盐狗脊的质量标准研究

刘铎，鲁建美，张吉仲，吕露阳



盐狗脊的质量标准研究

刘铎，鲁建美，张吉仲，吕露阳

［摘要］目的：建立盐狗脊的质量标准。方法：采用薄层鉴别和水分、灰分及浸出物等方法对盐狗脊进行定性鉴别，采用高效液相色谱法，测定了盐狗脊中原儿茶酸的含量。结果：薄层色谱鉴别等能够很好地鉴别盐狗脊，且专属性较强。结论：所建立的质量控制方法结果准确、操作简便、重复性好，可控制盐狗脊的质量。

［关键词］盐狗脊；质量标准；含量测定

［作者单位］西 南民族大学民族医药研究院，四川 成都 610041

Tel:15008471360 Email:15008471360@163.com

Email:daowen2003@126.com

盐狗脊为蚌壳蕨科植物金毛狗脊Cibotiumbarometz （L.） J.Sm.的干燥根茎。秋、冬二季采挖，除去泥沙，干燥。盐狗脊的炮制方法为将狗脊刮净毛，放入锅中，加盐水拌匀，煮熟至无白心。取出晒至五、六成干，闷软，切薄片，晒干。每100kg狗脊，用食盐3kg。狗脊经炮制后呈不规则长条形或卷缩不规则；切面暗褐色至黑棕色，较平滑，近边缘1-4mm处有一条棕黄色隆起的木质部环纹或条纹，边缘不整齐，偶有金黄色绒毛残留［1］；质坚硬。狗脊经炮制后具有增强补肝肾的作用。《中国药典》中仅收录了烫狗脊［2］，因此，我们对盐狗脊进行了系统的质量标准研究，用以规范盐狗脊的质量标准。

1　实验材料

1.1 仪器

KQ-250DE型数控超声波清洗器 （昆山市超声仪器有限公司）；STI-501型液相色谱仪（杭州赛智科技有限公司）；水浴锅等。

1.2 试药

乙腈为色谱纯（天津科密欧化学试剂有限公司，批号：20100106 ）；四氢呋喃（成都市科龙化工试剂厂，批号：2014092201），甲醇（成都市科龙化工试剂厂，批号：2014102901），乙醇（成都市科龙化工试剂厂，批号：20120306），冰醋酸（成都市科龙化工试剂厂，批号：20090910）均为分析纯，水为高纯水。

1.3 药物饮片

盐狗脊药材分别购于成都康美药业、广西健一药业、成都荷花池药材市场。

2　实验方法与结果

2.1 性状

经炮制后切面呈暗褐色至黑棕色，味咸，有增强补肝肾的功用。

2.2 鉴别

2.2.1 薄层鉴别 取本品粉末2 g，用甲醇50 mL，超声提取30分钟，过滤后蒸干，剩余药渣用1 mL甲醇溶解，作为供试品溶液。另取2 g狗脊药材作为对照，同法制成对照药材溶液。吸取供试品溶液3～6 μL，对照药材溶液4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条状，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（3∶5∶6∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁溶液-1%铁氰化钾溶液（1∶1）（临用配制），放置至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果如下图。

图1 盐狗脊TLC图

2.3 检查

2.3.1 水分 将测定用的盐狗脊破碎成直径不超过3 mm的颗粒或碎片；直径和长度在3 mm以下的可不破碎；通过二号筛用减压干燥法处理。

因狗脊中含有少量挥发性成分，因此采用烘干法进行水分测定。取盐狗脊供试品2～5 g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5 mm；疏松供试品不超过10 mm ；精密称定，打开瓶盖在100～105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5 mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（%）。用此方法分别测定了5批样品，测定结果分别为5.3%、5.7%、12.0%、5.9%、11.7%（见表1）。

2.3.2 总灰分 测定用的药材供试品须粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后，取供试品药材2～3 g（如须测定酸不溶性灰分，可取供试品药材3～5 g），置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01 g），缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算供试品药材中总灰分的含量（%）。2.3.3 浸出物 称取供试品药材约2～4 g，精密称定，置100～250 ml的锥形瓶中，精密加水50～100 ml ，密塞，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足所减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25 ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中、在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品来计算供试品中水溶性浸出物的含量（%）。

