卢金霞,王金慧,周倩宇,朱秀春,张玉彦,周学章,*
(1.宁夏大学生命科学学院,西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川 750021;2.福建农林大学动物科学学院,福建福州 350000;3.宁夏智弘生物科技有限公司,宁夏银川 750021)
晶维他复合液体维生素对鸡理化性能的影响
卢金霞1,王金慧1,周倩宇2,朱秀春3,张玉彦3,周学章1,3*
(1.宁夏大学生命科学学院,西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川 750021;2.福建农林大学动物科学学院,福建福州 350000;3.宁夏智弘生物科技有限公司,宁夏银川 750021)
摘要:本试验旨在研究复合维生素对鸡机体免疫能力、生长指标、新城疫抗体、血液生化指标、体尺性状的影响。试验选用1日龄鸡200只称重后随机分为5个处理组,每组40只,分别为A组(即42 d全给药组)、B组(即隔天给药组)、C组(即前21 d给药组)、D组(即后21 d给药组)和对照E组(即42 d全饮水组),试验周期为42 d,E组自由饮水,A、B、C和D组在饮水中添加不同浓度的维生素。结果表明,B组、C组和D组鸡较A组、E组鸡的各项指标均有一定程度的提高,但是以B组效果较为明显,说明合理饲喂晶维他复合液体维生素可显著提高鸡的理化特性,但长期过量补充维生素会影响机体发育,降低机体的免疫力。
关键词:复合液体维生素;鸡;免疫器官指数
在散养的条件下,畜禽能够采食大量的青饲料,一般不会出现维生素缺乏的情况。但在现代集约化、高密度的笼养时,随着以生长为主要育种目标的肉鸡育种技术的发展,肉鸡的集约化饲养以及各种环境应激因子导致肉鸡免疫力下降,发病率越来越高[1]。由于肉鸡常用配合饲料原料中维生素含量较低,且不稳定,易受加工、贮藏等外界环境的影响,仅依靠饲料中的天然来源已不能满足动物的需要,会出现维生素缺乏问题,必须补充各种维生素。维生素按其性质可分为脂溶性维生素和水溶性维生素,脂溶性维生素包括维生素A、D、E和K,参与动物体内的多种生化反应,维持机体组织、细胞功能和结构的完整性。维生素 A 是鸡生长发育、生产、视觉及皮肤黏膜完整性不可缺少的一类生物活性物质,是鸡体内多种代谢酶的辅酶和辅基的组成成分,具有促进和调节代谢的重要作用。鸡维生素 A 缺乏症是常见的多发病,蛋鸡更是多发,尤其是在集约化饲养条件下[2]。维生素D和钙对肉鸡具有重要的生理作用, 维生素D可促进Ca吸收和维持Ca平衡,两者联合应用可有效降低骨质疏松、肠和大肠癌的发病率[3]。维生素D是一种类固醇激素,其在血液中稳定活性物质是25-羟维生素D[25(OH)D],主要通过对骨、肾、肠等靶器官的作用来维持钙、磷水平的稳定[4]。脂溶性维生素中除维生素K可由动物消化道合成足够的量外,其他脂溶性维生素都必须从外界摄入。脂溶性维生素对鸡生长、骨骼发育、繁殖、抗应激、提高免疫力、改善蛋壳色泽和强度等各方面都直接或间接地发挥作用。由于维生素A、D、E存在易氧化分解的特性,本试验选自乳化技术研制成的复合液体维生素ADE(又称晶维他)添加在鸡饮水中,以观测其对鸡理化特性的影响,为复合脂溶性维生素在畜牧生产中的科学应用提供参考。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1试验动物及饲粮试验选用健康、体重相近的1日龄鸡200只,称重后随机分为5个处理组,每组40只,试验期42 d。鸡采用涂塑鸡笼饲养。自动控温,试验鸡自由采食,自由饮水,各组的试验条件保持一致。基础日粮组成为(%):玉米52.70、豆粕40.00、葵籽油3.00、石粉1.10、磷酸氢钙1.90、食盐0.37、蛋氨酸0.19、赖氨酸0.05、微量元素预混剂0.50、维生素预混剂0.20。饲料营养水平为(%):代谢能12.71 MJ/ kg,粗蛋白质21.37、钙1.08、总磷0.62、赖氨酸1.25、蛋氨酸0.54。