彝药“金基痹痛舒”合剂的抗炎镇痛作用及急性毒性研究

景明 郭佳 贾延涛 张竣 袁长春 林家猛

【摘要】目的：观察彝药“金基痹痛舒”合剂的抗炎、镇痛作用及急性毒性。方法：采用大鼠足跖注射鸡蛋清导致炎症肿胀模型评价“金基痹痛舒”合剂的抗炎作用；采用小鼠腹腔注射冰醋酸导致扭体反应方法考察“金基痹痛舒”的镇痛作用；对小鼠经口给药的“金基痹痛舒”合剂的急性毒性进行检测。结果：彝药“金基痹痛舒”合剂30g生药/kg和10g生药/kg组均能够明显抑制大鼠足趾注射10%鸡蛋清导致的炎症肿胀；“金基痹痛舒”合剂 75g生药/kg和25g生药/kg组对醋酸致小鼠扭体反应均有明显的缓解作用；急性毒性研究结果表明，“金基痹痛舒”合剂经口给药的小鼠最大给药量为202.5g生药/kg体重，按成人常用量计算，相当于成人常用量的150倍。结论：彝药“金基痹痛舒”合剂具有显著的抗炎镇痛作用，在常规剂量下使用是安全的。

【关键词】彝药； “金基痹痛舒”合剂； 抗炎； 镇痛； 急性毒性

【中图分类号】R29【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2016）09-0020-02

发源于少数民族地区的民族医药是中国传统医药的重要组成部分，其中彝药因其鲜明的地域性、民族传统和独特的医药理论更是备受瞩目。“金基痹痛舒”合剂为笔者根据在云南彝族聚居地区行医多年的临床用药经验，总结归纳得到的用于治疗类风湿性关节炎、腰痛等疾病取得显著疗效的彝药方剂，本研究对该合剂的抗炎镇痛作用及急性毒性进行了考察，现将结果报道如下。

1材料与方法

1.1实验动物及饲养条件SD大鼠，体重180～220g，雄性（由成都达硕生物科技有限公司提供，许可证：SCXK（川）2013-24，批号：0018491）；昆明种雄性小鼠，18～22g，共70只（购于北京华阜生物科技股份有限公司，合格证号为SCXK（京）2014-0004，批号为11401300027997）。所有动物饲养于云南中医学院实验动物观察室，室内光照为自然昼夜交替，温度为15～25℃，相对湿度为45%～65%，通风良好，环境相对安静。饲料为实验鼠配合饲料，自由摄食及饮水。

1.2药品、试剂及仪器“金基痹痛舒”合剂，由云南省玉溪市中医院药剂科提供；阿司匹林肠溶片：湖南新汇制药股份有限公司，批号：150208；冰乙酸：天津致远化学试剂有限公司，生产许可证：XK13-201-00121，批号：20121008；生理盐水：昆明南疆制药有限公司，批号：A150604E2；足趾容积测量仪：山东省医学科学院设备站，YLS-7A，出厂编号：005090071；分析天平：北京赛多利斯仪器系统有限公司，ISO9001，0.0001g。

1.3受试样品制备“金基痹痛舒”合剂：临床成人日剂量为每次87.6ml，一日三次，每毫升药液相当于生药0.36g（按70kg/人，即1.35g/kg体重）。取4050ml药液，浓缩至5.06g生药/ml浓度（506.25g生药/100ml）的浓缩液288ml，临用前用蒸馏水稀释至所需给药浓度。

1.4分组及给药剂量

1.4.1“金基痹痛舒”合剂对蛋清液致大鼠足趾肿胀[1]的影响取40只雄性SD大鼠依照随机数字表随机分为模型组（0.9%生理盐水），阳性对照组（0.2g/kg），金基痹痛舒高剂量组（30g生药/kg）和低剂量组（10g生药/kg）。各组大鼠按上述分组连续灌胃给予相应受试物10天，末次给药1h后于大鼠右后足掌心向踝关节方向皮下注射10%鲜蛋清0.lml，在注射蛋清致炎前、注射蛋清致炎后的30min、1h、2h、3h、4h、5h分别测量足趾容积，将致炎后的足趾容积减去致炎前足趾容积即为足跖肿胀度，并计算足趾肿胀抑制率。

足趾肿胀抑制率（%）=（模型组足趾肿胀率-给药组足趾肿胀率）/模型组足趾肿胀率×100%

1.4.2“金基痹痛舒”合剂对腹腔注射冰醋酸致小鼠扭体反应[2]的影响取昆明种雄性小鼠48只，于实验前一天随机分为4组，每组12只，分别为模型组（0.9%生理盐水）、阳性对照组（阿司匹林，0.2g/kg）、“金基痹痛舒”高剂量组（75g生药/kg，下称“金高”）、金基痹痛舒低剂量组（25g生药/kg下称“金低”），按0.2ml/10g体重连续灌胃给药7天，末次给药后1h，腹腔注射0.6%冰醋酸，0.1ml/10g体重，分别记录给冰醋酸后0～5min，6～20min内各组小鼠扭体次数，比较各给药组与阴性对照组小鼠扭体次数的差异。

