张 婷李 洁(河北师范大学生命科学院,河北 石家庄 050024;2河北民族师范学院,河北 承德 067000)
山杏壳木醋液对三种食用菌菌丝生长的影响
张 婷1李 洁2*
(1河北师范大学生命科学院,河北 石家庄 050024;2河北民族师范学院,河北 承德 067000)
摘 要:以滑子菇、灵芝、香菇三种食用菌为材料,研究了山杏壳木醋液对食用菌菌丝生长的影响。结果表明:山杏壳木醋液对三种食用菌菌丝生长的影响不同。固体培养时,促进滑子菇菌丝生长的最适山杏壳木醋液浓度为0.025%;促进灵芝菌丝生长的最适山杏壳木醋液浓度为0.1%;而香菇菌丝生长受山杏壳木醋液的抑制;液体培养时,山杏壳木醋液对三种食用菌菌丝生长均表现为抑制。研究结果将为木醋液在食用菌产业上的应用提供参考数据。
关键词:山杏壳木醋液;食用菌;菌丝生长;固体培养;液体培养
我国是世界最大的食用菌生产国,产量占世界总产量70%以上。经过30余年的快速发展,食用菌产业已经成为农业和农村经济的支柱产业,在为农业增效、农民增收发挥着重要作用。因此,提高食用菌产量,保障食用菌安全是食用菌产业可持续发展的目标。然而,为了提高食用菌的产量,减少病害损失,农药和化肥也已经在食用菌生产中大量使用。这不仅影响食用菌品质,而且污染食用菌产地环境,影响人体健康。因此,寻找纯天然、无毒、无污染的绿色产品,替代化肥、农药,是保障食用菌安全、促进食用菌产业可持续发展的重要途径之一。
木醋液也叫植物酸,是木材经过炭化后产生的烟经冷凝后收集到的具有熏臭味的赤褐色液体[1-2],其中含有机酸类、酚类、醇类等多种有机化合物[3]和钙钾铁钠镁等多种微量元素。近年来的研究发现,木醋液安全无污染,且具有消毒、杀菌、除虫、除臭等作用,在日本、韩国及美国等广泛应用于农业、畜牧业、医药卫生等行业,可作为植物生长促进剂、土壤改良剂、抗菌剂、杀虫剂、驱避剂、消臭剂、饲料添加剂、有机肥发酵剂来使用。我国对木醋液的研究和应用起始于20世纪80年代末期,主要作为肥料用于农作物和蔬菜生产,具有促进植物生长、增强植物抗逆性、提高作物产量的作用。随着人们对食品安全的重视,绿色食品、有机食品成为人们追逐的新宠。木醋液作为天然农业生产资料,不会造成环境污染,而且精制木醋液对人畜无毒副作用,是化肥、农药的理想替代品。山杏壳木醋液是山杏壳生产活性炭过程中的副产品,目前国内主要作为叶面肥使用。为了拓展山杏壳木醋液的使用范围,明确山杏壳木醋液对食用菌生长的影响,我们以滑子菇、灵芝、香菇三种食用菌为实验材料,在培养基中加入纯植物源的山杏壳木醋液,采用固体平板培养和液体培养方式,通过测量固体平板中菌落的直径[8-13]及液体培养中菌丝干重[14],研究不同浓度山杏壳木醋液对三种食用菌菌丝生长的影响,力求找到促进食用菌菌丝生长的最适山杏壳木醋液浓度,探讨山杏壳木醋液作为食用菌肥料的可能性,以及针对不同食用菌的最佳施用量,为山杏壳木醋液在食用菌生产过程中的应用和大面积推广提供科学依据。
1.1仪器
仪器:电子天平、立式高压蒸汽灭菌器、超净工作台、隔水式恒温培养箱、恒温振荡器、电热恒温鼓风干燥箱、微波炉。
1.2材料
山杏壳木醋液由河北绿天生物科技有限责任公司提供;滑子菇、灵芝、香菇由平泉希才应用菌研究所提供。
1.3方法
1.3.1固体平板培养
用已灭菌的打孔器打孔,将活化好的菌种转接到添加有不同浓度山杏壳木醋液的PDA固体培养基中,在26℃恒温培养箱进行培养。根据各食用菌菌丝生长情况,从培养的第3天或第4天开始,以十字交叉法测量菌落直径,并记录数据。
1.3.2液体培养
将活化好的液体菌种转接到添加有不同浓度山杏壳木醋液的液体培养基中进行培养。在26℃、120r/ min的恒温振荡器中培养,一天后转速改为140r/min。根据各食用菌生长情况,培养10天左右,将菌液过滤烘干后称重,并记录数据。
2.1山杏壳木醋液对三种食用菌菌丝生长的影响
将活化的滑子菇、灵芝和香菇菌种分别接入山杏壳木醋液浓度为0%、0.05%、0.1%的PDA固体培养基中,记录菌丝生长情况,计算菌丝生长速率,见图1。