预混料可为每kg日粮提供:铁80 mg,锌80 mg; 锰80 mg,铜8 mg,碘0.35 m g,硒0.15 mg,维生素E 15 IU,维生素K 2.2 mg,维生素B1 1.5 mg,维生素B2 8.0 mg,维生素B6 2.5 mg,维生素B12 0.011 mg,烟酸44 mg,泛酸11 mg,叶酸0.9 mg,生物素0.11 mg,胆碱550 mg。饮水中晶维他按试验设计添加,每1 000 mL晶维他复合液体维生素产品成分为:维生素A 1 300万IU,维生素D3 350万IU,维生素E 3 500 mg,维生素B1 2 000 mg,维生素B6 1 200 mg,维生素C 4 000 mg,维生素K3 800 mg,泛酸钙4 000 mg,精氨酸500 mg,赖氨酸500 mg。
1.1.2饲养管理试验前对鸡舍及周边环境、试验用具进行彻底消毒处理。试验鸡采用单层笼养,试验期内控制温度,湿度,光照和自然通风,在1 d~3 d鸡舍每天23 h光照,温度33℃。之后,鸡舍温度保持24℃恒定不变。自由采食、饮水,按常规免疫程序免疫。
1.1.3试剂和仪器设备印度墨汁,上海钰博生物科技有限公司产品;1.0 g/L Na2CO3溶液;生理盐水;721 分光光度计;电子天平;微量取样器;全自动生化分析仪。
1.2方法
1.2.1生长性能指标每7 d称重,计算试验鸡平均日增重、平均日采食量及料重比。计算公式:平均日增重=(试验期末平均体重-试验期初平均体重)/试验天数平均日采食量=(配料总数-所剩饲料)/(试验天数×每组试验鸡数)
1.2.2免疫器官指数测定在21和42日龄时,分别在每重复组随机抽取1、2只鸡(每处理组共4、8只),称重后屠宰,取胸腺、脾脏和法氏囊称重,测定免疫器官指数。测定公式:免疫器官指数(g/kg)=免疫器官重(g)/体重(kg)。
1.2.3单核-巨噬细胞吞噬指数 应用碳廓清试验方法进行测定。试验进行至21日龄时,从各处理组中选3只体重接近于组内平均体重的肉鸡称重。印度墨汁稀释后,每只鸡翅静脉注射剂量为2 mL/kg。2 min(T2)和10 min(T10)后静脉取血50 μL,按1∶150比例稀释至1.0 g/L Na2CO3溶液中,600 nm波长处测OD值,1.0 g/L Na2CO3溶液为空白对照。取肝脏和脾脏称重,按如下公式计算碳廓清指数K值和吞噬指数a值。
碳廓清指数 K=(lg OD2-lg OD10)/(t2-t1)
吞噬指数 a=体重/(肝重+脾重)×K1/3
其中,OD2表示 2 min 时测得的光密度值;OD10表示 10 min 时测得的光密度值。
1.2.4胫骨特性血清样品的采集及处理:试验第42天,每个处理组中随机抽取6只鸡,翅静脉采血10 mL, 4℃、3 000 r/min离心制备血清,置-20℃保存备用。
胫骨样品的采集及处理:试验第42天,每个处理组中随机抽取6只鸡,摘取左侧胫骨并剔除其上的筋膜、肌肉等组织,保存骨膜和软骨帽完整无损后,分装,置-20℃保存。测胫骨鲜重、长度、直径、体积、脱脂干骨重和胫骨粗灰分。胫骨鲜重:生理盐水清洗,滤纸吸干胫骨表面水分,胫骨称量。
胫骨脱脂重:用骨钳将骨样(未解冻的鲜样)从中间1/2处剪开,使骨髓外露,用脱脂纱布包裹胫骨,浸泡于酒精和苯(2∶1)溶液中96 h,待酒精和苯完全挥发后,放入105℃烘箱中,烘干至恒重,得到胫骨脱脂重。粗灰分含量: 指粗灰分重占脱脂干重的百分比。
1.2.5新城疫抗体检测翅下静脉采血3 mL~5 mL,制成1%的红细胞悬液。生理盐水将抗原倍比稀释至第11孔后,将红细胞悬液加入96孔板(12孔为对照,无抗原),37℃静置30 min后观察结果,选取合适的抗原血凝效价。25 μL生理盐水将血样倍比稀释至第10孔后,将4单位抗原加入96孔板(1至11孔),微量振荡器上振荡2 min,37℃静置30 min,然后在96孔板第1至12孔中分别加入25 μL红细胞悬液,静置30 min,观察结果。
