林育圣(上海派斯德生化有限公司)
微量元素铁在养猪生产中的应用
林育圣(上海派斯德生化有限公司)
林育圣,中国台湾大学动物科学与技术学系博士。
专长:分子营养学、消化生理学、转基因技术、饲养管理。
这个题目我认为大家会觉得比较耳熟能详,常常听到。目前,微量元素氨基酸螯合物慢慢地取代前几年非常红火的酶制剂。刚回国内没多久,发现国内的畜牧产业正在快速发展,我非常高兴。今天我的报告分为四部分。
图1 饲料的组成
图1是饲料的组成部分,其中玉米、豆粕、麸皮占饲料总成分的70 %~80 %,接下来是维生素和添加剂占13 %,微量元素占1 %,其实在现场有时还达不到1 %,但这1 %却起到关键性作用。接下来我为大家介绍这一关键性作用。
微量元素含铁、铜、锌、锰、碘、硒、钴和铬,这些元素在预混料中都会添加。那么,它们在细胞阶段的作用是什么?以铁为例,在线粒体的电子传递链中,铁是细胞阶段中生化反应的重要元素,在能量代谢上扮演重要角色,包括作为辅因子、结构物和活化物的部分。在生长阶段,这些微量元素可以促进骨骼生长以及激素合成。在生殖阶段,微量元素与后备母猪和经产母猪发情有非常大的关系,与胚胎的着床数、产仔数、乳汁组成、仔猪活力也有相当重要的关系。在生产阶段,微量元素可以提高采食量、降低料肉比、提高肉品质。我将这比作小小东西有大大效果,因此我们要好好地使用它们。同时添加太多也会造成毒性作用。
图2 5种不同成分铁对比
1.1 微量元素的存在形式
微量元素的存在形式分为有机和无机。近年来,有机微量元素又出现了一种新形式,称为螯合物或络合物。螯合物比第一代的无机、第二代的有机微量元素的性能要好。美国饲料管理协会在2005年对有机微量元素(螯合物)进行分类:矿物质与特殊氨基酸复合物、矿物质与氨基酸复合物、氨基酸螯合矿物质、蛋白类矿物质、矿物质与多糖类复合物、丙酸类矿物质。
1.2 氨基酸螯合矿物质优越性
1.2.1吸收率更高
5种不同成分铁对比,甘氨酸亚铁有较高的吸收率,接近80 %。一般饲料中会添加较便宜的铁,如硫酸亚铁,经济又实用,吸收率为20 %左右。甘氨酸亚铁的吸收率比硫酸亚铁高出约4倍(图2)。甘氨酸亚铁的吸收率为什么这么好?其他微量元素在体内以离子态被吸收,需要通过离子通道,但体内浓度比肠道高,因此这个通道走不通。而螯合矿物质会经过另外一个通道——氨基酸通道。氨基酸螯合微量元素可以利用氨基酸通道,提高吸收率。
1.2.2 生物学效价高
无机铁不能通过胎盘被吸收。根据国外研究报告,氨基酸螯合铁可以通过胎盘直接进入发育中的猪胚胎。研究表明,胎儿体内含铁量高可降低初生仔猪死亡率,提高初生重及断奶重。这么好的吸收率可能是因为肽转运系统。Liang等(1995)在人的胎盘中检测到PepT1 mRNA,但目前对于猪胎盘的肽转运系统还不是很清楚。
表1是派斯德公司进行的母源铁对仔猪肝脏铁含量的分析。第一组FeSO4•7H2O,第二组甘氨酸螯合铁,相同的母猪头数。结果显示,第一组仔猪的平均初生重1.10 kg,第二组平均初生重1.39 kg。出生后平均肝铁含量:第一组是640 μg/mg,第二组是1 221μg/mg,足足增加了91 %。7 d后仔猪体内铁含量下降,但是甘氨酸螯合铁还是增加85 %。甘氨酸螯合铁在仔猪出生时通过胎盘进入仔猪体内,相比体内原有的要多,所以超越了屏障才能有特殊的功能性。
图3 DMT-1和PepT1mRNA的表达
1.2.3 稳定性高
植酸存在于植物的细胞壁,饲料中含有很多植酸,然而动物不能将其消化,因此无法利用植酸中的磷,必须额外添加无机磷,这样不仅造成饲料成本提高,而且无机磷吸收率较低,很大部分又被排出。植酸酶可以破坏植酸结构,从而有利于动物吸收植酸中的磷,无需再添加无机磷。
植酸除了会结合体内的营养外,还会结合二价离子。无机微量元素在体内必须变成离子态才能够被吸收,而二价离子态微量元素很容易被植酸结合,导致其不易被动物吸收。甘氨酸螯合铁不与体内其他物质结合,因此有较高的稳定性。稳定性高也代表吸收和利用的价值被提高。
1.2.4 较高的抗病和抗应激作用
微量元素氨基酸螯合物具有增强抗菌能力、提高免疫应答反应、促进动物细胞和体液免疫力的功效,对某些肠炎、皮炎、痢疾和贫血也有治疗作用;还具有良好的抗应激功能,在接种、去势、气温过高和日粮变更等应激条件下,有良好的作用效果。
1.2.5 减少对环境及土地污染
在猪饲料中添加大量无机矿物质,如铜、锌,这些矿物质会不会全部被吸收?结果证明不会,而会随粪便排出体外,造成环境污染,影响动物健康和畜产品安全。如果未来我们吃的肉都有重金属污染你还敢吃吗?另外,在常规日粮中,以氨基酸螯合物形态存在的微量元素,其吸收率大约是无机态微量元素的4倍。现在许多研究单位都在研究这方面,降低无机矿物质的量是未来发展方向。
图4 PepT1蛋白质的表达
1.2.6 安全性高,适口性好