表1 盐狗脊水分、总灰分、浸出物、原儿茶酸含量测定结果

2.4 原儿茶酸含量的测定

按中国药典2010年版一部附录VI D，参照“烫狗脊”含量测定方法。

2.4.1 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-1%冰醋酸溶液（5∶95）为流动相；检测波长为260 nm。理论板数按原儿茶酸峰计算应不低于3000。按以上色谱条件进行试验，色谱峰分离条件好。结果如图2。

图2 盐狗脊HPLC图

2.4.2 对照品溶液的制备 取原儿茶酸对照品适量，精密称定，加甲醇-1%冰醋酸溶液（70∶30）混合溶液制成每1 ml含50 μg的溶液，即得。

2.4.3 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-1 %冰醋酸溶液（70∶30）混合溶液25 mL，称定重量，超声处理（功率250 W，频率40 kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-1%冰醋酸溶液（70∶30）混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品按干燥品计算，含原儿茶酸（C7H6O4）不得少于0.020%。测定结果见表1。

3　结果与讨论

文献报道不同产地狗脊中原儿茶酸含量在0.0328%～0.004%之间，相差约8倍［3］，而炮制如砂炒狗脊、酒蒸狗脊、蒸狗脊的原儿茶酸含量均大于炮制前，其中以砂炒狗脊增加得最多，为炮制前的4倍［4］；也有报道炮制前后，狗脊片、烫狗脊片、蒸狗脊片中原儿茶酸含量均值分别为0.028%、0.040%、0.051%，蒸、烫炮制可提高原儿茶酸的含量［5］。可见，狗脊经加热炮制，原儿茶酸含量增加，这可能是加热过程由其苷转化为苷元所至［4］，也可能是大分子鞣质降解所至［6］。这可能也是《中国药典》2010年版仅对烫狗脊制订了含量测定的原儿茶酸限度，但对狗脊药材和饮片狗脊（厚片）并未制订含量测定项的原因。在《中国药典》中没有收录盐狗脊的质量标准，且在《广西壮族自治区中药饮片炮制规范》2007年版中盐狗脊仅收录于熟狗脊项下，因此我们对盐狗脊进行了系统的研究，对盐狗脊的临床应用及质量控制具有重要意义。

感谢四川省食品药品检验所、四川省中药饮片炮制规范制定委员会为本次研究提供经费支持。

［参考文献］

［1］国家药典委员会. 中华人民共和国药典:2010 年版一部［S］.北京: 中国医药科技出版社，2010: 160.

［2］广西壮族自治区食品药品监督管理局. 广西壮族自治区中药饮片炮制规范. 广西科学技术出版社，2007版.

［3］罗瑞，何智建.不同产地狗脊中原儿茶酸和原儿茶醛的含量测定［J］.临床医学工程， 2011，18（7）: 1100-1101.

［4］谢艳，罗瑞，何智建.狗脊炮制工艺的研究［J］.临床医学工程，2011，18（7）:1096-1097.

［5］陈征，李文莉， 童珂.狗脊饮片不同炮制品中原儿茶酸的含量测定［J］.湖南中医药大学学报， 2011， 31（9）: 38-40.

［6］贾天柱，刁秀兰，李军，等.狗脊不同炮制品种鞣质的含量测定［J］.中成药， 2002， 24（1）: 32-34.

（责任编辑：傅舒）

Research on the quality standards of salt processed Gouji

LIU Duo， LU Jian-mei， ZHANG Ji-zhong， LV Lu-yang//（EthnicMedicine Institute， Southwest University for Nationalities， Che gdu 610041，Sichuan）

［Abstract］Objective: To establish quality standard for salt processed Gouji. Method: The TLC and water， ash， and extract detection were performed for the qualitative identification of salt processed Gouji. High performance liquid chromatography （HPLC）method was applied to detect protocatechuic acid in salt processed Gouji. Result: TLC can be used to identify salt processed Gouji with specifity. Conclusion: The established method of quality control is accurate， simple and reproducible which can be used for quality control of salt processed Gouji.

［Key words］Salt processed Gouji； quality standard； content determination

［中图分类号］R283.3

［文献标识码］A

［文章编号］1674-926X（2016）02-009-03

［作者简介］刘 铎，男，硕士生，研究方向：中药、民族药的制剂研究

［通讯作者］张 吉仲，男，副教授，从事中药及民族药复方药理及疾病动物模型研究

［收稿日期］2015-12-30