段卫华 于佳慧 高秀梅
【摘要】目的:观察中药杜仲、续断药对配伍前后对于SAMP6小鼠脂代谢的影响。方法:采用快速老化SAMP6小鼠及其同源正常对照SAMR1为研究对象,应用杜仲续断1∶[KG-*3/5]1配伍及单味药进行治疗12周,观察血清和肝脏的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白等指标变化,并进行组间比较。结果:与模型组相比,杜仲续断1∶[KG-*3/5]1配伍低剂量组能显著降低血清低密度脂蛋白,升高血清高密度脂蛋白,显著降低血清和肝组织的LDL-C水平,升高血清HDL-C水平,降低肝组织中HDL-C水平。结论:杜仲续断药对具有调节脂质代谢的作用。
【关键词】杜仲;续断;配伍;衰老;SAMP6小鼠;脂代谢
【中图分类号】R285.5【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2016)09-0014-02
根据《中国人口老龄化发展趋势预测研究报告》预测,到2020年我国老年人口将达到2.48亿。随着社会人口的老龄化,老年性骨质疏松症、老年性学习记忆受损及AD等与衰老相关疾病发病率明显增高,严重影响老年人的生活质量和健康水平。随着增龄,血脂异常患病率增高[1],除氧化脂质除诱发动脉粥样硬化外,较高的血清总胆固醇水平是老年人AD患病率增加的危险因子[2-3]。与此同时,伴高脂血症的骨质疏松患者存在由氧化脂质诱导的骨PTH抵抗[4],骨形成减少。杜仲与续断配伍是中医临床常用药对,虽然对于单味药研究较多,但对于二者配伍的研究报道较少。研究以快速老化SAMP6及其同源正常对照SAMR1小鼠为研究对象,观察杜仲和续断配伍前后对动物模型的血液和肝脏中脂代谢主要生化指标的影响,为中药配伍理论和中医临床提供实验依据。
1仪器与材料
1.1实验动物6月龄清洁级雄性快速老化骨质疏松模型小鼠SAMP650只,正常同源对照小鼠SAMR110只,均购自天津中医药大学第一附属医院实验动物中心SAM鼠繁育屏障系统,合格证号为实验动物(饲)字0003499。
1.2药品及其制备杜仲、续断生药购自安国市顺全隆中药材有限公司,由天津中医药大学中药鉴定教研室马琳教授鉴定。杜仲生药、续断生药分别用70%乙醇10倍量回流提取2次,每次2h,合并提取液浓缩,真空干燥得杜仲、续断提取物。按照上述提取方法,杜仲续断按照生药量1:1比例配伍,制备杜仲续断配伍提取物。
1.3仪器VITALAB MTCRO半自动生化仪(荷兰威图公司)。
1.4试剂总胆固醇测定试剂盒(TC,批号:111271)、甘油三酯测定试剂盒(TG,批号:114951)、低密度脂蛋白-胆固醇测定试剂盒(LDL-C,批号:110421)、高密度脂蛋白-胆固醇测定试剂盒(HDL-C,批号:110431),以上试剂盒均由北京中生北控生物科技股份有限公司生产。
2方法
2.1分组及给药正常老化对照SAMR1组10只,SAMP6小鼠按照体重随机分为SAMP6组、配伍高剂量组、配伍低剂量组、杜仲组、续断组5组,每组10只。SAMR1组和SAMP6组分别灌服蒸馏水;配伍高剂量组:灌服配伍提取物(每日杜仲、续断各用3g生药/kg);配伍低剂量组:灌服配伍提取物(每日杜仲、续断各用1.5g生药/kg);杜仲组和续断组:分别灌胃杜仲、续断提取物(每日用药剂量均为3g生药/kg)。各组每日灌胃1次,连续给药12周。实验期间自由饮水摄食。每周称量1次体重,根据体重变化调整给药量。
2.2标本采集与处理
2.2.1血清脂质检测用药治疗第12周末,所有小鼠禁食不禁水8h,末次灌胃给药lh后,乙醚吸入麻醉,摘眼球取血,分离血清,按照试剂盒要求检测TC、TG、LDL-C、HDL-C。
2.2.2肝脏脂质检测取血后迅速取出肝脏,匀浆,离心取上清液,按照试剂盒要求检测TC、TG、LDL-C、HDL-C。
2.3统计学分析采用SPSS17.0统计软件分析实验数据,用均数±标准差(x±s)表示,采用单因素方差分析(One-WayANOVA),方差齐采用LSD法,方差不齐采用Dunnett′s T3法比较,进行组间两两比较,P<0.05表示差异有统计学意义。
3结果
3.1杜仲续断药对不同配比对SAMP6小鼠血清脂质的影响SAMP6组小鼠血清LDL-C水平显著高于SAMR1组(P<0.05)。灌胃给药12周,配伍低剂量组和杜仲组小鼠血清LDL-C水平显著低于SAMP6组(P<0.05),配伍低剂量组小鼠血清HDL-C水平显著高于SAMP6组,配伍低剂量组的HDL-C/TC有升高趋势。见表1。
3.2杜仲续断药对不同配比对SAMP6小鼠肝组织脂质的影响SAMP6组肝组织LDL-C,HDL-C,HDL-C/TC均显著高于SAMR1组(P<0.01,P<0.05)。经治疗12周后,配伍低剂量组肝组织TG显著低于SAMP6组(P<0.01),配伍低剂量组和杜仲组肝组织LDL-C显著低于SAMP6组(P<0.05,P<0.01),配伍高、低剂量组和杜仲组肝组织HDL-C显著低于SAMP6组(P<0.01,P<0.05),配伍高剂量组和配伍低剂量组肝组织HDL-C/TC显著低于SAMP6组(P<0.01,P<0.05)。见表2。
4讨论
中医并无高脂血症的病名,认为其病因病机与痰浊、瘀血等有关,肝脾肾虚衰,致痰瘀内生,以脏虚为本,特别是肾虚,痰浊瘀血内阻为标,属本虚标实之证[5]。《景岳全书》云:“肾主水,水泛亦为痰。故痰之化无不在脾,痰之本无不在肾”。临床治疗高脂血症杜仲、续断为常用补肾中药,均具有补肝肾,强筋骨,安胎等功效。药理研究表明,杜仲和续断均具有抗骨质疏松、神经保护、调节血脂、抗衰老等多种药理作用[6-8]。SAMP6小鼠为快速自发老年性骨质疏松模型,且血糖、甘油三酯、胰岛素水平、瘦素水平、肝脂质水平均高于同龄SAMR1和AKR/J小鼠,并具肥胖症和高脂血症[9]。
研究发现,与SAMR1组相比,SAMP6小鼠血清LDL-C显著升高,肝组织LDL-C、HDL-C、HDL-C/TC显著升高。经给药治疗后,配伍低剂量组和杜仲组小鼠血清LDL-C水平显著低于SAMP6组。配伍低剂量组小鼠血清HDL-C水平显著高于SAMP6组,HDL-C/TC有升高趋势。配伍低剂量组肝组织TG和LDL-C、杜仲组肝组织LDL-C均显著低于SAMP6组,配伍高、低剂量组和杜仲组肝组织中HDL-C水平显著低于SAMP6组。研究结果表明,杜仲续断配伍后能显著降低血清和肝组织的LDL-C水平,升高血清HDL-C水平,降低肝组织中HDL-C水平,提示杜仲续断配伍使用可调节血脂水平,具有提高机体转运和清除胆固醇的能力,调节脂质代谢的作用。
参考文献
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(收稿日期:2016.03.17)