微量元素氨基酸螯合物作为体内生化过程的中间产物,对机体产生的毒副作用小,安全性高,微量元素氨基酸螯合物的半数致死量远远大于无机盐。
一般无机微量元素适口性较差,微量元素氨基酸螯合物克服了这方面的缺点,由于含有大量氨基酸,具有氨基酸特有的鲜香味,适口性好,具有诱食作用,易被动物采食,利于胃肠道的吸收利用,同时可增强动物体内生物酶的活性,提高蛋白质、脂肪和维生素的利用率,大大促进了动物生长性能的发挥。
氨基酸螯合矿物质确实比无机矿物质的利用效果好,但由于价格很高未能在生产上广泛利用。
派斯德、奥特奇、金宝等企业都在生产氨基酸螯合矿物质,价格高的主要原因是生产工艺成本高。
氨基酸螯合矿物质的吸收可能是通过氨基酸或肽的吸收方式:a. 小肽可以直接转运入小肠细胞,完整地被吸收入血液。b. 小肽可以在小肠细胞中分解成氨基酸。c.氨基酸可以被转运入小肠细胞内,铁或微量元素被释放出。
日粮蛋白质进入胃后,首先胃蛋白酶将其分解,进入十二指肠前段时,胰蛋白酶以及一些分解酶将饲料中的蛋白质分解成寡肽和氨基酸。寡肽包括二肽和三肽,二肽和三肽如何被十二指肠吸收呢?又如何进入血液?这养猪者来说可能那么重要,他们只需把猪养好。但是对我们研究人来说,很好奇,到底是什么原因吸收得这么好。其实在1994年人医已经找到小肠刷状缘膜上的肽转运蛋白(Peptide Transporter 1,PepT1),Shiraga等(1999)试验表明,在小鼠标准日粮中添加二肽(Gly-Phe),饲喂3 d,能增加PepT1基因表达。Hong Chen 等(2005)在鸡试验中配置不同的日粮蛋白水平(粗蛋白含量分别为12 %、18 %和24 %),各处理组采食量相同。结果显示,随着蛋白采食的增加,PepT1基因表达升高。
高蛋白日粮可以增加肠道中二肽、三肽和氨基酸的浓度,这些产物作为PepT1基因表达的信号因子,会增加小肠刷状缘膜上的肽转运蛋白的浓度,最终促使肽转运增加。
研究不同肠段PepT1 mRNA的表达量,结果显示在十二指肠、空肠、回肠中,其在十二指肠的表达量最高。
分别使用实时荧光定量PCR(Realtime PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测基因mRNA表达以及蛋白质表达量。这两种方法在实验室中应用比较普遍,操作简单。培养猪小肠上皮细胞,分别加入甘氨酸螯合铁和硫酸亚铁培养36 h,然后收集细胞,检测DMT-1 mRNA和PepT1 mRNA的表达(图3),结果发现两组之间PepT1 mRNA的表达量差异性显著,DMT-1 mRNA的表达量差异性不显著。
比较肠道中PepT1蛋白质的表达量,发现24 h、36 h都有极显著差异,因此甘氨酸螯合铁在小肠细胞膜上的运输可能与PepT1转运蛋白有关(图4)。
结果证明PepT1是由2~3个氨基酸组成的小肽,由与氢离子结合的主动运输被表皮细胞吸收,再被分解成氨基酸。
铁是红细胞中血红蛋白的组成成分,是肌肉中肌红蛋白的组成成分,为细胞色素的主要成分,还是体内许多酵素的组成成分[细胞色素C、细胞色素氧化酶、细胞色素还原酶、过氧化物酶、过氧化氢酶、还原型烟酰腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶]。铁在十二指肠被吸收后,存储在肝脏,在脾脏重新再利用。猪对铁的需求很高,但不能添加太多。
铁缺乏对猪产生的影响:造成母猪贫血,血氧代谢差,肌肉无力,产程长,怀孕初期乳腺发育不良,奶水不足,影响初生重及断奶重;造成仔猪缺铁性贫血,血氧代谢差,生长速度慢,皮肤苍白,容易拉稀,发病及死亡率高。结果表明甘氨酸螯合铁可以提高吸收率,提高生物利用率,提高免疫及抗应激能力,同时提供微量元素和氨基酸的双重营养作用,增加血氧代谢能力。
两个氨基酸的螯合物,分子最小,最容易吸收;同时供应铁和造血所需的甘氨酸;具备良好的缓冲能力,使肠道维持正常的pH;可迅速转化更多的血红素,携带更多的氧气。
氨基酸螯合铁可提高母猪的繁殖性能,改善母猪体况,提高母猪及自主血红蛋白含量,防止仔猪贫血、腹泻,提高仔猪初生重、存活率、断奶重。氨基酸螯合铁还可提高仔猪采食量,加快生长速度,增加日增重,降低料肉比,降低腹泻率。氨基酸螯合铁也可提高育肥猪采食量,提高日增重,降低料肉比,增加瘦肉率,肉质鲜红,提高经济效益。
让营养成分在正确的地方做正确的事。试验结果不同,表明不同动物、不同日粮营养、不同生理条件都会影响机体对微量元素的需要量。Dijkhuizen等(1989)指出正确使用螯合矿物质可提升母猪的生产潜能16 %以上。未来微量元素螯合矿物质有可能是改善饲料的核心动力。
派斯德一直走在时代的尖端,可以看到氨基酸螯合矿物质正在控制基因转录、翻译,调节基因表达,可以更有效地提高和控制动物生长,派斯德提供能让消费者安心的动物产品——动物营养基因体学。
在未来,随着我们对氨基酸螯合矿物功能的更加了解,必定能创造出更高的价值。