1.2.6血液生化指标测定试验动物空腹翅静脉采血2 mL~3 mL,3 800 r/min离心20 min,制备血清,全自动生化分析仪测定血浆各项生化指标。
1.2.7数据统计与分析采用SPSS19.0软件进行统计学处理,数据用“平均值±标准差”表示,应用ANOVA进行方差分析统计,显著水平为P<0.05。
2结果
2.1肉鸡生长性能的测定
由表1、2可知,B组的日增重、日采食量和肉料比均比其他各组的高,说明B组饲喂方式下鸡摄入的维生素量较合适。由表2可知,B组的鸡生长最好。A组前期生长好,后期由于维生素补充过多,造成维生素中毒,因此至后期体重增长越来越缓慢,生长最差。C组生长情况略优于D组。
2.2鸡免疫器官指数的测定
由表3可知,复合液体维生素对鸡的肝脏指数无显著影响;复合液体维生素对鸡的脾脏指数无显著影响,但B组与E组之间差异显著(P<0.05);复合液体维生素对法氏囊指数有影响,E组与A组、B组、C组之间均差异显著,且法氏囊指数随鸡维生素摄入量的增加而降低。表3说明,复合液体维生素对鸡免疫器官指数有一定程度的影响,但均未达到显著水平。法氏囊是鸟类特有的中枢免疫器官[5]。由表3可知,C组鸡免疫器官发育较好。
表1 复合液体维生素对42 d鸡体重的影响
表2 复合液体维生素对42 d鸡生长性能的影响
表3 复合液体维生素对鸡免疫器官指数的影响
2.3鸡单核-巨噬细胞吞噬指数
A~E组的吞噬指数分别为7.25±0.22、14.05±2.19、10.48±2.10、10.34±0.42、7.99±1.74。由以上数据可知,复合液体维生素对鸡单核-巨噬细胞吞噬指数有显著影响,B组、E组与A组之间存在显著差异(P<0.05)。出现这种现象的原因可能是A组鸡维生素摄入过量,出现一定程度的中毒症状。C组与D组之间无显著性差异。
2.4鸡胫骨特性
由表4可知,B组(隔天组)与其余四组相比,胫骨鲜重、脱脂干骨重、胫骨体积、直径和长度均有明显提高,说明复合液体维生素对鸡胫骨鲜重、脱脂干骨重、胫骨体积、直径和长度均有促进作用。
2.5新城疫抗体检测
A~E组的抗体效价分别为6.44±1.01、7.33±1.32、6.22±1.99、7.67±1.58、7.22±1.20。新城疫病毒属于副黏病毒科中的禽腮腺炎病毒属[6]。由此可知,B组和D组的抗体效价相对较高,说明复合液体维生素ADE提高了B组、D组鸡产生抗体的浓度,提高了鸡的免疫能力。
2.6血液生化指标测定
由表5可知,就谷丙转氨酶而言,A组与B组之间差异显著(P<0.05);B组和E组之间差异极显著(P<0.01)。就谷草转氨酶而言,B组与C组之间差异显著(P<0.05);B组与D组之间差异显著(P<0.05);B组与E组之间差异极显著(P<0.01)。而各组碱性磷酸酶之间没有显著差异。当组织细胞受损时,细胞膜通透性增大,组织中酶释放进入血液导致血清酶活升高[7]。由表5可知,A组鸡组织细胞受损,摄入维生素过量。就乳酸脱氢酶而言,A组与C组之间差异显著(P<0.05);A组与E组之间差异极显著(P<0.01);B组与C组之间差异显著(P<0.05);B组与E组之间差异极显著(P<0.01);D组与E组之间差异显著(P<0.05)。
由表6得知,各组总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比和总胆固醇之间均有差异,但差异不显著。其中,B组白蛋白和总蛋白含量均比其他组高,说明B组鸡摄入维生素的量并未引起鸡的不适,为鸡补充了维生素和氨基酸。研究认为营养不良时,血液总蛋白和白蛋白会降低,本试验中B组鸡摄入维生素量为鸡提供了充足的营养。就尿素而言,A组和C组之间差异显著(P<0.05);A组与E组之间差异极显著(P<0.01)。就尿酸而言,A组与C组之间差异极显著(P<0.01);B组与C组之间差异极显著(P<0.01);B组与D组之间差异显著(P<0.05);C组与D组之间差异极显著(P<0.01);C组与E组之间差异显著(P<0.05);D组与E组之间差异极显著(P<0.01)。
