FQ-PCR法对丙肝病毒RNA载量、抗-HCV、ALT异常的相关性探讨

宋予娟新乡市第一人民医院检验科，河南新乡　453000



FQ-PCR法对丙肝病毒RNA载量、抗-HCV、ALT异常的相关性探讨

宋予娟
新乡市第一人民医院检验科，河南新乡453000

[摘要]目的应用FQ-PCR法观察丙肝病毒RNA载量、抗-HCV、ALT异常之间相关性。方法整群选择该院2012年7月—2015年7月收治95例丙型肝炎病毒感染患者作为研究对象，分别进行抗-HCV抗体、丙氨酸转氨酶（ALT）检测，计算HCV-RNA阳性率、抗-HCV阳性率、ALT异常率。结果95例患者中HCV-RNA阳性率为64.2%（61/95），抗-HCV阳性率为69.5%（66/95）。抗-HCV阳性率随HCV-RNA载量的增加而升高，二者呈正相关。95例患者中ALT异常率为50.5%（48/95），且异常率随HCV-RNA载量的增加而升高，二者呈正相关。结论FQ-PCR法在丙型肝炎检测中的应用显示HCV-RNA载量与抗-HCV及ALT浓度之间均有明显相关，可作为重要检测手段应用于该病临床诊断及预后判断。

[关键词]丙肝病毒；FQ-PCR法；抗-HCV；ALT

我国丙型肝炎病毒（HCV）感染率约为2.5%～4.9%，极易发展为慢性丙型肝炎，严重者会进一步转化为肝硬化或肝癌[1]，对患者生命安全造成严重威胁。免疫酶联吸附试验（ELISA）为血清丙肝病毒抗体（Anti-HCV）最常见检测方法，临床应用广泛，但该法存在一定假阳性与假阴性[2]。随着近年荧光定量聚合酶链反应（FQPCR）检测技术的出现及广泛应用，临床逐渐应用其进行丙肝病毒的诊断及疗效观察。该文以该院2012年7月—2015年7月间收治丙型肝炎病毒感染患者为例，应用FQ-PCR法观察丙肝病毒RNA载量、抗-HCV、ALT异常之间相关性，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

整群选择该院收治的95例丙型肝炎病毒感染患者作为研究对象，男63例、女32例，年龄19～71岁，平均（38.4±5.5）岁。

1.2方法

抽取2 mL的EDTA-K2抗凝外周静脉血并分离，取100 μL血清用真空负压膜提取法提取总RNA，逆转录步骤及PCR反应体系配比遵照说明书进行，每次实验均设阴性、阳性对照品。HCV-RNA载量＜1000拷贝/mL血清为正常。①抗-HCV抗体检测：ELISA法测定，根据说明书操作，阴性对照OD平均值×2.1为临界值，样本所测结果大于或等于临界值为阳性。②丙氨酸转氨酶（ALT）：全自动生化分析仪进行分析，低于40 U/L为正常。

2　结果

2.1HCV-RNA载量与抗-HCV阳性率之间关系分析

95例患者中HCV-RNA阳性率为64.2%（61/95），抗-HCV阳性率为69.5%（66/95）。抗-HCV阳性率随HCV-RNA载量的增加而升高，差异有统计学意义（r= 0.941，P＜0.05），呈正相关，见表1。

表1　HCV-RNA载量与抗-HCV阳性率关系[n（%）]

2.2HCV-RNA载量与ALT异常率的关系分析

95例患者中ALT异常率为50.5%（48/95），且异常率随HCV-RNA载量的增加而升高，差异有统计学意义（r=0.823，P＜0.05），呈正相关，见表2。

表2　HCV-RNA载量与ALT异常率关系

3　讨论

丙型肝炎发病呈全球性流行，其发病率虽低于乙型肝炎，但危害更大。早期发现并准确诊断HCV感染并实现丙型肝炎传染源防控为阻断病毒传播最有效手段[3-4]。

人体感染HCV后一般血清在15个月内就会形成抗-HCV，而外周血中HCV-RNA的检出为HCV复制活跃的可靠指标，感染2周内即可检出[5]。该研究应用FQ-PCR法探析丙肝病毒RNA载量、抗-HCV及ALT异常之间相关性，结果显示HCV-RNA阳性率为64.2%（61/95），抗-HCV阳性率为69.5%（66/95），ALT异常率为50.5%（48/95），且抗-HCV阳性率与ALT异常率之间均呈现正相关，因此该研究认为HCV-RNA载量偏高可作为丙型肝炎发病预测指标。

此外，61例HCV-RNA阳性患者中有4例抗-HCV阴性病例，推测原有以下几点[6]：①患者处于抗HCVIgG窗口期，由于窗口期时间较长可达3个月左右，因此出现此时尚未形成抗体的情况；②机体免疫功能低下，无法产生免疫应答；③HCV基因异原性高。而HCV-RNA阳性率低于抗-HCV阳性率的原因则可能为[7]：①自然界存在大量RNA降解酶，以致假阴性的出现；②患者采取过抗病毒治疗等因素有关，血清中HCV-RNA载量未达到最低检测量；③机体HCV病毒己被清除，HCV-RNA即时显示为阴性，而抗体会继续持续存在一段时间。另外，研究还显示HCV-RNA载量与ALT浓度之间也存在明显正相关，提示丙型肝炎患者血清ALT浓度可作为体内HCV状态的间接反映指标，而HCV-RNA水平则间接反映肝细胞炎性损伤程度。

综上所述，FQ-PCR法在丙型肝炎检测中的应用显示HCV-RNA载量与抗-HCV及ALT浓度之间均有明显相关，可作为重要检测手段应用于该病临床诊断及预后判断。

[参考文献]

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[3]白旭华,潘品良,毛玮,等.静脉吸毒人群中血浆抗-HCV EIA法、WB法与HCV RNA荧光定量PCR法比较[J].中国输血杂志,2009,22（4）:300-301.

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Observation on the Correlation of Hepatitis C Virus RNA Load and Anti-HCV and ALT Abnormal by FQ-PCR Method

SONG Yu-juan
Clinical Laboratory,Xinxiang First People's Hospital,Xinxiang,Henan Province,453000 China

[Abstract]Objective To observe the correlation of hepatitis C virus RNA load and anti-HCV and ALT abnormal by FQPCR method.Methods 95 cases of patients with hepatitis C virus infection treated in our hospital from July 2012 to July 2015 were selected and their anti-HCV antibodies and alanine aminotransferase（ALT）were detected and the HCV-RNA positive rate and ALT abnormal rate were counted.Results The HCV-RNA positive rate was 64.2%（61/95）and the anti-HCV positive rate was 69.5%（66/95）of the 95 cases of patients,the Anti-HCV positive rate increased with the increase of HCV-RNA load,the two was positively related,the ALT abnormal rate was 50.5%（48/95）and it increased with the increase of HCV-RNA load,,the two was positively related.Conclusion FQ-PCR method in the detection of hepatitis C shows that HCV-RNA load is obviously related to anti-HCV and ALT concentration,which can be used as an important detection method for the clinical diagnosis and prognosis judgment.

[Key words]Hepatitis C virus;FQ-PCR method;Anti-HCV;ALT

[中图分类号]R5

[文献标识码]A

[文章编号]1674-0742（2016）01（c）-0048-02

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.03.048

[作者简介]宋予娟（1977.5-），女，河南新乡人，硕士，主管检验师，研究方向：免疫学。

收稿日期：（2015-10-18）