: zhangxiaoqing@caas.cn

* 1Effects of grazing duration on polyunsaturated fatty acid deposition and oxidative stability of lamb meat

JIN Yan-Mei1, ZHANG Xiao-Qing2*, WANG Chong1, LI Mei1, WANG Yi1, YAN Qin1

1.FacultyofMarineStudies,ShandongUniversityatWeihai,Weihai264209,China; 2.GrasslandResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Hohhot010010,China

Abstract:The aim of this research was to investigate the effects of the grazing duration on polyunsaturated fatty acids (PUFA) deposition and oxidative stability of lamb meat. Forty castrated male Ujumuqin lambs were randomly assigned to five groups with similar liveweight and age, and then subjected to the following treatments: (i) no grazing (0H, control), (ii) 2 h grazing (2H), (iii) 4 h grazing (4H), (iv) 8 h grazing (8H), and (v) 12 h grazing (12H). Each day, the lambs began to graze at 6:00, and stopped grazing at 8:00, 10:00, 14:00 and 18:00, respectively. The lambs were raised for 102 days, comprising a 15-d feed adaptation period and an 87-d experimental period. Six lambs with similar liveweight from each group were slaughtered at the end of experiment. The longissimus dorsi muscles were sampled from each lamb to measure PUFA contents and antioxidant properties. The results showed that the grazing time significantly affected antioxidant parameters. The meat of lambs fed concentrate in stalls had a higher (P<0.001) malondialdehyde (MDA) content than those in the meat of lambs grazed for 2-, 4-, 8- and 12-h, but there was no significant difference in meat MDA content among the lambs in the four grazing treatments. The meat of lambs grazed for 4-12 h had significantly higher (P<0.001) superoxide dismutase (SOD) activity, but significantly lower peroxidase (GSH-Px) activity (P=0.020) than those in the meat of lambs exclusively fed in pens. There was no significant difference in the total antioxidant capacity (T-AOC) among the five groups. The MDA content and SOD activity showed quadratic curve relationships with grazing time. The MDA content decreased up to 10-h of grazing time, and increased after that. In contrast, SOD activity increased up to 10-h of grazing time, and then decreased. The GSH-Px activity was negatively related to grazing time. The groups grazed for 4-h and 12-h had significantly higher PUFA and peroxidizable fatty acids (HP-PUFA) contents in the meat, compared with the 2-h and 0-h grazing groups (P<0.01). There were multiple linear relationships between antioxidant activity and PUFA (R2=0.586, P<0.001) and HP-PUFA (R2=0.602, P<0.001) contents. In conclusion, the meat of lambs grazed for 2-10 h showed better oxidative stability as a result of compounds that counteract oxidative reactions. This has important consequences for extending the shelf-life of lamb meat.

Key words:grazing time; sheep; antioxidants; lipid stability; polyunsaturated fatty acids

http://cyxb.lzu.edu.cn

金艳梅, 张晓庆, 王冲, 李美, 王燚, 严沁. 放牧时间对羊肉多不饱和脂肪酸沉积及氧化稳定性的影响. 草业学报, 2016, 25(7): 104-111.

JIN Yan-Mei, ZHANG Xiao-Qing, WANG Chong, LI Mei, WANG Yi, YAN Qin. Effects of grazing duration on polyunsaturated fatty acid deposition and oxidative stability of lamb meat. Acta Prataculturae Sinica, 2016, 25(7): 104-111.

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