3讨论
3.1复合液体维生素对鸡胫骨特性的影响
体尺性状是动物活体测定的数据,数据准确且操作简单方便,各性状在一定的日龄内比较稳定[8],体尺性状是否可作为家禽体内钙营养状况的反应指标还未见报道,但已有研究表明体尺性状与生产性能、屠体性状等都有很大的相关性[9-11]。药物的剂量是决定疗效的重要条件之一,剂量不同,产生的效果也有差异[12]。大量研究表明:维生素ADE缺乏或过量均会导致动物生产性能下降。Scott M L等[13]指出,过多摄入维生素A的症状之一就是生长速度减慢,体重降低。但A组的胫骨鲜重、脱脂干骨重、胫骨体积、直径和长度均比其他组低,出现这种现象的原因为A组鸡复合维生素摄入量过多,出现一定程度的中毒症状。
表4 复合液体维生素对42 d鸡体尺性状的影响
表5 复合液体维生素对鸡血浆酶活性的影响
表6 复合液体维生素对鸡血浆有机物含量的影响
3.2复合液体维生素对鸡血液生化指标的影响
血清生化指标能反映出动物机体代谢功能等的状态,一般情况下,动物机体自身可以进行自我调节,从而保持其指标的稳定。如果组织细胞的通透性改变或者动物机体的新陈代谢机能改变,将直接导致血液生化指标的改变[14]。ALT、AST主要存在于组织细胞内,且心脏、肝脏中活性最高,是反映肝脏和心脏机能的重要指标[15]。谷丙转氨酶和谷草转氨酶参与机体内转氨基作用,其活性的高低反映了蛋白质合成和分解代谢的状况[16]。在正常情况下,血清中正常转氨酶活性值较小。当组织中毒发生病变或者受损伤的组织范围较大,可引起血清中这两种酶的浓度上升或活性突然持续性增强。由表5可知,A组鸡摄入维生素过量,出现中毒症状。
乳酸脱氢酶(LDH)能可逆的催化乳酸与丙酮酸之间的转化,还是机体抗应激能力的指标。在相同应激作用下,个体 LDH水平越高,表明肌肉代谢水平越高,抗应激能力就越弱[13]。血液ALP活性高低反映了动物的生长状况,因其为具有遗传标记的同工酶,其活性高低可以反映生长速度和生产性能[17]。血清中碱性磷酸酶主要由成骨细胞产生并释放,与骨组织的生长密切相关,一方面反映成骨细胞活性及骨的生成状况,另一方面反映钙、磷代谢情况。 此外,它还参与脂肪代谢,因此碱性磷酸酶活性可部分反映动物的生长状况[18]。由表5可知,A组与C组碱性磷酸酶高于其余各组,说明前期补充维生素对鸡的生长还是具有促进作用的。血清总蛋白含量与机体健康状况密切相关,是衡量机体免疫功能的重要指标。血清总蛋白含量降低表明肝功能发生障碍[19]。由表6可知,B组总蛋白含量最高,E组最低,说明维生素ADE提高了鸡的免疫功能。尿酸(UA)是禽类嘌呤代谢的终产物,其含量的多少与禽肝肾功能正常有直接关系。尿酸含量过高,则肝肾功能异常。由表6可知,C组肝肾功能异常。
本研究中使用的药物晶维他采用自乳化技术研制而成。自乳化药物传递系统是指在胃肠道内或在环境温度(通常指体温37℃)及温和搅拌的情况下乳剂的药物递给方式。通常形成粒径小于5 μm的微乳。目前复合维生素多以固体小颗粒形式掺于基础日粮中,既难保证各维生素之间混合均匀,又难保证基础日粮和复合维生素混合均匀。而晶维他复合液体维生素则克服了这些缺点,复合液体维生素不仅使用方便、吸收好,而且因其使用自乳化技术在体内吸收快。本试验中所饲喂的复合液体维生素均是现用现配,此方法避免了维生素因各种因素所引起的降解以及实验动物摄入量的不准确。饮水中添加复合液体维生素ADE对各组鸡生长性能、免疫器官指数、单核-巨噬细胞吞噬指数、胫骨特性、新城疫抗体、血液生化指标均有不同程度的影响,但以隔天给药效果最明显,说明合理饲喂晶维他可提高鸡的理化特性。