由图1可见,在固体培养基中添加山杏壳木醋液后,对三种食用菌菌丝生长影响不同。在一定浓度范围内,山杏壳木醋液对滑子菇、灵芝具有促进作用,而对香菇则有抑制作用。滑子菇表现为在山杏壳木醋液添加量为0.05%时,生长速率较对照提高14.5%,添加量为0.1%时,生长速率下降,基本与对照持平;灵芝菌丝生长则表现为随添加山杏壳木醋量增加,生长速率加快,在山杏壳木醋液添加量为0.05%时,生长速率较对照提高11.4%,添加量为0.1%时,生长速率提高54.5%;而香菇菌丝生长表现为山杏壳木醋液添加量为0.05%时,生长速率较对照下降10.7%,添加量为0.1%时,生长速率下降22.6%。
2.2山杏壳木醋液促进滑子菇菌丝生长的最适浓度
为了找出促进滑子菇生长的最适山杏壳木醋液浓度范围,将固体培养基中山杏壳木醋液浓度分别设置为0%(对照)、0.0125%(1组)、0.025%(2组)、0.05%(3组)、0.075%(4组)五个浓度,接入活化好的菌种进行培养,记录菌落直径,实验结果见图2。
由图可见,山杏壳木醋液浓度在0.0125%(1组)、0.025%(2组)、0.05%(3组)均可促进滑子菇菌丝生长,当山杏壳木醋液浓度为0.025%时,滑子菇菌丝生长最快,效果最好。说明山杏壳木醋液浓度较低时会促进滑子菇菌丝的生长,在一定范围内随着山杏壳木醋液浓度的增大,促进效果越来越明显,超过一定浓度范围后,促进效果减弱直至表现为抑制。这一结果与生长调节剂的作用原理相一致, 推测山杏壳木醋液可能作为一种生长调节剂发挥作用。
2.3山杏壳木醋液促进灵芝菌丝生长的最适浓度
为了探讨山杏壳对固体培养灵芝的影响,将山杏壳木醋液浓度设为0%、0.05%、0.10%、0.20%、0.30%五个浓度。实验结果见图3。
由图3可知,山杏壳木醋液对灵芝菌丝生长影响较大,浓度为0.05%、0.10%、0.20%、0.30%时均可促进灵芝菌丝生长。当木醋液浓度小于0.10%时,随着浓度的增加促进效果更明显,而当浓度大于0.10%时,随着木醋液浓度的增加,促进效果逐渐减弱,但仍然高于对照组。比较结果显示,山杏壳木醋液浓度为0.05%、0.10%、0.20%、0.30%,培养第9d时,菌落直径分别是对照组的1.11倍、1.12倍、1.04倍和0.19倍,可见山杏壳木醋液浓度为0.05%、0.10%时,对灵芝菌丝生长促进作用较好,灵芝菌落直径最大的山杏壳木醋液浓度为0.10%。由此进一步推断,山杏壳木醋液可能作为一种生长调节剂影响灵芝菌丝的生长。
2.4山杏壳木醋液对液体培养食用菌菌丝生长的影响
为了探讨液体培养条件下,山杏壳木醋液对滑子菇、灵芝食用菌菌丝生长的影响,将山杏壳木醋液浓度设为0%、0.05%、0.10%,实验结果见表1。
表1 木醋液对滑子菇、灵芝菌球生长的影响
由表1得出,无论是滑子菇还是灵芝,当培养基中加入山杏壳木醋液均抑制菌丝的生长,且木醋液浓度越大抑制作用越明显。进一步研究,将木醋液浓度调整为0%、0.01%、0.03%三个浓度,同样都抑制两种食用菌的生长。从滑子菇液体培养来看,浓度越大越抑制生长,而0.01%与0.03%两个浓度对灵芝生长的抑制效果相当,不能得出实质性的结论。因此,关于木醋液对液体培养的滑子菇和灵芝生长的影响情况,有待于进一步研究。
木醋液作为无毒、无害、无残留的纯天然植物生长调节剂,除了能够促进植物生长外,还能促进食用菌的生长。Yoshimuya、村尾胜、张利军、王稳等人采用不同的培养方式研究了木醋液对食用菌生长的影响[5-6]。王稳等将不同质量浓度的木醋液加入食用菌的培养基(锯屑) 中,对食用菌菌丝体、子实体的生长具有促进作用。添加适宜浓度的木醋液能促进菌丝生长,而高浓度木醋液则抑制菌丝生长。我们研究显示,适量的木醋液对固体培养的食用菌菌丝的生长有一定的促进作用。不同食用菌菌丝生长需要的最适木醋液浓度不同,促进滑子菇菌丝生长的最适木醋液浓度为0.025%,促进灵芝菌丝生长的最适木醋液浓度为0.10%。当木醋液浓度为0.10%时,促进灵芝菌丝的生长,而抑制滑子菇的生长,与王稳等的试验结果相似。但是,对香菇菌丝生长而言,与对照相比较,添加0.05%和0.1%的木醋液对香菇菌丝生长均表现为抑制,这与倪淑君[7]的0.05%木醋液促进香菇菌丝生长的结果不同,推测可能与香菇品种、生长状态等有关,原因有待进一步探讨。滑子菇促进菌丝生长的最适浓度低于灵芝,说明滑子菇较灵芝对木醋液更为敏感。推测可能不同食用菌品种对木醋液的反应不同。研究还发现,液体培养时,木醋液浓度为0.01%、0.03%、0.05%和0.10%时均抑制滑子菇、灵芝菌丝的生长。推测山杏壳木醋液对食用菌菌丝生长的影响可能与食用菌品种、培养条件有关,其机理尚需进一步研究。
