新型环保水质氨氮快速检测试剂盒的研制与应用

李汶岭

广元市环境监测中心站



新型环保水质氨氮快速检测试剂盒的研制与应用

李汶岭

广元市环境监测中心站

摘 要：目的：探讨新型环保水质氨氮快速检测试剂盒的研制与应用。方法：以GB5750—2014生活饮水标准检验方法中氨氮检测酚盐分光光度法，对试剂显色条件进行分析，并将试剂、比色板拼装为试剂盒，与市售试剂盒及标准做比较分析、测定。结果：做出的比色板测定，与国标法测定结果误差较小，比市售氨氮试剂盒精准、灵敏度更高，无汞污染。结论：本次采用的方法，制定新型氨氮试剂盒，有效、精准、环保，可进行进一步应用推广。

关键词：新型环保；水质氨氮；快速检测；试剂盒

在水质检测分析中，铵根离子、游离铵，属于必检项目，这两种离子，是水质氨氮中的主要成分，按照国家标准，检测方法复杂，所需时间久；但是，采用试剂盒法，对其进行检测，方便、快速，易于普通人群使用［1］。本组实验采用酚盐分光光度法，对试剂显色条件进行分析，并将试剂、比色板拼装为试剂盒，与市售试剂盒及标准做比较分析、测定。现将具体情况报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择实验仪器、试剂；仪器有电子分析天平（日本）、Beckman DU800（美国）；试剂均为分析纯；有乙醇、碳酸钠、苯酚、次氯酸钠、柠檬酸钠、亚硝基铁氰化钠、氢氧化钠［2］。

1.2 方法

首先，配制标准比色板；氨氮标准溶液、空白溶液，共九份，分别为0.025、0.050、0.100、0.250、0.500、0.750、1.000、1.500、2.000（单位：mg/L）；

其次，以国标酚盐分光光度法，制作标准色阶：黄色——黄绿——蓝绿——浅蓝——蓝色（共10个色阶）；

第三，装瓶、制盒；经多次试验、筛选，选择A、B，两种氨氮液，放入试剂盒；

第四，具体试验，要求以说明书为准，然后，加入两种溶液，待摇晃均匀后，间隔一定时间，可进行比色板观察、对照，得出测试结果，标明氨氮浓度。

2 结果

首先，选择测量波长；取配置的溶液（0.500、1.000、2.000，单位：mg/L），加入试剂，与空白值比较，测定不同波长下的吸光度；吸光度随波长变化曲线，具体如下图1所示。

吸光度（Abs）

图1 吸光度随波长变化曲线图

图解：在630nm处，有色化合物生成，呈现出最大吸收峰；所以，从实验中可得出结论，把此处作为吸收波长。

其次，选择显色时间；取配制好的溶液（0.050、0.025、0.500、1.000，单位：mg/L），在吸收波长处，加入A、B两种溶液，观察吸光度随时间的变化，具体如下表1所示。

表1 显色时间与吸光度的关系

第三，PH适用范围；经过配制不同于PH值浓度的氨氮溶液（浓度为1.500，单位：mg/L），加入A、B两种溶液后，观察标准比色卡与其不同，具体如下表2所示。

表2 试剂盒PH适用范围实验

第四，经实验表明，温度对显色时间有显著影响；在常温25摄氏度之下，温度对显色时间有一定影响；恒温水浴40摄氏度之下，显色完全仅需15分钟；温度过低，反应时间会增加。

第五，对稳定性的试验方面，需进行加速试验、常温试验、低温试验。以下进行具体分析：

在加速试验中，可将试剂盒放在40摄氏度环境下（可允许正负2摄氏度偏差）；取溶液0.500、1.000、2.000（单位：mg/L）作为样品进行测试，观察2周，并时时观察显色情况，应该对照标准比色卡进行，并做好记录；本次试验表明，显色不明显，说明易于在此条件下进行保存；在常温试验中，取0.500、1.000、2.000（单位：mg/L）作为试验样品，3种溶液，需要先进行2周1次的观察，以1月为期；然后，可进行后续试验，以每月1次的试验为标准；在低温试验中，放置于冰箱之中，以4摄氏度为宜，其它均同于以上常温试验。

第六，在应用方面，本次实验选择某校园湖水、自来水、模拟水样进行比较分析。检测结果如下表3所示。

表3 试剂盒法、国标法比较

3 讨论

市场上所售的快速试剂盒因质量问题，检测结果并不是非常理想；市售试剂盒及标准做比较分析、测定；市售试剂盒，比色卡颜色由浅黄——黄色——棕色，共6个色阶，因肉眼辨别度低，所以误差较大，精准度低［3］。

本组实验中，采用盐酚分光光度法，对试剂显色条件进行分析，并将试剂、比色板拼装为试剂盒；制成具有10个色阶的显色卡，并配置多种溶液，进行数次实验，筛选出适宜的试验标准溶液，然后，分时、分段，对其进行测试，比如对其吸收波长的选择、显色时间的选择、PH适用范围的测试等，最后做出结论；做出的比色板颜色梯度变化显著，与国标法测定结果误差较小，比市售氨氮试剂盒精准、灵敏度更高，无汞污染；在室温条件下，该试剂盒保存时间为6个月，冰箱保存时间为1年［4］；因此，研制新型水质氨氮快速检测试剂盒，按照氨氮浓度进行制作，可克服市售试剂盒针对低浓度无法分辨的缺陷，与国标法测定结果进行比较，误差较小，可靠度较高［5］。

综上所述，本次实验操作简单、显色卡对比度强，易于辨认，适用于普通人群使用；与市场所售的试剂盒相比，本次采用的方法，制定新型氨氮试剂盒，有效、精准、环保，可进行进一步应用推广。

参考文献：

［1］李培佩.一种新型氨氮在线自动监测仪的应用研究［J］. 建筑工程技术与设计，2014，28（13）：13—14.

［2］杨桂彬。魏红。胡伏莲等.安速快速检测试剂盒诊断幽门螺杆菌的现症感染［J］.世界华人消化杂志。2014，12（23）：134—135.

［3］程福亮。梁瑾。范群平等.禽流感H9亚型一步法RT-PCR快速检测试剂盒的研制及应用［J］.中国畜牧兽医。2013，36 （1）：291—292.

［4］吴丹.检测不同水质中氨氮分析方法的探讨［J］.建筑工程技术与设计。2015，35（9）：382—383.

［5］邓翔宇.水质监测中氨氮测定的影响因素分析［J］.资源节约与环保。2014，13（4）：2011—2012.