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Effects of Zoo Vita Plus Multivitamin on Physiological and Biochemical Properties of Boilers
LU Jin-xia1, WANG Jin-hui1, ZHOU Qian-yu2, ZHU Xiu-chun3, ZHANG Yu-yan3, ZHOU Xue-zhang1.3
(1.CollegeofLifeScience,KeylabofMinistryofEducationforProtectionandUtilizationofSpecialBiologicalResourcesinWesternChina,NingxiaUniversity,Yinchuan,Ningxia, 750021,China;2.CollegeofAnimalScience,FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou,Fujian,350000,China;3.NingxiaZoohanceBiotechCo,Ltd. ,Yinchuan,Ningxia, 750021,China)
Abstract:This experiment was to study the effects of compound liquid vitamins on immune ability, growth indexes, Newcastle disease antibodies, blood biochemical indexes and body measurements of broilers. 200 one-day old broilers were randomly divided into five groups, each group 40, respectively in group A( taking drug 42 days) and group B(taking drug every other day), group C(taking drug first 21 days), group D (taking drug last 21 days) and normal group E(only drinking water), trial period for 6 weeks. The chicks in A, B, C and D groups were given with Zoo Vita Plus Multivitamin of different concentrations in the water. The results showed that compered to group A and group E, all the indexes in group B, group C and group D were higher, however, these indexes in group B are the best. The results illustrated that long-term vitamin supplements can affect the development of chicks,leading to lower immunity,and proper usage and dosage are recommended.
Key words:compound liquid vitamins; broiler; immune organ indexes
收稿日期:2015-11-30
基金项目:大学生创新项目(2015SK04)
作者简介:卢金霞(1990-),女,河南商丘人,硕士研究生,主要从事营养与免疫调控研究。 *通讯作者
中图分类号:S852.2
文献标识码:A
文章编号:1007-5038(2016)06-0063-05