1.4.3“金基痹痛舒”合剂小鼠经口给药的急性毒性经预试验，“金基痹痛舒“合剂浓缩液在最大浓度、最大灌胃体积下灌胃给予小鼠，动物无死亡，故进行最大给药量的测定。取合格昆明种小鼠40只，雌雄各半，按体重随机分为给药组和阴性对照组，每组20只。试验前禁食不禁水12小时，给药组灌胃给药剂量为202.5g生药/kg体重，给药体积为0.4ml/10g体重，阴性对照组给予等体积的生理盐水。给药后连续观察14天，每天观察各组动物的外观、行为和毒性反应，记录动物第1、3、5、7、9、11、13、14天的体重，结果见表3；记录动物第3、7、11天的进食量，结果见表4。试验第14天处死、解剖小鼠，肉眼观察其主要脏器的外观。

1.5统计学处理方法数据用均数±标准差（x±s）表示，符合正态分布且方差齐的数据进行单因素方差分析；方差不齐的数据则用非参数检验。P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1“金基痹痛舒”合剂对蛋清液致大鼠足趾肿胀的影响本研究结果显示，与模型组比较，致炎后30min、1h、2h、3h、4h、5h，阳性对照药阿司匹林后对皮下注射鸡蛋清所致大鼠足趾肿胀度均有显著的抑制作用，与模型组相比，差异有统计学意义（P<0.01）；“金高”在致炎后30min、2h、4h、5h对该模型大鼠足跖肿胀度均有显著的抑制作用，与模型组相比，差异有统计学意义（P<0.01 或P<0.05）；“金低”在致炎后30min、1h、2h、3h、4h和3h对该模型大鼠足跖肿胀度均有显著的抑制作用，与模型组相比，差异有统计学意义（P <0.01或P<0.05），详见表1。[JP]

2.2[JP3]“金基痹痛舒”合剂对腹腔注射冰醋酸致小鼠扭体反应的影响本研究结果显示，“金基痹痛舒”合剂对腹腔注射0.6%冰醋酸所致小鼠扭体反应具有明显的对抗作用，见表2。[JP]

2.3“金基痹痛舒”合剂小鼠经口给药的急性毒性实验结果显示，给药后4h内各给药组偶见动物出现昏睡，易被警醒而恢复正常活动，但未见死亡。给药后14日内，动物未见死亡，一般状况良好，饮食、二便正常，且外观、皮毛、行为、呼吸均正常，鼻、眼、口腔无异常分泌物，未见其它明显异常反应。给药组与对照组的体重增长变化趋势基本一致，给药后进食量基本稳定。实验结束后大体解剖观察主要脏器，各组小鼠的心、肝、脾、肺、肾均无明显异常。金基痹痛舒合剂浓缩液的最大给药量为202.5g生药/kg，按成人（70kg体重）临床用量每天94.6g计算，金基痹痛舒的小鼠最大给药量为成人临床用量的150倍。见表3、4。

3讨论

由于历史等原因，彝族人民大多生活在高寒山区，类风湿性关节炎是彝族民间常见疾病，彝医在与类风湿性关节炎作斗争的过程中，总结了很多行之有效的药方。“金基痹痛舒”合剂为笔者根据在云南彝族聚居地区行医多年的临床用药经验，总结归纳得到的彝族药方，其在类风湿性关节炎的治疗中具有显著的消肿止痛作用，临床疗效确切，但其功效尚缺乏实验室研究数据的支撑，为了更科学、合理并安全的将“金基痹痛舒”合剂用于临床，本实验对其抗炎、镇痛作用及小鼠经口给药的急性毒性情况进行了研究，结果显示，“金基痹痛舒”合剂对皮下注射鸡蛋清所致大鼠足趾肿胀具有显著的抑制作用，表明其具有较强的抗炎作用；由于该合剂临床主要用于治疗炎症性疼痛，因此，本实验采用醋酸腹腔注射致小鼠扭体反应的方法对其进行了镇痛作用研究，结果表明，“金基痹痛舒”合剂具有显著减轻炎症性疼痛作用；“金基痹痛舒”合剂小鼠经口给药的急性毒性研究结果显示，“金基痹痛舒”合剂202.5g生药/kg体重（相当于临床用量的150倍）时未见明显毒性，提示，该药在常规剂量下使用是安全的。对于“金基痹痛舒”合剂的抗炎作用机制还有待进一步深入的研究。

参考文献

[1]白蓉，郭延伟.独一味中苯乙醇苷提取物的镇痛抗炎作用及毒性研究[J].华西药学杂志，2015，30（3）：384-385.

[2]陈奇.中药药理研究方法学[M].2版.北京：人民卫生出版社，2006.

（收稿日期：2016.03.20）