综上所述,山杏壳木醋液对食用菌菌丝生长有影响,食用菌品种不同,促进其菌丝生长的最适木醋液浓度不同;培养方式不同,山杏壳木醋液对食用菌菌丝生长的影响也不同。这些研究结果将为木醋液作为食用菌肥料的研究和应用提供参考数据。
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Effects of Armeniaca Sibirica Shell Wood Vinegar on Hyphal Growth of Three Kinds of Edible Fungi
ZHANG Ting1,LI Jie2
(1.School of Life Sciences, Hebei Normal University, Shijiazhuang, Hebei 050024; 2. Hebei Normal University for Nationalities, Chengde, Hebei 067000,China)
Abstract:With three kinds of edible fungi slider mushroom, ganoderma lucidum, and lentinus edodes as material, the article studies the effects of different concentrations of armeniaca sibirica shell wood vinegar on the hyphal growth of edible fungi. The results show that effects of armeniaca sibirica shell wood vinegar on the hyphal growth of three kinds of edible fungi are different. In solid culture, the optimum armeniaca sibirica shell wood vinegar concentration for the slider mushroom hyphal growth is 0.025%; the optimum concentration for the ganoderma lucidum hyphal growth is 0.1%; and wood vinegar has an effect of inhibition for the hyphal growth of lentinus edodes. In liquid culture,armeniaca sibirica shell wood vinegar shows the effect of inhibition for the hyphal growth of all three kinds of edible fungi. The results provide data for the application of wood vinegar in the edible fungi industry.
Key words:armeniaca sibirica shell wood vinegar; edible fungi; hyphal growth; solid culture; liquid culture
中图分类号:Q94
文献标识码:A
文章编号:2095-3763(2016)01-0122-05
收稿日期:2016-01-08
作者简介:张婷(1992-),女,河北石家庄人,河北师范大学生命科学院2015级研究生,主要从事应用微生物研究。
*通讯作者:李洁(1962-),女,河北承德人,河北民族师范学院科研处处长、生物与食品工程学院院长,教授,研究方向为植物生理生化。E-mail:lijie0651@163.com.
基金项目:承德市财政局应用技术研究与开发项目(No.CZ2014002)。